Métodos de emparelhamento e manutenção do par de Nova Zelândia branco coelhos (Oryctolagus Cuniculus) Via etograma comportamental, monitoramento e intervenções

Behavior

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Summary

Embora os coelhos europeus são uma espécie social, socialmente habitação-los pode ser um desafio. Portanto, deve haver uma compreensão completa de comportamentos e estruturas sociais de coelhos de laboratório alojados em par. Aqui nós apresentamos um protocolo para identificar o emparelhamento métodos, hierarquia espécie-típico estabelecimento comportamentos e comportamentos que justificam a intervenção apropriada.

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Thurston, S., Burlingame, L., Lester, P. A., Lofgren, J. Methods of Pairing and Pair Maintenance of New Zealand White Rabbits (Oryctolagus Cuniculus) Via Behavioral Ethogram, Monitoring, and Interventions. J. Vis. Exp. (133), e57267, doi:10.3791/57267 (2018).

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Abstract

Coelhos de laboratório Nova Zelândia branco (NZW) (Oryctolagus cuniculus), bem como os seus antepassados o coelho-europeu, são uma espécie social que apresentam inúmeros benefícios a ser abrigado em conformidade. Embora estes coelhos são por natureza gregários, certos comportamentos podem surgir ainda quando mantidos em cativeiro, que se não for controlada, pode confundir os resultados de pesquisa ou de conduzir a ferimento, que, em casos extremos, pode ser grave. Para evitar esses problemas, deve haver um plano bem estruturado para o monitoramento e a manutenção de coelhos de laboratório emparelhados. O propósito do presente protocolo é apresentar procedimentos eficazes para o estabelecimento recém emparelhados coelhos NZW, bem como métodos para a manutenção do sucesso. Vários métodos foram testados para a criação de coelhas recém emparelhadas do fornecedor, mas a técnica mais eficaz enfatiza capitalizando o stress de ligação de transporte, urina marcando, emparelhamento numa jaula com nenhuma partilha forçada de neutro recursos e um sistema de monitoramento e intervenção. Para determinar o melhor método de habitação coelhos emparelhados em um ambiente padrão de enjaulamento, foram recolhidos para gerar uma etograma comportamental. Em seguida foram quantificados como positivo, neutro ou negativo e comportamentos foram rastreados em toda a vida útil do par para determinar quais comportamentos indicaram par sucesso ou fracasso. Com o conhecimento newfound do laboratório socialmente alojado comportamento de coelho NZW, aplicou-se intervenção de enriquecimento para aliviar a agressão e impedir ferimento, resultando assim em uma maior percentagem de sucesso pares. Através de vários anos de diferente métodos, o desenvolvimento da etograma e as intervenções de enriquecimento resultante de emparelhamento de testagem, a compreensão das construções sociais altamente complexas que dominam o comportamento do coelho par alojado tem dramaticamente aumentou e permitido para a prestação de cuidados mais específicas e aumentou os padrões de bem-estar.

Introduction

Regulamentos de cuidados com animais de laboratório fornecem recomendações bem definidas em matéria de habitação social de coelho. Dois dos três padrões primários usados pela AAALAC International para avaliar o cuidado animal e usar programas descrevem orientações para criação apropriada para as espécies e habitação. O primeiro destes recursos de orientação, a edição do guia para o cuidado e o uso de animais de laboratório1 (guia) afirma que espécies sociais tais como coelhos só devem ser alojados isoladamente como uma exceção e alojamento simples não deve se a padrão de habitação. A segunda, a Convenção Europeia para a protecção dos vertebrados animais utilizados para fins experimentais e outros fins científicos2, afirma que os coelhos são uma espécie inerentemente social que deve ser alojada em situações sociais de acordo com o exceção de qualificação veterinária ou pesquisas relacionadas com razões. O escritório do laboratório Animal Welfare (OLAW) também exige que a única habitação só é adequada quando há justificação científica que foi avaliada e aprovada pelo cuidado institucional do Animal e Comissão de utilização (IACUC), os animais são incompatível ou o pessoal veterinário tem uma preocupação de saúde ou bem-estar dos3.

Além de conformidade normativa reunião, literatura revisada fornece muitos exemplos dos benefícios físicos e psicológicos do par de coelhos NZW de habitação. A fim de proporcionar os mais elevados padrões de bem-estar animal, habitação apropriada para as espécies deve ser fornecida ao mesmo tempo atender as metas específicas do pesquisador. Socialmente alojados coelhos NZW participe de comportamentos mais ativo4, exibir fitness amplificado e mostrar diminuiu níveis de estase gastrointestinal devido ao aumento de comportamentos locomotor5. Atividade física é particularmente importante para coelhos de laboratório, como eles são propensos a osteoporose4 quando alojados em um ambiente de gaiola. Além dos benefícios físicos da habitação social, há uma infinidade de benefícios psicológicos. Alojados em par NZW coelhos exibir atividades específicas aumento6, recebem benefícios de enriquecimento da estimulação social4, mostram como o aumento das taxas de self calmante atividades7 , bem como comportamentos de filiação allogrooming8 e exposição de uma habilidade aumentada para gerir a ansiedade de novos estímulos, ou seja, enfatizam o buffer5. Além disso, em comparação com coelhos NZW socialmente isolados socialmente alojados coelhos NZW não diferiram na função imune9 ou anticorpo produção10, no entanto, coelhos alojados individualmente tem a maior frequência cardíaca11 e aumentou glóbulo branco conta10 quando comparado aos coelhos alojados socialmente.

Assim como os benefícios de habitação social estão bem documentados na literatura, então são os detrimentos de isolamento social. Corpo único de uma espécie social pode levar a indicadores fisiológicos de estresse12. Isoladamente alojados coelhos NZW gastam uma quantidade aumentada de tempo sendo inativo e executar comportamentos anormais4 e comportamentos estereotipados indicativos de frustração13,14,15. Estereótipos comuns incluem: mastigando metal tais como barras de gaiola ou alimentador/waterer, autoaliciamento excessiva, lambendo da gaiola e comportamento negativo auto-infligido16. Se eles devem ser alojados isoladamente, a atenção adicional deve ser pago para contrabalançar o estresse do isolamento social. O guia recomenda proporcionando espaço adicional de habitação, apenas habitação isoladamente para o mínimo de tempo possível, permitindo tempo ocasional em uma situação de habitação maior como uma caneta de chão e proporcionar oportunidades de enriquecimento adicional e variado incluindo a interação com outros coelhos quando possível1. AAALAC International recomenda adicionalmente fornecendo acesso protegido, tal que os animais podem ter contato visual, auditivo e olfativo com outros animais17.

Dada a escolha, coelhos preferem estar com outros coelhos. Teste de preferência demonstrada que coelhas NZW trabalhavam quase tanto limitado contato social como eles fizeram para alimentos18. Vários outros estudos têm mostrado que coelhos emparelhados, quando dado a escolha, observaram-se em contato físico com os outros 4,8,19,20. Estes estudos destacam o lugar de coelhos de valor significativo na socialização com coespecíficos. Curiosamente, estes resultados não se aplicam a apenas coelhas. Quando fornecido com um divisor de gaiola modificados que era meio opaco, metade clara, com pequenos furos perfurados na parte mais clara para permitir o acesso social maior, mas protegido, masculinos coelhos NZW passaram mais tempo no bairro da gaiola que forneceu acesso a mais de um macho vizinho que os machos em gaiolas sem os divisores modificados. Os coelhos NZW masculinos com acesso protegido social foram significativamente mais ativos, passar mais tempo em atividade e outros comportamentos e menos comportamentos de manutenção no tais como aliciamento que está associado com o tédio e a privação social. Machos com um divisor modificado também foram menos temerosos de funcionários familiarizados como demonstrado por uma latência reduzida para aproximar uma mão desconhecida que os machos com um divisor padrão; possivelmente devido aos efeitos de buffer sociais da interação com um parceiro de21. Além disso, os padrões circadianos de atividade e o resto dos coelhinhos com divisórias modificados tornou-se sincronizado em um padrão crepuscular, semelhante a coelhos selvagens, Considerando que socialmente isolado de coelhos variaram significativamente de um outro em seus padrões de de atividade e outros21. Literatura sugere que os coelhinhos não são ideais candidatos para habitação social devido a agressão pós maturidade sexual14,22,23,24. Em populações selvagens, as fêmeas são mais gregárias que machos6 e várias fêmeas muitas vezes compartilham um espaço de vida, enquanto os machos tendem a manter uma distância maior entre outros machos que pode levar ao aumento da agressividade, a colocação de machos em espaço limitado de um laboratório da gaiola15,25. Alguns estudos têm tentado socialmente casa machos em uma configuração de caneta maior com resultados mistos14,22,26,27. Um estudo tentou emparelhar os machos em uma configuração de gaiola, que resultou em todos os três pares separados por agressão14. O seguinte protocolo é o primeiro para o conhecimento dos autores que permite a habitação machos com machos irmãos com êxito em um ambiente de gaiola na idade adulta. Não há nenhum emparelhamento de machos independentes ou machos adultos devido à possibilidade de agressão e não pares de macho/fêmea devido a pesquisa usa da colônia.

O primeiro passo para habitação social de coelho é o estabelecimento de novos pares. Este artigo descreve os métodos que permitiram o maior sucesso no seio desta instituição de estabelecer novos pares de fêmeas e a etograma usado para monitoramento estruturado. O protocolo utiliza métodos tais como a urina marcando6,28, sublinhar a ligação, fornecendo o território neutro e não assegurando a partilha nenhum recurso forçado. Nas colônias de coelho selvagem, o macho dominante urina sobre os coelhos do seu grupo de criação de animais (incluindo kits, juvenis e faz) assim, perfume marcando os coelhos que pertencem em seu grupo social29. Esta ideia foi traduzida para a configuração de laboratório aplicando urina recém coletada de um coelho macho na testa de fêmeas recém emparelhadas. Este impregna as fêmeas com um perfume compartilhado para indicar-lhes que eles estão dentro do mesmo grupo de reprodutores e não precisam competir agressivamente. Uma investigação do uso de urina marcando em criar novo coelho fêmea pares encontrados que pares não marcadas eram mais agressivos e exibiram menos comportamentos de filiação do que pares marcados com buck urina6. Tensão de ligação também foi mostrado para ser um método eficaz de emparelhamento na Comunidade coelho companheiro, criando uma situação estressante levemente ambos os coelhos mutuamente expostas a fim de incentivar a adesão de30. Isso normalmente é feito por um passeio de carro ou a pé em uma transportadora. Uma teoria é que os coelhos vão transitar os sentimentos de segurança que eles receberam de ter um parceiro durante este tempo estressante em suas experiências de ligação futura e eles, portanto, será mais prováveis formar um par bem sucedida31. Nova coelhos de chegada que passaram por estresse de transporte do fornecedor de emparelhamento cria um estresse natural experiência que pode ser capitalizada para ajudar com o emparelhamento de ligação. Uma vez que os pares são estabelecidos, um programa eficaz de monitoramento deve ser implementado para controlar o comportamento de par ao longo do tempo para intervir quando necessário. Este artigo destaca a etograma comportamental que foi desenvolvida para permitir uma compreensão completa do comportamento social de coelho e métodos para a manutenção do par. Manutenção do par é muitas vezes um ponto de dificuldade nas instalações, devido à falta de literatura abrangente descrevendo interações sociais coelho padrão e o que eles podem indicar. Pares de coelho são frequentemente separados para interações que parecem estar lutando contra o comportamento, mas são na verdade normais interações sociais que podem ser monitoradas e tranquilizaram com intervenção adequada. Este artigo analisa para aliviar esta fornecendo uma ampla lista de comportamentos para controlar e o que eles podem ser indicativos de. Além disso, intervenção de enriquecimento ambiental é utilizada para auxiliar na prevenção de falha de par. Enriquecimento ambiental adequado pode diminuir comportamentos temerosos e permitir para melhor lidar com estressores1, reduzir comportamentos anormais24,32, proporcionar oportunidades para os requisitos fisiológicos essenciais 33 e global aumentar o bem-estar dos34. Os resultados do inquérito anterior nesta instituição mostraram que aumentar o enriquecimento ambiental facilita maior sucesso na carcaça do par, diminuindo os comportamentos agressivos que surgem em torno da idade de maturidade sexual (12-17 semanas)35 . Este método tem um benefício duplo; o enriquecimento cria uma distração para evitar o combate, bem como, permitindo interações positivas através de comportamentos espécie-típicos.

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Protocol

Este protocolo seguiu os padrões de cuidados, desenvolvido e utilizado pela unidade de medicina Animal de laboratório (ULAM) da Universidade de Michigan (U de M), que recebe a aprovação e supervisão de todos os procedimentos de cuidados com animais e métodos pelo IACUC. O IACUC está em plena conformidade com a oitava edição do guia de. Todos os coelhos foram alojados em gaiolas que foram um mínimo de.46 m2 por gaiola que excede os requisitos mínimos de guia.

1. métodos para a criação de pares feminino do recém chegado coelhos que não foram previamente emparelhado pelo vendedor.

  1. Reunir todos os materiais a seguir antes de emparelhamento:
    1. Colete a urina de um coelho macho. Para fazer isso, derrube o forro por baixo da gaiola para que a lateral de plástico é voltada para cima e coleta de urina na parte superior do forro. Seringa de urina e armazenar em um tubo cônico estéril.
    2. Prepare uma gaiola limpa, neutra para o emparelhamento para tomar lugar. Remova o separador central de modo que o par tem acesso completo à duas gaiolas de lado a lado (também referidas como uma gaiola de "casa"). Certifique-se de que esta gaiola contém os seguintes itens: um mínimo de 2 enriquecimento de baixo valor itens além de 2 elevado valor, enriquecimento destrutível itens, um mínimo de dois esconder oportunidades como poleiro, cabana ou caixa e 2 separar pontos de acesso para comida e água e duas pilhas separadas de feno solto.
    3. Preencha o Log de introdução Social coelho (Figura 1).
    4. Prepare um frasco de spray limpa com água fresca.
  2. Descompacte a primeira fêmea de um contêiner.
    1. Pesar o coelho e executar uma guarnição de unha. Marcar o coelho nas pontas das orelhas com um marcador seguro tóxicos, animal se nenhuma identificação individual está disponível (pelagem, marca auricular, tatuagem, etc.).
      Nota: Use uma cor como azul ou roxo que não vai ser confundido com fluidos corporais como sangue ou urina.
    2. Usando uma bola de algodão ou almofada de gaze, aplicar aproximadamente 1 mL de urina coletado anteriormente fanfarrão testa do coelho e coloque o coelho na gaiola neutra.
    3. Repita os passos 1,2 - 1.2.2 com o segundo coelho com excepção do coelho para identificação de marcação.
      Nota: Apenas um coelho precisa ser marcado para fins de identificação, no entanto, ambos devem ser marcados com urina.
    4. Monitorar o par continuamente por um período mínimo de 1 h e continuar a preencher o Log do coelho Social introdução como o par é monitorado, cada comportamento observado em cada ponto de tempo de gravação.
    5. Intervir com um esguicho de água do frasco pulverizador somente quando morder é observada, ambos os coelhos estão perseguindo cada outro s (circulando) continuamente por mais de 15 anos ou lutar comportamento (por exemplo, justa/lunging) está ocorrendo.
      1. Separar-se temporariamente e verificar fisicamente cada coelho para provas do ferimento se estes comportamentos são anotados.
        Nota: Não pulverize com água se está atrás de um coelho, mas o outro está fugindo. A intervenção deve ser somente quando ambos os coelhos estão ativamente envolvidos na perseguir. Além disso, não intervir muito rapidamente. Durante esta fase, é essencial para os coelhos estabelecer sua hierarquia de dominância e interrupções frequentes e intervenções podem atrasar ou impedir que ocorra este processo necessário.
    6. Entre em contato com o pessoal veterinário se ferindo menores tais como um pelo zero ou puxado, resultando em uma pequena lesão é observada, mas não separe o par.
      1. Continue a monitorar para comportamentos de filiação positivos indicativos do sucesso do par. Referem-se a 3,2 comportamentos positivos/filiação.
    7. Separar imediatamente se tipos específicos de ferimento são notável (ver 3.4.3.2), por lesões ativamente sangrando de exemplo ou qualquer ferimento em ou perto dos órgãos genitais ou dos olhos.
  3. Saia do quarto depois de 1h o par é estável. Completo duas verificações adicionais 10 min em todo o resto do dia (Figura 2).
    Nota: Os sinais de um par estável incluem comportamentos claramente dominantes e submissos, descansando juntos, comer/beber e/ou allogrooming (ver 3.2 positivo/Affiliative comportamentos). Sinais de um par de instável incluem ambos os coelhos engajar-se em comportamentos de dominância clara, recurso a guardar ou interações agressivas (ver 3.4.1 interações agressivas). A maioria das interações agressivas visto durante o emparelhamento ocorre dentro da primeira hora, no entanto, se um par continua a exibir interações agressivas, monitoramento de tempo pode ser aumentado.
  4. Se o par continua a ser estável após ambas as verificações adicionais, embora a par juntos durante a noite.
  5. Fisicamente, verificar os dois coelhos na manhã seguinte por sentimento sob a pele para verificar se há ferimento e verificando os órgãos genitais para lesões.
  6. Se nenhum ferimento significativo é observado, diariamente executam verificações de 10 min sobre o par para o resto da semana. Se o par é mantido para o resto da semana, considere isto como um par estável. Este documento sobre o coelho Social introdução Log e gerar uma interação Social alojado e enriquecimento Log (Figura 3).
    Nota: Pares só são considerados uma falha se eles demonstram a tipos específicos de ferindo (Veja 3.4.3.2) ou se eles não podem ficar juntos durante a noite sem novas lesões menores, sendo encontradas dentro de duas semanas de trabalho. Femininos pares que foram separados devido à agressão ou pesquisas relacionadas com fins podem ser com êxito re-emparelhados com o mesmo parceiro (se separados para fins de pesquisa) ou com uma mulher nova (se separados por agressão), mas pares masculinos adultos que estavam separados pode Nunca re-ser emparelhado devido ao risco de agressão grave. Portanto, a manutenção de pares masculinos é de extrema importância devido ao fato de que uma vez separados, eles ser alojados individualmente para o resto de seu tempo na instalação de animais.

2. métodos para a criação de outros tipos de pares incluindo pares de irmãos feminino no desmame, pares de Non-irmão feminino dentro de uma semana de idade de desmame, Weanlings feminino com sua mãe, irmãos masculino no desmame ou adultos que foram previamente emparelhados do fornecedor.

  1. Prepare o enjaulamento neutro como descrito em 1.1.2.
  2. Concluir uma etapa 1.2.1 e coloque os coelhos juntos.
  3. Monitorar por 5 min garantir a compatibilidade e gerar uma interação Social alojado e Log de enriquecimento.
  4. Prossiga para o passo 1.1 se qualquer lutando comportamentos são vistos e sigam o processo de emparelhamento completo.

3. observe para filiação/positivo, neutro e comportamentos negativos.

  1. Monitorar pares diários e registros de comportamentos observados na interação Social alojado e Log de enriquecimento.
  2. Monitor para comportamentos de filiação/positivo.
    1. Observe o par para comportamentos clara dominância/submissão.
      Nota: Estes comportamentos incluem (mas não estão limitados a) comportamentos em que um coelho está exibindo tendências dominantes como perseguir, montagem, aliciamento, queixo marcação ou batendo e a outra é receber e exibir comportamentos de submissão como fugir, permitindo a montagem ou aliciamento ou manter um queixo para baixo a postura.
    2. Observe os coelhos, compartilhamento de recursos (comida, água, feno).
      Nota: Considere compartilhar recursos como um indicador positivo da estabilidade de par, quando não há competição ou agressão sobre o recurso.
    3. Observe a engajar-se em allo aliciamento comportamentos em que um coelho está enfeitando o outro par.
      Nota: O coelho sendo preparado deve aceitar o aliciamento. Normalmente o dominante está enfeitando o submisso, mas isto pode mudar para o submisso enfeitando o dominante que não indica uma avaria do par.
    4. Observe o comportamento Self aliciamento quando um coelho se sente seguro o suficiente no ambiente compartilhado para aparar em si.
      Nota: Considere Self aliciamento como uma indicação positiva que o par está estável. Se o coelho sentiu-se ameaçado, ele não iria participar neste comportamento de manutenção que exige uma postura de assento vertical aumentando a vulnerabilidade do coelho para atacar com um parceiro hostil.
    5. Observe o comportamento de compartilhamento de espaço quando o coelho escolhe para estar no mesmo local que seus conspecific.
      Nota: A configuração padrão de gaiola fornece amplo espaço para os coelhos ficar no seu próprio território se eles escolhem. Quando eles preferem compartilhar o espaço com seu conspecific, este é um indicador positivo de um par estável.
    6. Observe um coelho engajar-se em interação individual com itens de enriquecimento.
      Nota: A observação de que qualquer coelho se sente seguro o suficiente para se envolver em interação com o enriquecimento ambiental é um indicador positivo.
    7. Observe o par interagir com itens de enriquecimento ambiental juntos.
      Nota: Certifique-se que ambos os coelhos são mutuamente envolvente em interação com o enriquecimento ambiental de uma forma não agressiva e não-competitivas.
  3. Comportamentos neutros.
    1. Observe as instâncias em que nenhuma interação é observada.
      Nota: Pode haver um par que sempre é observado em um estado neutro ou não-interação. Isto pode não indicar qualquer problema, no entanto, se o par é consistentemente neutro e não outros comportamentos positivos ou negativos são já observou que este par deve ser acompanhado de perto. Interações consistentemente neutras podem indicar que o par ainda não estabeleceu uma hierarquia de dominância e é um risco maior de lutar e ferindo comportamentos que o tempo avança.
  4. Comportamentos negativos.
    1. Interações agressivas.
      Nota: Defina interações agressivas como dois coelhos engajar-se em um comportamento negativo ao mesmo tempo. Por exemplo, se está atrás de um coelho e uma fuga, esta não é uma interação negativa, mas se ambos os coelhos estão perseguindo uns aos outros (circular), esta é considerada uma interação agressiva porque ambos os coelhos estão ativamente envolvidos nesse comportamento de dominância.
      1. Estreitamente Assista para morder, ferindo, mútuos perseguindo (circular), recurso a guardar ou pulando uns aos outros de uma forma de luta (justas). Tratá-las como interações agressivas que devem ser interveio.
        1. Quando os comportamentos acima são exibidos, intervir com um esguicho de água do frasco pulverizador para distrair os coelhos do comportamento.
          Nota: Certifique-se que a água nunca é uma ferramenta de punição, prefiro uma técnica de distração. Normalmente os coelhos separará para lados opostos da gaiola para aparar a água fora de suas peles.
          1. Don luvas grossas para evitar lesões e separar manualmente a par se a água não distrair a agressão e a separação física é necessária.
    2. Observe comportamentos que envolvem a dificuldade em estabelecer dominância.
      Nota: Estas situações são essenciais para os observadores ser capaz de identificar porque um par que não é possível estabelecer uma hierarquia de dominância adequada é de um alto risco para falha de par e pode resultar em ferimento se ele não é identificado em tempo hábil.
      1. Para identificar essas situações, procure por pares, em que ambos os coelhos estão exibindo demonstrações de domínio ou o coelho submisso frequentemente se esforça para fugir exibe dominância.
        Por exemplo, se o coelho submisso não aceita montagem e em vez disso, foge daqui ou tenta montar o coelho dominante.
        1. Fornece monitorização adicional e intervenção de enriquecimento para esses pares para tentar ajudá-los no seu estabelecimento de hierarquia.
    3. Ferindo.
      1. Contato pessoal veterinário imediatamente para qualquer ferimento.
      2. Não separe imediatamente o par a menos que tipos específicos de ferimento são observados, por exemplo, sangrando ativamente lesões ou qualquer ferimento em ou perto do genitais ou olhos.
      3. Proporcionar maior enriquecimento para pares mantidos com lesões menores, superficiais, como pequenos arranhões ou crostas, barbeiros ou cabelo puxa e monitor. Não separe esses pares.
    4. Quando qualquer um destes comportamentos são anotados, coloque o par maior intervenção de monitoramento e de enriquecimento.
  5. Monitore para comunicação comportamentos comportamentos que pode preceder a lutar.
    Nota: Os seguintes comportamentos são formas naturais que coelhos usam para comunicar sua hierarquia de dominância com o outro, que se não for controlada, pode prosseguir para combater comportamentos. Observação esses comportamentos é um bom indicador de que um par está trabalhando através de seu estabelecimento de dominância e beneficiaria de maior monitorização e enriquecimento.
    1. Preste atenção para comportamentos perseguindo/fugindo.
      Nota: Este é um comportamento muito comumente visto em coelhos para estabelecer o domínio. Esse comportamento não garante a intervenção com um frasco de spray, enquanto um coelho está fazendo o perseguindo e o outro está a fugir.
    2. Cuidado para a pulverização de urina.
      Nota: Este comportamento é visto com mais frequência em machos adultos emparelhados, mas pode ser observado nas fêmeas emparelhadas, bem como em coelhos alojados individualmente. Urina pode ser pulverizada na gaiola ou no coelho submisso.
    3. Cuidado para a montagem de comportamentos.
      Nota: Esta é uma exposição de dominância muito típica com a montagem dominante e o submisso aceitando.
    4. Atenção aos sinais de barbeiros.
      Nota: Barbeiros é geralmente primeiro observado no nariz, entre as orelhas ou na parte de trás do pescoço. Monitore para garantir que não progride para lesões.
    5. Preste atenção para retumbando comportamentos.
      Nota: Batendo é feito por várias razões de comunicação. Um desses é exibir dominância em uma demonstração de intimidação decisivo de repetidas retumbando em direção o coelho submisso. Retumbando também pode ser feito como um sinal de submissão, quando acompanhadas por um comportamento de fugindo.
    6. Quando qualquer um destes comportamentos são anotados, o par deve ser colocado na maior intervenção de monitoramento e de enriquecimento.

4. métodos para a manutenção de par com a intervenção de enriquecimento ambiental.

  1. Rastrear as idades de coelhos todos emparelhados. Coloque uma nota por trás da placa de gaiola que denota a idade dos coelhos em semanas e atualizá-lo uma vez por semana.
    1. Aumente o monitoramento em torno de 10-20 de semanas quando problemas tendem a surgir35. Começa a maturidade sexual entre 12-17 semanas de idade.
  2. Quando negativo comportamentos (consulte a seção 3.4) ou comportamentos de comunicação (consulte a seção 3.5) são observados, aumentar o enriquecimento do par a três vezes por semana.
    1. Três vezes por semana, fornecer a par com um item de enriquecimento romance (um por coelho) e maior monitorização documentado na interação Social alojado e Log de enriquecimento.
  3. Se comportamentos negativos ou comportamentos de comunicação piorarem ou novos comportamentos são observados, aumente o enriquecimento do par para diariamente.
    1. Todos os dias (incluindo fins de semana e feriados) fornecem a par com um item de enriquecimento romance (um por coelho) e monitorização associado documentado na interação Social alojado e Log de enriquecimento.
  4. Diretrizes de enriquecimento.
    1. Antes da utilização de qualquer item de enriquecimento receba autorização do Comité institucional de enriquecimento e/ou pessoal veterinário.
    2. Fornece um mínimo de item de um enriquecimento por coelho em cada par é girado feno bi-semanal e solto diariamente32.
    3. Certifique-se de que todos os papel e papelão enriquecimento itens são autoclavados antes da utilização, conforme política institucional.
    4. Remova itens de enriquecimento antigos antes de adicionar um novo, para que cada coelho não tem mais de dois itens por vez.
    5. Gire as categorias de enriquecimento para manter a novidade (ver Figura 4).

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Representative Results

Durante um período de 12 meses, 172 pares de coelho de laboratório NZW (62% feminino, 38% do sexo masculino) foram mantidas seguindo o protocolo acima. Desses pares, apenas 20% de pares masculinos e 1% de pares femininos tinham que ser separado para lutar como mostrado na Figura 5. Os pares que foram separados para combater comportamentos foram separados em uma média de 18,5 semanas de idade. A maioria dos pares totais de ambos os sexos (63%) foram separada para fins de pesquisa que não foram relacionados ao emparelhamento, com 29% de pares ainda juntos e apenas 8% do totais pares, tendo que ser separados para a agressão.

Desses pares 172, estáveis emparelhamentos foram capazes de ser mantida até a idade adulta com o par masculino mais antigo, sendo 75 semanas de idade e o par feminino mais antigo, sendo 92 semanas de idade no momento da separação. Ambos estes pares foram separados para fins de investigação e tinham apresentado não exibe ferindo e amplo de comportamentos de filiação durante seu tempo juntos. As fêmeas não relacionadas emparelhado na chegada foram responsável por 21% dos pares de fêmea com os restantes pares femininos e todos os homens sendo desmamados junto de uma colônia de reprodução transgénicos in-house.

No total, apenas 14 anos de 172 pares foram separados para o comportamento agressivo. Estes 14 anos, apenas dois pares exigido tratamento veterinário, além de acompanhamento (uma analgesia necessária e uma sutura). Além disso, de 172 pares no ano passado, apenas dois coelhos tiveram ferimento que não poderiam ser atenuados com terapias padrão ou teve um impacto negativo significativo sobre a sua utilização de pesquisa pretendido.

Figure 1
Figura 1: coelho Social introdução log. Este log permite acompanhamento detalhado de comportamentos comumente vistos durante apresentações sociais. O log é modificado da Royal Society para a prevenção da crueldade contra animais (RSPCA) etograma37. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2: coelho Social introdução Log adicional de monitoramento log. Este log permite acompanhamento detalhado dos comportamentos observados pós-emparelhamento. O dia de emparelhamento requer duas verificações adicionais 10 min enquanto o subsequente três dias apenas requerem uma verificação adicional 10 min. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3: coelho Social abrigava interação e enriquecimento log. Este log permite acompanhamento detalhado dos comportamentos observados e intervenção de enriquecimento fornecidos ao longo da vida do par. Este documento fornece um histórico detalhado dos comportamentos observados e os resultados da intervenção fornecido. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4: categorias de enriquecimento. Esta tabela descreve as diferentes categorias de enriquecimento que são fornecidas para coelhos em um esquema de rotação. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 5
Figura 5: emparelhar os resultados por sexo. Esta figura mostra que a maioria de machos e fêmeas foram separada, para fins de investigação, com o segundo maior maioria dos coelhos ainda sendo emparelhado. O grupo menor de pares que foram separados foi como resultado da luta. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

Um dos desafios mais difíceis para um programa de habitação social de coelho é a diferenciação entre espécies típicos agressivos ou comunicação comportamentos e comportamentos problemáticos de lutando. Um profundo e extenso conhecimento do comportamento social normal coelho é exigido de toda criação e pessoal veterinário, acompanhamento do processo de emparelhamento, desde que muitos comportamentos que parecem ser um comportamento de luta são realmente necessário hierarquia estabelecimento comportamentos Isso normalmente não resultam em lesões. Por exemplo, perseguir e fugir são comportamentos comuns, diariamente dentro de hierarquias estáveis que são usados para reforçar o rank6,29, mas podem ser vistos como comportamentos de luta perigosa que exigem a separação para um olho destreinado. Coelhos de laboratório passam uma percentagem significativa do seu tempo a engajar-se em comportamentos agressivos que contribuem para a manutenção contínua da hierarquia par38 e coelhos selvagens dominantes exigem comportamentos submissos (por exemplo, fugindo) de subordinados como frequentemente como diária15. Se um observador desconhece este fato, pode levar à separação de pares que estão se comportando de uma maneira apropriada para as espécies e não têm uma preocupação que justificariam a separação. Devido à intensidade destes comportamentos espécie-típicos, pode ser difícil determinar quando intervir e quando deixar um tipo par os problemas por conta própria. Isto é especialmente importante ao criar novos pares que são averiguar sua hierarquia de dominância pela primeira vez. Muita intervenção humana pode levar a ser incapaz de estabelecer claramente uma hierarquia de dominância que pode levar ao colapso do par a par. É vital ter dedicado, educado técnicos para monitorar os pares diariamente para saber quando os comportamentos estão progredindo além do ponto de comportamentos de dominância normais. Pares sempre devem ser autorizados a expressar comportamentos espécie-típicos quando possível33.

Treinamento é um passo vital no estabelecimento de um programa de habitação social bem sucedida coelho. É necessário treinar e trabalhar em estreita colaboração com a equipe de criação, pessoal de laboratório e pessoal veterinário durante cada etapa do processo de emparelhamento para instruí-los sobre o que constitui uma separação digna de comportamento e o que é um comportamento típico de espécie aceitável. Pessoal de laboratório deve estar ciente de como entrar em contato com o pessoal veterinário a comportamentos agressivos de relatório em vez de rotineiramente separando pares de coelho. Formação adequada eliminará a separação desnecessária de pares que poderia ter sido mantido juntamente com aumento de enriquecimento e monitoramento.

A taxa de falha de pares masculinos foi provavelmente mais alto do que as fêmeas devido à dificuldade de estabelecer uma hierarquia de dominância bem sucedida no cenário de gaiola espaço limitado. Machos dominantes exigem frequente apresentação atividades da subordinada coelho15 e se estas não são feitas a par não podem ser capazes de estabelecer uma hierarquia eficaz, resultando em falha de par. Mesmo que o coelho subordinado está exibindo os comportamentos de submissão apropriada, a restrição de espaço de uma gaiola não pode permitir adequada fugindo o dominante6,39. Esta é uma das limitações de emparelhamento machos dentro de um cenário de gaiola.

Outra limitação desse método é que a partir da data da publicação, perfumes alternativos não foram testados contra urina dinheirinho para um controle. É possível que um perfume que é mais facilmente obtido por instalações que não têm uma abundância de urina masculina coelho irá criar o mesmo efeito. Trabalho anterior feito este conceito mostrou que buck urina foi mais eficaz em limitar a agressão do que urina doe, então é provável que sendo o odor de um coelho macho é mais significativo do que ser um romance odor6, mas isso não foi testado dentro Esta instituição. Uma limitação adicional é que o protocolo para o emparelhamento só é aplicável aos recém-chegados femininos de um criador comercial, fêmeas desmamadas com uma fêmea irmão ou mãe ou machos desmamados com um irmão masculino neste momento. Procedimentos de otimização estão em andamento para investigar os métodos mais eficazes de emparelhamento fêmeas independentes já ocupa o viveiro dentro de um padrão de sistema de enjaulamento, mas ainda mais o exame é ainda necessário antes desses métodos podem ser recomenda-se com confiança. Esse método também tem a restrição de somente ser aplicável aos machos irmãos que foram desmamados juntos e não recém-criado pares masculinos. Relatórios publicados de criar novos machos emparelhados em gaiolas tem sido mal sucedida14 devido aos seus altos níveis de agressão para machos coespecíficas. As seções de manutenção e de intervenção do presente protocolo, entretanto, são aplicáveis para as fêmeas, bem como os machos (emparelhados na desmama) e como os resultados mostraram, podem ser extremamente eficazes em habitação emparelhados machos bem passado, maturidade sexual e na idade adulta. Este protocolo também só foi testado com coelhos NZW. Investigação adicional sobre outras raças de coelhos é necessária, antes deste protocolo pode ser aplicado às raças de coelho de laboratório que não seja NZW. O protocolo apresentado foi testado com sucesso em coelhos holandeses com cinto, mas não com significativa bastante números que os autores com confiança podem recomendar esse método para outras raças. Finalmente, as gravações foram tiradas em momentos aleatórios durante a jornada de trabalho padrão. Portanto, não foram observados comportamentos que podem estar presentes apenas durante a noite. Esses comportamentos podem ser benéficos em compreender o comportamento do coelho desde que eles são uma espécie crepuscular e podem exibir comportamentos mais ativos ao amanhecer e entardecer40.

Os resultados mostram que aderindo ao protocolo descrito por introduções sociais, manutenção de par, e intervenção de enriquecimento ambiental pode levar a uma colônia de par alojados de coelho NZW bem sucedida no padrão prendendo com reduzida interações negativas que manter os padrões de bem-estar animal e conformidade. Compreendendo os comportamentos típicos para NZW coelho de interação social e o que eles indicam, um processo muito mais rigoroso e eficaz era capaz de ser desenvolvido, que permitia melhorias dos coelhos a qualidade de vida através da criação de pares estáveis e mantendo a experiência para alojados em par como longo como experimentalmente possível.

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Disclosures

Os autores não têm nada para divulgar.

Acknowledgments

Os autores gostaria de agradecer os vários laboratórios ao U de M que utilizam modelos de coelho para o uso generoso de suas colônias, em especial, o laboratório do Dr. Eugene Chen e o centro para modelos avançados para Ciências translacionais e terapêutica ( Equipe de CAMTraST). Agradeço também a equipe de criação do U de M ULAM, Jenny Jones para coordenação de enriquecimento e Katie Wearsch para obter assistência com o emparelhamento.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Euro Rabbit Housing Allentown, Inc. RBEURO-06 Middle divider removed
http://www.allentowninc.com/large-animal-housing/rabbit-ferret/
R-Suite Enriched Rabbit Housing Techniplast 2 attached single cages with middle divider removed
http://www.tecniplast.it/en/product/r-suite-rabbit-housing-rack.html
Lab Animal Marker - Standard Tip Ketchum Manufacturing Blue
http://www.ketchum.ca/products/lab-animal/animal-markers/1313/animal-markers-standard-tip
Western Timothy Hay Oxbow Animal Health http://www.oxbowanimalhealth.com/products/type/detail?object=1530
Spray Bottles Uline S-18404BLU https://www.uline.com/Product/Detail/S-18404BLU/Spray-Bottles/24-oz-Blue-Spray-Bottles
Rabbit liners Blue Ridge Tissue Custom Versa-Pak T.1503 30'' X 30''
http://www.blueridgetissue.com/products/#versa_pak
Premium Full Leather Glove Wells Lamont 0-53300-07006-8 https://www.wellslamont.com/catalog/product/premium-full-leather-glove/
Various Enrichment Toys Bio-Serv Multiple https://www.bio-serv.com/category/Rabbit_Enrichment_Devices.html
Fruit and Veggie Medley Dried Treats Bio-Serv F7227 https://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Treats/FVM.html
White Noise Machine HoMedics https://www.amazon.com/HoMedics-SS-2000G-Relaxation-Machine-Nature/dp/B00A2JBMRE/ref=redir_mobile_desktop/134-
0048439-0235364?_encoding=UTF8&keywords=white%20noise%20machine&qid=1503569413
&ref_=mp_s_a_1_6_a_it&sr=8-6
Safari Soft Bristle Cat Brush Safari https://www.amazon.com/Safari-Soft-Bristle-Brush-Cats/dp/B0002RJMB4
Crink-l'Nest The Andersons Lab Bedding CNK http://www.andersonslabbedding.com/irradiated/crink-lnest/
Manzanita Wood Gnawing Sticks Bio-Serv W0016 http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/W0016.html
Wood Gnawing Blocks Certified Bio-Serv K3511 Small
http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/Wood_Blocks.html
Paper Bags Duro Sack Lunch Bags
https://www.amazon.com/Duro-Paper-Lunch-Brown-Count/dp/B01N0AS7QO/ref=sr_1_9?ie=UTF8&qid=1511194982&sr=8-9
&keywords=paper+bags
Various Sources of Cardboard Recycled supply boxes from the vivarium All cardboard is autoclaved prior to use

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