La metodología presentada de microinyección embrionaria de un retrovirus RCAS en el cristalino de pollo pretende ser una herramienta para estudiar in situ la función y la expresión de proteínas durante el desarrollo del cristalino. En comparación con otros enfoques, como los modelos transgénicos y los cultivos ex vivo, el retrovirus aviar competente para la replicación de RCAS proporciona un sistema altamente efectivo, rápido y personalizable para expresar proteínas exógenas en embriones de pollo. La transferencia génica dirigida puede limitarse a las células proliferativas de la fibra del cristalino sin necesidad de promotores.
Existe un gran potencial para utilizar esta metodología para estudiar el desarrollo, la diferenciación, la comunicación celular y la progresión de la enfermedad del cristalino, y para el descubrimiento y la prueba de dianas terapéuticas para afecciones patológicas del cristalino, como las cataratas.
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Este documento de protocolo describe la metodología de microinyección de un retrovirus RCAS(A) en el cristalino de pollo embrionario como herramienta para estudiar in situ la función y la expresión de proteínas durante el desarrollo del cristalino.
Acosta, F. M., Ma, B., Gu, S., Jiang, J. X. Microinjection of Recombinant RCAS(A) Retrovirus into Embryonic Chicken Lens. J. Vis. Exp. (199), e65727, doi:10.3791/65727 (2023).