Summary
Här presenterar vi ett protokoll för renal sympatisk denervation (RDN) hos möss med högt blodtryck inducerad av Angiotensin II-infusion. Förfarandet är repeterbart, bekvämt och gör det möjligt att studera regleringsmekanismerna för RDN vid högt blodtryck och hjärthypertrofi.
Abstract
Fördelarna med renal sympatisk denervation (RDN) på blodtrycket har bevisats i ett stort antal kliniska prövningar de senaste åren. Regleringsmekanismen för RDN vid högt blodtryck är dock fortfarande svårfångad. Därför är det viktigt att etablera en enklare RDN-modell hos möss. I denna studie implanterades osmotiska minipumpar fyllda med Angiotensin II i 14 veckor gamla C57BL / 6-möss. En vecka efter implantationen av den mini-osmotiska pumpen utfördes ett modifierat RDN-förfarande på bilaterala njurartärer hos mössen med användning av fenol. Ålderskönsmatchade möss fick saltlösning och fungerade som bluffgrupp. Blodtrycket mättes vid baslinjen och varje vecka därefter i 21 dagar. Därefter samlades njurartär, bukaorta och hjärta för histologisk undersökning med H&E och Massonfärgning. I denna studie presenterar vi en enkel, praktisk, repeterbar och standardiserad RDN-modell, som kan kontrollera högt blodtryck och lindra hjärthypertrofi. Tekniken kan denervera perifera njursympatiska nerver utan njurartärskador. Jämfört med tidigare modeller underlättar den modifierade RDN studien av patobiologi och patofysiologi av högt blodtryck.
Introduction
Hypertoni är en stor kronisk hjärt-kärlsjukdom runt om i världen. Okontrollerad hypertoni kan skada målorgan och bidra till hjärtsvikt, stroke och kroniska njursjukdomar 1,2,3. Förekomsten av högt blodtryck har ökat från 20% till 31% mellan 1991 och 2007 i Kina. Antalet vuxna med högt blodtryck i Kina kan fördubblas efter en nyligen genomförd översyn av de diagnostiska kriterierna för högt blodtryck (130/80 mmHg)4. Hypertoni kan kontrolleras av medicin, men cirka 20% av patienterna kan inte kontrollera sin hypertoni, även när de får minst tre antihypertensiva läkemedel (inklusive ett diuretikum) vid maximalt tolererad dos, vilket kan leda till utveckling av läkemedelsresistent hypertoni5.
Renal sympatisk denervation (RDN) har visat sig vara en potentiell behandling för högt blodtryck. År 2009 rapporterade Krum och kollegor resistent hypertonibehandling med RDN för första gången. Det visade sig att perkutan njurartärablation effektivt kan orsaka ihållande blodtryckssänkning hos patienter6. Misslyckandet med Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) -studien hindrade dock tillämpningen av RDN7, vilket gjorde RDN till en kontroversiell terapi. Ändå har utsikterna till RDN ännu inte uteslutits. Nyligen genomförda kliniska prövningar, inklusive RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED och SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal har bekräftat effekten av RDN på hypertoni 8,9,10,11,12. Således måste mer detaljerad mekanistisk forskning utföras för att utforska effekterna av RDN.
Det övergripande syftet med denna studie är att visa hur RDN hos möss kan modifieras för att ge en enklare och stabilare operation. Ett stort antal experiment har studerat olika tillvägagångssätt för RDN, såsom intravaskulär kryoablation, extrakorporealt ultraljud och lokal tillämpning av en kemikalie eller neurotoxin i olika djurmodeller 13,14,15,16,17. RDN-modellen som genereras med kemisk ablation med fenol är en väletablerad experimentell modell för att studera patogenesen av sympatisk aktivering vid högt blodtryck. Denna modell genereras av kemisk korrosion av njurens sympatiska nerver med 10% fenol / etanollösning med användning av en bomullspinne18. Å ena sidan hämmar den konventionella RDN potentiellt njursympatisk aktivitet, vilket sedan minskar reninsekretion och natriumreabsorption och ökar njurblodflödet. Å andra sidan undertrycker det renin-angiotensin-aldosteronsystem19. Därmed har RDN en positiv effekt på högt blodtryck. Den kemiska ablationsgenererade RDN-modellen saknar dock ablationskriterier och ablationstid och detaljerna i det experimentella förfarandet är ännu oklara. Det finns inte heller några tekniska rapporter tillgängliga. I denna rapport beskriver vi ett kirurgiskt protokoll för generering av RDN-modell med fenol med hjälp av vägpapper i Angiotensin II (Ang II) inducerad hypertoni hos C57BL/6-möss. Vi lindar njurartären med vägningspapper som innehåller fenol och förenar ablationstiden, vilket hjälper till att skapa en mer reproducerbar, pålitlig RDN-modell. Denna experimentella modell syftar till att utvärdera effekten av RDN på högt blodtryck.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djurförsöksförfaranden överensstämde med den relevanta etiska guiden för vård och användning av försöksdjur (NIH-publikation nr 85-23, reviderad 2011) och godkändes av kommittéerna för djurforskning vid Huadong Hospital anslutna till Fudan University. Fjorton veckor gamla manliga C57BL/6-möss (28-30 g) delades slumpmässigt in i fyra grupper: Sham-grupp, Sham+Ang II-grupp, RDN-grupp, RDN+Ang II-grupp, n = 6 i varje grupp. Alla djur hölls under specifika slutna patogenfria förhållanden i ett temperaturkontrollerat rum vid 24 ± 1 °C med en ljus/mörk cykel på 12 timmar och fri tillgång till standard gnagarkhow och vatten ad libitum.
1. Förberedelse av operationsfältet
- Desinficera operationsbordet med 70% etanol. Justera värmedynans temperatur till 37 °C.
- Se till att alla kirurgiska instrument steriliseras före operationen vid 121 °C i 30 minuter eller med andra metoder. Denna procedur kräver mikrokirurgisk sax, två fina raka pincett, två fina böjda pincett, hemostatiska pincett, sterila gasbindor och vägningspapper.
2. Angiotensin II inducerad hypertoni
- Ge meloxikam (0,5 mg/kg, SC) till C57BL/6-mössen strax före anestesiinduktion. Bedöva sedan mössen med natriumpentobarbital injektion som tidigare beskrivits20,21. Isofluran kan också användas, om så önskas. Bekräfta anestesidjupet med en negativ tåklämreflex.
- Ta bort håret på baksidan med en rakapparat. Applicera veterinärsalva på ögonen för att förhindra torrhet under anestesi.
- Placera djuret på ett operationsbord i dorsalläge. Svabba och torka av det rakade området med povidon-jod följt av tre våtservetter med 70% etanol.
- Gör ett snitt på 1 cm med ett sterilt skalpellblad, vinkelrätt mot svansen, bakom örat över frambenets axelblad.
- Använd en steril hemostat för att göra en subkutan tunnel under huden och skapa en ficka för pumpen22. Sätt försiktigt i en osmotisk pump fylld med Angiotensin II (1 000 ng/kg/min) i fickan. Se till att det finns tillräckligt med ledigt utrymme för att suturera såret utan att sträcka huden.
- Suturera muskeln med avbrutna 6-0 Vicryl suturer och stäng huden med avbrutna 4-0 nylon suturer. Swab och torka av sårplatsen med povidon-jod. Utför samma operation med lika stor volym saltlösning för kontrollgruppen.
- Placera alla kirurgiska instrument i en sterilisator i 10 s och byt ut de sterila handskarna mellan operationerna. Övervaka alla möss tills de är helt återställda.
- Noggrant övervaka och observera sårläkning hos möss minst två gånger om dagen under den första veckan och en gång varje dag därefter, inklusive rodnad, svullnad och infektion. Utför dissektion omedelbart om mössen dör under Ang II-infusion.
- Mät blodtrycket vid baslinjen och varje vecka efter infusion med Ang II med svansmanschetten pletysmografimetod23 hos medvetna möss. Se till att blodtrycksmätningsexperimenten utförs i ett lugnt område, vid 22 ± 2 °C, där möss acklimatiseras i 1 timme innan experimentet börjar. Vana möss i minst 5 dagar i följd före blodtrycksmätningar vid baslinjen23,24.
3. Bilateral renal denervation
- Välj möss med förhöjt blodtryck (BP) ≥140/90mmHg eller 25% ökning av systolisk BP / diastolisk BP, 1 vecka efter Ang II-infusionen.
- Registrera djurvikt före operationen och välj djur med en minsta vikt på 24 g för njurdenervationskirurgi.
- Bedöva mössen med natriumpentobarbital. Bekräfta anestesidjupet med en negativ tåklämreflex.
- Ta bort håret på buken med en rakapparat. Utför denna procedur noggrant och noggrant för att undvika kirurgisk kontaminering.
- Placera mössen på operationsbordet, håll buken uppe och fixa benen med tejp. Desinficera bukhuden med povidon-jod följt av tre våtservetter med 70% etanol.
- Gör ett 2 cm ventralt mittlinje buksnitt med ett skalpellblad. Dra tillbaka tarmen med gasväv indränkt i 37 °C saltlösning för att exponera den vänstra njurartären. Dissekera försiktigt men ändå trubbigt fettet bort från njurartären med hjälp av böjd pincett. (Figur 1A-C).
- Skär vägningspapperet i en rektangel av samma storlek som njurartären med steril skarp sax. Som referens skär du vägningspapperet i samma storlek som visas av den streckade linjen i figur 1C.
OBS: Det är en kritisk del av operationen, försök att klippa flera bitar av vägningspapperet åt gången för att behålla samma form. - Doppa vägningspapperet i 10% fenol/etanollösning i minst 30 s. Täck ytan på den vänstra njurartären och linda kärlet med vägningspapperet, håll i 2 minuter (figur 1D). Använd gasväv för att skydda de omgivande vävnaderna för att undvika att vägningspapperet vidrör den omgivande njuren och tarmen.
OBS: Fenollösningen är stabil i plaströr men inte i glasflaskor. Därför måste lösningen vara nyberedd för varje experiment18. - Utför samma procedur för rätt njurartär. Utför skenoperationen med vägningspapper nedsänkt i saltlösning.
- Omplacera musklerna i sin ursprungliga position och stäng bukhinnan med 6-0 Vicryl suturer i en avbruten sutur. Stäng sedan huden med avbrutna 4-0 nylon suturer. Övervaka alla möss tills de är helt återställda.
4. Postoperativ vård
- Applicera povidon-jod på snittet och placera djuret i en uppvärmd elektrisk filt för återhämtning och postoperativ övervakning.
- Övervaka mössen två gånger om dagen för att bedöma för rodnad, svullnad och smärta eller bukinfektion. Ge meloxikam (0,5 mg/kg, SC) till alla möss cirka 1 timme före och 24 timmar efter RDN-proceduren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Statistik
Alla data uttrycks som medelvärde ± standardavvikelse. Envägs ANOVA användes för experiment med tre eller flera tillstånd följt av Bonferroni posthoc-tester för jämförelser mellan enskilda grupper. Betrakta ett p-värde som är lika med eller mindre än 0,05 som signifikant. En kommersiell programvara användes för att utföra all statistisk analys.
Ökning av blodtrycket inducerat av Ang II dämpades efter RDN
Signifikant ökning av systolisk BP (SBP) observerades vid 1 vecka efter infusion med Ang II. RDN + Ang II-gruppen visade signifikant minskning av SBP jämfört med Sham + Ang II-gruppen vid 21 dagar efter RDN-proceduren (143,50 ± 5,43 vs 196,67 ± 14,26 mmHg, p < 0,01). Det fanns ingen skillnad mellan Sham-gruppen och RDN-gruppen (113,33 ± 9,35 jämfört med 113,17 ± 8,47 mmHg, p > 0,05) vid 2 veckor efter RDN (figur 2).
Bekräftelse av RDN och skada på njurartären
Efter 21 dagars infusion med Ang II avlivades djuren med intraperitoneal injektion av natriumpentobarbital (250 mg/kg). Hjärta och njure samlades in. H&E-färgning utfördes för att upptäcka skadorna på njurnerven och njurartärerna. Resultaten visade att det inte fanns någon uppenbar förtjockning av det renala vaskulära intimala skiktet i varje grupp (figur 3A-D). H&E-färgning av njurnerver visade ett stort antal pyknotiska kärnor, matsmältningskammare och svullnadsnervkärnor orsakade av RDN (Figur 3E-H). Immunohistokemin i nervknippena avslöjade att uttrycket av tyrosinhydroxylas (TH, 1:500 utspädning) minskade signifikant i RDN-gruppen och RDN+Ang II-gruppen (figur 4). RDN minskade njurkortikala noradrenalinhalten i både normotensiv och hypertensiv grupp (skengrupp vs RDN-grupp, 18,60 ± 6,91 vs 180,76 ± 11,47 ng/g, p < 0,01; Figur 5).
RDN-behandling mildrade Ang II-infusionsinducerad patologisk hjärthypertrofi
Massonfärgning visade ingen anmärkningsvärd ökning av intima medier av bukaorta bland dessa grupper. Ang II-infusionsinducerad hjärthypertrofi förbättrades genom RDN-behandling, vilket framgår av minskningen av interstitiell fibros (7,45% ± 0,28 mot 4,53% ± 0,32, p < 0,01) och kardiomyocytstorlek (348,39 ± 31,56 vs 322,21 ± 22,26 μm, p = 0,37; Figur 6).
Figur 1: Förfarande för RDN med vägpapper . (A,B) Anatomiska bilder av njurartären från C57BL/6 (ex vivo) möss. C) Delen inom de två streckade linjerna avser det område som täcks av vägningspapperet. D) Täck ytan på den bilaterala njurartären med lämpligt vägningspapper nedsänkt i 10 % fenol/etanollösning. Täck inte filterpapperet bortom den streckade linjen. * anger vägningspapperet. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: RDN lindrar hypertoni inducerad av Ang II-infusion. Blodtrycket mättes med pletysmografimetoden med svansmanschett vid baslinjen och varje vecka efter infusion med Ang II. * indikerar statistisk signifikans (p < 0,05), ** indikerar statistisk signifikans (p < 0,01). Värden representeras som medelvärde ± standardfel; N = 6 i varje grupp; RDN + Ang II-gruppen indikerar renal denervation som opereras 1 vecka efter infusion med Ang II hos C57BL/6-möss. Förkortningar: SBP = systoliskt blodtryck. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: Representativa bilder av njursympatisk nerv och njurartär. (A-D) Ingen förtjockning av intimskiktet i njurartären observerades i de fyra grupperna. Representativa bilder av de skadade njurnerverna efter RDN. (E-H) Fragmenterade och pyknotiska kärnor, matsmältning, svullnad av endoneural vävnad observerades i både RDN och RDN + Ang II-gruppen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: Immunfärgning av tyrosinhydroxylas i njursympatisk nerv . (A) Stark positiv reaktion på TH-antikroppsfärgning observerades hos skenopererade möss, medan en svagare reaktion observerades hos RDN-opererade möss. Skalstreck = 50 μm. (B) Kvantifiering av TH-uttryck i njurnerver. ** indikerar statistisk signifikans (p < 0,01), ns indikerar inte signifikant. Värdena är medelvärdet ± standardfelet; N = 6 i varje grupp; RDN + Ang II-gruppen indikerar renal denervation som opereras 1 vecka efter infusion med Ang II hos C57BL/6-möss. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: Njurkortikala vävnadsnoradrenalinnivåer analyserade av ELISA. Renal kortikal noradrenalinhalt i de denerverade njurarna minskade markant jämfört med dem från den innerverade njuren. ** indikerar statistisk signifikans (p < 0,01), ns indikerar inte signifikant. Värdena är medelvärdet ± standardfelet; N = 6 i varje grupp; RDN+Ang II-gruppen indikerar renal denervation som opereras 1 vecka efter infusion med Ang II i C57BL/6. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 6: RDN lindrar Ang II-inducerad patologisk hjärthypertrofi . (A) Representativa bilder av bukaorta. Ingen förtjockning av intimaskiktet av bukaorta observerades i dessa grupper (Masson färgning). (B,C) Representativa bilder av myokardiet i olika grupper (H&E, Masson färgning). (D) Kvantifiering av procentandelen fibros i vänster kammare och analys av procentandelen fibrosarea (antalet synfält per möss). Skalstreck = 50 μm. N = 6 i varje grupp; RDN + Ang II indikerar renal denervation opererad 1 vecka efter infusion med Ang II i C57BL/6. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Huruvida RDN kunde sänka blodtrycket har blivit kontroversiellt sedan publiceringen av det negativa resultatet av Symplicity HTN-3-studien 7,25. De flera kliniska prövningarna och djurförsöken har dock visat positiva och effektiva resultat av RDN på hypertensiva människor och djur 9,10,11,12,13,14,15,16,17. Fenol används för att förstöra njurnerven hos djur, och detaljerna om ablation är fortfarande okända i tidigare forskning, såsom ablationsområdet och ablationstiden, vilket kan ha bidragit till olika resultat16.
De konventionella metoderna för RDN, såsom användning av bomullspinne med fenol hos råttor, kateterbaserad ablation och stereotaktisk strålbehandling hos svin, orsakar skador på njurnerven 18,26,27,28. Dessa metoder är inte heller lämpliga för möss, som bara väger tiotals gram och är mer benägna att leda till döden. Förutom, dessa metoder orsakar njurartärstenos. Faktum är att vi förberedde RDN-modeller och använde dessa metoder i vårt förexperiment. Men 40/50 möss dog. Metoden med bomullspinne med fenol resulterade i hög dödlighet.
I denna studie etablerades således en metod som möjliggör standardiserad prestanda för RDN, men kräver mindre kirurgisk skicklighet och minskad operationstid. Vi använde 10% fenol / etanol lösningsindränkt vägningspapper, placerat i 2 minuter på njurartären, vilket ger en pålitlig metod för att korrodera den njursympatiska nerven hos möss. Dess effektivitet bekräftas av histopatologi i njurnerven. Det dämpade signifikant SBP-höjden inducerad av Ang II. Dessutom lindrade det också Ang II-inducerad hjärthypertrofi. Dessutom har det förbättrade förfarandet flera egenskaper, inklusive lätt att utföra och ökad framgångsgrad och överlevnad jämfört med konventionella förfaranden.
Den mest kritiska delen av protokollet är att vägningspapperet med fenol inte ska röra de omgivande vävnaderna, annars kan det orsaka dödlig tarmobstruktion, bukinfektion och njurartärstenos. Det rekommenderas att inte röra lösningen till njuren eftersom endast en liten mängd fenol eventuellt kan orsaka njursympatisk överaktivitet18. Dessutom bör särskild uppmärksamhet ägnas vid skärning av vägningspapperet. Det är bättre att skräddarsy det under mikroskopet med kirurgisk sax. Vi rekommenderar inte att isolera njurnerver med mikropincett, eftersom det kan skada njurblodkärlen. Vanligtvis kan proceduren utföras säkert inom 20 minuter, även med långsam prestanda. Dessutom är smältpunkten för fenol 40,5 °C.
Den största begränsningen av det förbättrade RDN-förfarandet är att den postoperativa uppföljningstiden bara var 2 veckor. Effekten av långvarig RDN på BP och njurnervregenerering är oklar.
Framtida tillämpning av denna modell är att producera mer standardiserade denervationsdjurmodeller som kan bidra till att förklara de vägar som ligger till grund för processen med högt blodtryck och hjärthypertrofi.
Sammanfattningsvis är denna metod praktisk och repeterbar. Viktigast av allt kan det generera standardiserade RDN-modeller för att studera mekanismerna som styr högt blodtryck och bekämpar hjärt-kärlsjukdomar som hjärthypertrofi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Det finns inga intressekonflikter, ekonomiska eller på annat sätt, som författarna har förklarat.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation of China (81770420), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (20140900600), Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) och Center of geriatric coronary artery disease, Huadong Hospital Affiliated to Fudan University.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | To make a hypertensive animol model |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody | Abcam | ab137869 | To evaluate the expression of TH of renal nerves |
| Blood Pressure Analysis | Visitech Systems | BP-2000 | Measure the blood pressure of mice |
| Mini-osmotic pump | DURECT Corporation | CA 95014 | To fill with Angiotensin II |
| Norepinephrine ELISA Kit | Abcam | ab287789 | to measure renal norepinephrine levels |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Damage the renal sympathetic nerve |
| Weighing paper | Sangon Biotech | F512112 | To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
References
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research. Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).
- Rossignol, P., et al. The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease. The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).
- Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement. JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).
- Valenzuela, P. L., et al. Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension. Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).
- Krum, H., et al. Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study. The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).
- Bhatt, D. L., et al. A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension. The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).
- Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure. Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).
- Böhm, M., et al. Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).
- Azizi, M., et al. Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).
- Kandzari, D. E., et al. Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial. The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).
- Townsend, R. R., et al. Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial. The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).
- Sun, X., et al. Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury. Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).
- Sharp, T. E., et al. Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system. Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).
- Wang, H., et al. Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering. Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).
- Chen, H., et al. Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation. American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).
- Wang, Y., et al. Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II. Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).
- Eriguchi, M., Tsuruya, K.
- Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. Renal denervation therapy for hypertension. Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).
- Zhang, Y. J., et al. NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux. Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).
- Wang, M., et al. Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats. American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).
- Lu, H., et al. Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).
- Wilde, E., et al. Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse. Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).
- Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).
- Esler, M. Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings. Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).
- Han, W., et al. Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation. Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).
- Han, W., et al. The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment. Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).
- Cai, X., et al. Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model. Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).
