Overview
यह लेख लार्वा लोकोमोशन की निगरानी करके विषाक्त यौगिकों के लिए जेब्राफिश की व्यवहार प्रतिक्रिया का वर्णन करता है। प्रोटोकॉल आगे पर्यावरण प्रदूषक के लिए जेब्राफिश लार्वा की प्रतिक्रिया का एक उदाहरण देखता है।
Protocol
1. व्यवहार परीक्षण के लिए तैयारी
- 48 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट के हर कुएं में एक्सपोजर समाधान के 800 μL स्थानांतरित करें।
नोट: हर समूह के लिए 16 कुओं का उपयोग करें (यानी, नियंत्रण समाधान, 5 μg/L, और ५० μg/L समूह) । - ग्लास पेट्री डिश से एक लार्वा के साथ एक्सपोजर समाधान के 200 माइक्रोल को स्थानांतरित करने के लिए 1 एमएल पिपेट टिप का उपयोग करें 48 वेल माइक्रोप्लेट के एक कुएं में।
- 6 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट के हर कुएं में एक्सपोजर समाधान के 4 एमएल ट्रांसफर करें।
नोट: हर समूह के लिए एक 6 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट का उपयोग करें। - 6 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट के प्रत्येक कुएं में दो लार्वा के साथ एक्सपोजर समाधान के 200 माइक्रोल को स्थानांतरित करने के लिए 1 एमएल पिपेट टिप का उपयोग करें।
नोट: हर समूह में छह दोहराने वाले समूह होते हैं । - सुनिश्चित करें कि परीक्षण कक्ष का तापमान परीक्षण से पहले 28 डिग्री सेल्सियस 2 घंटे है।
नोट: व्यवहार परीक्षण आमतौर पर दोपहर में किए जाते हैं।
2. लोकोमोशन और पाथ एंगल टेस्ट
- प्रोटोकॉल को सहेजें और परीक्षण कक्ष की रोशनी को बंद करें।
- सिस्टम में लार्वा को 10 मिनट के लिए स्वीकार करें और बदले में"प्रयोग""निष्पादित"बटन पर क्लिक करें, फिर उस फ़ोल्डर का चयन करें जहां प्रयोग फ़ाइलें सहेजी जाती हैं और परिणाम का नाम दर्ज करें।
- टेस्ट शुरू करने के लिए बारी-बारी से'बैकग्राउंड''स्टार्ट'बटन पर क्लिक करें।
- परीक्षण समाप्त होने परप्रयोगको रोकने के लिए बारी-बारी से 'प्रयोग''स्टॉप'बटन पर क्लिक करें।
नोट: सिस्टम बंद होने पर परीक्षण किए गए डेटा को दिखाता है। आंकड़ों में हर मिनट की आठ कोण कक्षाओं में तीन गति कक्षाओं और पथ कोण संख्या पर ट्रैक की दूरी शामिल है । प्रस्तुत उदाहरण में लोकोमोशन परीक्षण के लिए, हर प्रकाश अवधि (10 मिनट) में कुल दूरी की गणना की जाती है और नियंत्रण समूह और उपचार समूहों के बीच अंतर की तुलना में। - अन्य प्रयोगों के लिए 48 वेल माइक्रोप्लेट को वापस लाइट इनक्यूबेटर में स्थानांतरित करें।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 48-well-microplate | Corning | 3548 | Embyros housing |
| 6-well-microplate | Corning | 3471 | Embyros housing |
| Zebrabox | Viewpoint | ZebraBox | Behavior instrument |
| ZebraLab | Viewpoint | ZebraLab | Behavior software |
| Pipette | Eppendorf | 3120000267 | Transfer solution |
