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Un protocolo simple, rápido y parcialmente automatizado para el aislamiento de núcleos individuales de tejidos de mamíferos congelados para la secuenciación de núcleos únicos
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A Simple, Quick, and Partially Automated Protocol for the Isolation of Single Nuclei from Frozen Mammalian Tissues for Single Nucleus Sequencing

Un protocolo simple, rápido y parcialmente automatizado para el aislamiento de núcleos individuales de tejidos de mamíferos congelados para la secuenciación de núcleos únicos

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07:12 min

July 28, 2023

DOI:

07:12 min
July 28, 2023

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Esta investigación se centra en apoyar los estudios de descubrimiento de fármacos que utilizan la secuenciación de ARN de un solo núcleo para investigar la eficacia y la seguridad de posibles tratamientos. Por lo tanto, estamos desarrollando protocolos estandarizados de extracción de núcleos para muestras frescas de tejido congelado de varios órganos. Nuestro objetivo era automatizar y estandarizar la extracción de núcleos para lograr resultados consistentes y confiables mediante la reducción de la variabilidad no biológica.

La ventaja es la automatización parcial mediante el uso de un disociador robótico y el flujo de trabajo simple y corto que se puede aplicar en varias muestras de tejido de diferentes especies. Tener protocolos estandarizados puede ayudarnos a responder preguntas sobre la biodistribución de medicamentos, así como a explorar los mecanismos subyacentes a cualquier señal de seguridad que podamos observar. En el futuro, probaremos la aplicabilidad de nuestro protocolo para otras aplicaciones posteriores, como ATAC-seq o multiómica.

También trataremos de establecer protocolos para detectar transgenes virales expresados en núcleos individuales.

Summary

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El estudio describe un protocolo simple, rápido y parcialmente automatizado para aislar núcleos de alta calidad de tejidos de mamíferos congelados para la secuenciación posterior de ARN de núcleos individuales.

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