Summary
Her presenterer vi en protokoll for renal sympatisk denervering (RDN) hos mus med hypertensjon indusert av Angiotensin II-infusjon. Prosedyren er repeterbar, praktisk og gjør det mulig å studere reguleringsmekanismer for RDN på hypertensjon og hjertehypertrofi.
Abstract
Fordelene med renal sympatisk denervering (RDN) på blodtrykk har blitt bevist i et stort antall kliniske studier de siste årene. Imidlertid forblir reguleringsmekanismen for RDN på hypertensjon unnvikende. Dermed er det viktig å etablere en enklere RDN-modell hos mus. I denne studien ble osmotiske minipumper fylt med angiotensin II implantert i 14 uker gamle C57BL/6-mus. En uke etter implantasjonen av den mini-osmotiske pumpen ble det utført en modifisert RDN-prosedyre på bilaterale nyrearterier hos musene ved bruk av fenol. Aldersmatchede mus ble gitt saltvann og fungerte som humbuggruppe. Blodtrykket ble målt ved baseline og deretter hver uke i 21 dager. Deretter ble nyrearterie, abdominal aorta og hjerte samlet for histologisk undersøkelse ved hjelp av H&E og Masson farging. I denne studien presenterer vi en enkel, praktisk, repeterbar og standardisert RDN-modell, som kan kontrollere hypertensjon og lindre hjertehypertrofi. Teknikken kan denervate perifere nyre sympatiske nerver uten nyrearterieskader. Sammenlignet med tidligere modeller, letter den modifiserte RDN studiet av patobiologi og patofysiologi av hypertensjon.
Introduction
Hypertensjon er en stor kronisk kardiovaskulær sykdom rundt om i verden. Ukontrollert hypertensjon kan skade målorganer og bidra til hjertesvikt, hjerneslag og kroniske nyresykdommer 1,2,3. Utbredelsen av hypertensjon har økt fra 20% til 31% mellom 1991 og 2007 i Kina. Antall voksne med hypertensjon i Kina kan dobles etter en nylig revisjon av de diagnostiske kriteriene for hypertensjon (130/80 mmHg)4. Hypertensjon kan kontrolleres med medisin, men ca. 20% av pasientene er ikke i stand til å kontrollere hypertensjonen, selv når de får minst tre antihypertensive stoffer (inkludert ett vanndrivende middel) ved maksimal tolerert dose, noe som kan føre til utvikling av stoffresistent hypertensjon.
Renal sympatisk denervering (RDN) har vist seg å være en potensiell behandling for hypertensjon. I 2009 rapporterte Krum og kolleger resistent hypertensjonsbehandling ved hjelp av RDN for første gang. Det ble funnet at perkutan nyrearterieablasjon effektivt kan forårsake vedvarende blodtrykksreduksjon hos pasienter6. Imidlertid hindret feilen i Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) -studien anvendelsen av RDN7, og gjorde RDN til en kontroversiell terapi. Likevel er utsiktene til RDN ennå ikke utelukket. Nylige kliniske studier, inkludert RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED / ON MED og SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal har bekreftet effekten av RDN på hypertensjon 8,9,10,11,12. Dermed må mer detaljert mekanistisk forskning utføres for å undersøke effekten av RDN.
Det overordnede formålet med denne studien er å demonstrere hvordan RDN hos mus kan modifiseres for å produsere en enklere og mer stabil kirurgi. Et stort antall eksperimenter har studert ulike tilnærminger til RDN, for eksempel intravaskulær kryoablasjon, ekstrakorporeal ultralyd og lokal anvendelse av et kjemisk eller nevrotoksin i forskjellige dyremodeller 13,14,15,16,17. RDN-modellen generert ved hjelp av kjemisk ablasjon med fenol er en veletablert eksperimentell modell for å studere patogenesen av sympatisk aktivering på hypertensjon. Denne modellen genereres ved kjemisk korrosjon av nyresympatiske nerver med 10% fenol / etanoloppløsning ved bruk av en bomullspinne18. På den ene siden hemmer konvensjonell RDN potensielt renal sympatisk aktivitet, som deretter reduserer reninsekresjon og natriumreabsorpsjon, og øker nyreblodstrømmen. På den annen side undertrykker det renin-angiotensin-aldosteronsystemet19. Dermed har RDN en gunstig effekt på hypertensjon. Imidlertid mangler den kjemiske ablasjonsgenererte RDN-modellen ablasjonskriterier og ablasjonstid, og detaljene i den eksperimentelle prosedyren er ennå uklare. Det er heller ingen tekniske rapporter tilgjengelig. I denne rapporten beskriver vi en kirurgisk protokoll for generering av RDN-modell med fenol ved bruk av veiepapir i angiotensin II (Ang II) indusert hypertensjon hos C57BL/6 mus. Vi pakker nyrearterien med veiepapir som inneholder fenol og forener ablasjonstiden, noe som bidrar til å etablere en mer reproduserbar, pålitelig RDN-modell. Denne eksperimentelle modellen er rettet mot å evaluere effekten av RDN på hypertensjon.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøksprosedyrer var i samsvar med den relevante etiske veiledningen for stell og bruk av forsøksdyr (NIH-publikasjon nr. 85-23, revidert 2011) og ble godkjent av komiteene for dyreforsøk ved Huadong sykehus tilknyttet Fudan University. Fjorten uker gamle mannlige C57BL / 6-mus (28-30g) ble tilfeldig delt inn i fire grupper: Sham-gruppe, Sham + Ang II-gruppe, RDN-gruppe, RDN + Ang II-gruppe, n = 6 i hver gruppe. Alle dyrene ble opprettholdt under spesifikke lukkede patogenfrie forhold i et temperaturkontrollert rom ved 24 ± 1 °C med en 12 timers lys/mørk syklus og fri tilgang til standard gnager-chow og vann ad libitum.
1. Forberedelse av operasjonsfeltet
- Desinfiser operasjonstabellen med 70% etanol. Juster temperaturen på varmeputen til 37 °C.
- Sørg for at alle kirurgiske instrumenter steriliseres før kirurgi ved 121 °C i 30 minutter eller ved andre metoder. Denne prosedyren krever mikrokirurgisk saks, to fine rette tang, to fine buede tang, hemostatisk tang, sterile gasbind og veiepapir.
2. Angiotensin II indusert hypertensjon
- Gi meloksikam (0,5 mg/kg, SC) til C57BL/6-musene kort tid før anestesiinduksjon. Deretter bedøves musene ved hjelp av natriumpentobarbital injeksjon som tidligere beskrevet20,21. Isofluran kan også brukes, hvis ønskelig. Bekreft anestesidybden med en negativ tåklyperefleks.
- Fjern håret på ryggen med en barbermaskin. Påfør veterinærsalve i øynene for å forhindre tørrhet mens du er under anestesi.
- Plasser dyret på et operasjonsbord i dorsalposisjonen. Vattpinne og tørk det barberte området med povidon-jod etterfulgt av tre våtservietter med 70% etanol.
- Lag et 1 cm snitt ved hjelp av et sterilt skalpellblad, vinkelrett på halen, bak øret over skulderbladet på forbenet.
- Bruk en steril hemostat til å lage en subkutan tunnel under huden og lag en lomme for pumpen22. Sett en saltpumpe fylt med angiotensin II (1000 ng / kg / min) forsiktig i lommen. Sørg for at det er nok ledig plass til å sy såret uten å strekke huden.
- Sutur muskelen med avbrutte 6-0 Vicryl suturer og lukk huden med avbrutte 4-0 nylon suturer. Vattpinne og tørk sårstedet med povidon-jod. Utfør samme operasjon med like mye saltvann for kontrollgruppen.
- Plasser alle kirurgiske instrumenter i en sterilisator i 10 s og erstatt de sterile hanskene mellom operasjonene. Overvåk alle mus til de er helt restituert.
- Overvåk nøye og observer sårheling hos mus minst to ganger om dagen i løpet av den første uken og en gang hver dag senere, inkludert rødhet, hevelse og infeksjon. Utfør disseksjon umiddelbart hvis musene dør under Ang II infusjon.
- Mål blodtrykket ved baseline og hver uke etter Ang II-infusjon med halemansjetten pletysmografimetode23 hos bevisste mus. Sørg for at blodtrykksmålingsforsøkene utføres i et rolig område, ved 22 ± 2 ° C, hvor mus akklimatiseres i 1 time før forsøket begynner. Habituate mus i minst 5 påfølgende dager før baseline blodtrykksmålinger23,24.
3. Bilateral renal denervering
- Velg musene med forhøyet blodtrykk (BP) ≥140 / 90mmHg eller 25% økning i systolisk BP / diastolisk BP, 1 uke etter Ang II-infusjonen.
- Registrer dyrevekt før kirurgi og velg dyr med en minimumsvekt på 24 g for renal denerveringskirurgi.
- Bedøv musene ved hjelp av natriumpentobarbital. Bekreft anestesidybden med en negativ tåklyperefleks.
- Fjern håret på magen med en barbermaskin. Utfør denne prosedyren nøye og grundig for å unngå kirurgisk forurensning.
- Plasser musene på operasjonsbordet, hold magen oppe og fest lemmer med tape. Desinfiser bukhuden med povidon-jod etterfulgt av tre våtservietter med 70% etanol.
- Lag et 2 cm ventralt midtlinjeabdominalt snitt ved hjelp av et skalpellblad. Trekk tarmen tilbake med gasbind dynket i 37 °C saltvann for å eksponere venstre nyrearterie. Forsiktig, men stump dissekere fettet vekk fra nyrearterien ved hjelp av buet pinsett. (Figur 1A-C).
- Skjær veiepapiret i et rektangel av samme størrelse som nyrearterien med steril skarp saks. For referanse, kutt veiepapiret i samme størrelse som vist på den stiplede linjen i figur 1C.
MERK: Det er en kritisk del av operasjonen, prøv å kutte flere stykker av veiepapiret om gangen for å holde samme form. - Dypp veiepapiret i 10% fenol / etanoloppløsning i minst 30 s. Dekk overflaten av venstre nyrearterie og pakk karet med veiepapiret, hold i 2 minutter (figur 1D). Bruk gasbind for å beskytte det omkringliggende vevet for å unngå at veiepapiret berører den omkringliggende nyren og tarmen.
MERK: Fenoloppløsningen er stabil i plastrør, men ikke i glassflasker. Derfor må løsningen være nyforberedt for hvert eksperiment18. - Utfør samme prosedyre for høyre nyrearterie. Utfør humbugoperasjonen med veiepapir nedsenket i saltvann.
- Plasser musklene i sin opprinnelige posisjon og lukk bukhinnen med 6-0 Vicryl suturer i en avbrutt sutur. Lukk deretter huden med avbrutte 4-0 nylonsuturer. Overvåk alle mus til de er helt restituert.
4. Postoperativ behandling
- Påfør povidon-jod til snittet og legg dyret i et oppvarmet varmeteppe for utvinning og postoperativ overvåking.
- Overvåk musene to ganger om dagen for å vurdere rødhet, hevelse og smerte eller abdominal infeksjon. Gi meloksikam (0,5 mg / kg, SC) til alle mus ca 1 time før og 24 timer etter RDN-prosedyren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Statistikk
Alle data uttrykkes som gjennomsnitt ± standardavvik. Enveis ANOVA ble brukt til eksperimenter med tre eller flere tilstander etterfulgt av Bonferroni posthoc-tester for sammenligninger mellom individuelle grupper. Vurder en p-verdi lik eller mindre enn 0,05 som signifikant. En kommersiell programvare ble brukt til å utføre all statistisk analyse.
Økning i blodtrykk indusert av Ang II ble dempet etter RDN
Signifikant økning i systolisk BT (SBP) ble observert 1 uke etter Ang II infusjon. RDN + Ang II-gruppen viste signifikant reduksjon i SBP sammenlignet med Sham + Ang II-gruppen 21 dager etter RDN-prosedyren (143,50 ± 5,43 vs 196,67 ± 14,26 mmHg, p < 0,01). Det var ingen forskjell mellom Sham-gruppen og RDN-gruppen (113,33 ± 9,35 vs 113,17 ± 8,47 mmHg, p > 0,05) 2 uker etter RDN (figur 2).
Bekreftelse av RDN og skade på nyrearterien
Etter 21 dager med Ang II-infusjon ble dyrene avlivet med intraperitoneal injeksjon av natriumpentobarbital (250 mg/kg). Hjerte og nyre ble samlet inn. H&E-farging ble utført for å påvise skade på nyrenerve og nyrearterier. Resultatene viste at det ikke var noen åpenbar fortykkelse av det renale vaskulære intimale laget i hver gruppe (figur 3A-D). H&E-farging av nyrenerver viste et stort antall pyknottiske kjerner, fordøyelseskamre og hevelse nervekjerner forårsaket av RDN (figur 3E-H). Immunhistokjemi av nervebuntene viste at ekspresjonen av tyrosinhydroksylase (TH, 1:500 fortynning) var signifikant redusert i RDN-gruppen og RDN+Ang II-gruppen (figur 4). RDN reduserte nyrekortikal noradrenalininnhold i både normotensiv og hypertensiv gruppe (humbuggruppe vs RDN-gruppe, 18,60 ± 6,91 vs 180,76 ± 11,47 ng / g, p < 0,01; Figur 5).
RDN-behandling reduserte Ang II-infusjon induserte patologisk hjertehypertrofi
Masson farging viste ingen bemerkelsesverdig økning i intima media av abdominal aorta blant disse gruppene. Ang II-infusjonsindusert hjertehypertrofi ble forbedret ved RDN-behandling som vist ved reduksjon i interstitiell fibrose (7,45 % ± 0,28 vs. 4,53 % ± 0,32, p < 0,01) og kardiomyocyttstørrelse (348,39 ± 31,56 vs 322,21 ± 22,26 μm, p = 0,37; Figur 6).
Figur 1: Prosedyre for RDN med veiepapir . (A,B) Anatomiske bilder av nyrearterien fra C57BL/6 (ex vivo) mus. (C) Delen innenfor de to stiplede linjene refererer til området som dekkes av veiepapiret. d) Dekke overflaten av den bilaterale nyrearterien med egnet veiepapir nedsenket i 10 % fenol/etanoloppløsning. Ikke dekk til filterpapiret utover den stiplede linjen. * angir veiepapiret. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: RDN lindrer hypertensjon indusert ved Ang II-infusjon. Blodtrykket ble målt ved halemansjett-pletysmografimetode ved baseline og hver uke etter Ang II-infusjon. * indikerer statistisk signifikans (p < 0,05), ** indikerer statistisk signifikans (p < 0,01). Verdier er representert som gjennomsnitt ± standardfeil; N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II-gruppen indikerer renal denervering operert 1 uke etter Ang II-infusjon hos C57BL/6-mus. Forkortelser: SBP = systolisk blodtrykk. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Representative bilder av renal sympatisk nerve og nyrearterie. (A-D) Det ble ikke observert fortykkelse av intimalaget i nyrearterien i de fire gruppene. Representative bilder av skadede nyrenerver etter RDN. (E-H) Fragmenterte og pyknottiske kjerner, fordøyelse, hevelse i endoneuralt vev ble observert i både RDN og RDN + Ang II-gruppen. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: Immunfarging av tyrosinhydroksylase i renal sympatisk nerve . (A) Sterk positiv reaksjon på TH-antistofffarging ble observert hos humbugopererte mus, mens en svakere reaksjon ble observert hos RDN-opererte mus. Skalabar = 50 μm. (B) Kvantifisering av TH-ekspresjon i nyrenerver. ** indikerer statistisk signifikans (p < 0,01), ns indikerer ikke signifikant. Verdier er gjennomsnitt ± standardfeil; N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II-gruppen indikerer renal denervering operert 1 uke etter Ang II-infusjon hos C57BL/6-mus. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5: Noradrenalinnivåer av nyrekortikalt vev analysert med ELISA. Nyrekortikal noradrenalininnhold i de denervererte nyrene ble markant redusert sammenlignet med de fra den innerverte nyren. ** indikerer statistisk signifikans (p < 0,01), ns indikerer ikke signifikant. Verdier er gjennomsnitt ± standardfeil; N = 6 i hver gruppe; RDN+Ang II-gruppen indikerer renal denervering operert 1 uke etter Ang II-infusjon i C57BL/6. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 6: RDN lindrer Ang II-indusert patologisk hjertehypertrofi . (A) Representative bilder av abdominal aorta. Det ble ikke observert fortykkelse av intimalaget i abdominal aorta i disse gruppene (Masson-farging). (B,C) Representative bilder av myokardiet i forskjellige grupper (H&E, Masson farging). (D) Kvantifisering av prosentandel av fibrose i venstre ventrikkelområde og analyse av prosentandelen av fibroseområde (antall synsfelt per mus). Skala bar = 50 μm. N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II indikerer renal denervering operert 1 uke etter Ang II infusjon i C57BL/6. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Hvorvidt RDN kunne senke blodtrykket har blitt kontroversielt siden publiseringen av det negative resultatet av symplicity HTN-3-studien 7,25. Imidlertid har flere kliniske studier og dyreforsøk vist positive og effektive resultater av RDN på hypertensive mennesker og dyr 9,10,11,12,13,14,15,16,17. Fenol brukes til destruksjon av nyrenerven hos dyr, og detaljene i ablasjon forblir ukjente i tidligere forskning, for eksempel ablasjonsområdet og ablasjonstiden, noe som kan ha bidratt til forskjellige resultater16.
De konvensjonelle metodene for RDN, som bruk av bomullspinne med fenol hos rotter, kateterbasert ablasjon og stereotaktisk strålebehandling hos svin, forårsaker skade på nyrenerven 18,26,27,28. Disse metodene er heller ikke egnet for mus, som veier bare titalls gram, og er mer sannsynlig å føre til døden. Dessuten forårsaker disse metodene nyrearteriestenose. Faktisk utarbeidet vi RDN-modeller og brukte disse metodene i vårt pre-eksperiment. Imidlertid døde 40/50 mus. Metoden med bomullspinne med fenol ga høy dødelighet.
I denne studien ble det derfor etablert en metode som muliggjør standardisert ytelse av RDN, men krever mindre kirurgisk ferdighet og redusert operasjonstid. Vi brukte 10% fenol / etanoloppløsning-gjennomvåt veiepapir, plassert i 2 minutter på nyrearterien, som gir en pålitelig metode for å korrodere renal sympatisk nerve hos mus. Dens effektivitet er bekreftet av histopatologi av nyrenerven. Det dempet SBP-høyden betydelig indusert av Ang II. Videre lindret det også Ang II-indusert hjertehypertrofi. I tillegg har den forbedrede prosedyren flere egenskaper, inkludert lett å utføre og økt suksessrate og overlevelsesrate sammenlignet med konvensjonelle prosedyrer.
Den mest kritiske delen av protokollen er at veiepapiret med fenol ikke skal berøre det omkringliggende vevet, ellers kan det føre til dødelig tarmobstruksjon, abdominal infeksjon og nyrearteriestenose. Det anbefales ikke å berøre oppløsningen til nyrene, da bare en liten mengde fenol muligens kan forårsake nyresympatisk overaktivitet18. Dessuten bør det tas særlig hensyn når du kutter veiepapiret. Det er bedre å skreddersy det under mikroskopet med kirurgisk saks. Vi anbefaler ikke å isolere nyrenervene med mikropinsett, da dette kan skade nyreblodårene. Vanligvis kan prosedyren utføres trygt innen 20 minutter, selv med langsom ytelse. Videre er smeltepunktet for fenol 40,5 °C.
Den største begrensningen av den forbedrede RDN-prosedyren er at den postoperative oppfølgingstiden bare var 2 uker. Effekten av langsiktig RDN på BP og nyrenerveregenerering er uklar.
Fremtidig anvendelse av denne modellen er å produsere mer standardiserte denerveringsdyrmodeller som kan bidra til å forklare veiene som ligger til grunn for prosessen med hypertensjon og hjertehypertrofi.
Avslutningsvis er denne metoden praktisk og repeterbar. Viktigst, det kan generere standardiserte RDN-modeller for å studere mekanismene som styrer hypertensjon og bekjemper kardiovaskulære sykdommer som hjertehypertrofi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Det er ingen interessekonflikter, økonomiske eller på annen måte, som erklært av forfatterne.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (81770420), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (20140900600), Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) og Center of geriatric coronary artery disease, Huadong Hospital tilknyttet Fudan University.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | To make a hypertensive animol model |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody | Abcam | ab137869 | To evaluate the expression of TH of renal nerves |
| Blood Pressure Analysis | Visitech Systems | BP-2000 | Measure the blood pressure of mice |
| Mini-osmotic pump | DURECT Corporation | CA 95014 | To fill with Angiotensin II |
| Norepinephrine ELISA Kit | Abcam | ab287789 | to measure renal norepinephrine levels |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Damage the renal sympathetic nerve |
| Weighing paper | Sangon Biotech | F512112 | To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
References
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research. Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).
- Rossignol, P., et al. The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease. The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).
- Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement. JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).
- Valenzuela, P. L., et al. Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension. Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).
- Krum, H., et al. Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study. The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).
- Bhatt, D. L., et al. A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension. The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).
- Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure. Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).
- Böhm, M., et al. Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).
- Azizi, M., et al. Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).
- Kandzari, D. E., et al. Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial. The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).
- Townsend, R. R., et al. Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial. The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).
- Sun, X., et al. Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury. Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).
- Sharp, T. E., et al. Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system. Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).
- Wang, H., et al. Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering. Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).
- Chen, H., et al. Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation. American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).
- Wang, Y., et al. Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II. Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).
- Eriguchi, M., Tsuruya, K.
- Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. Renal denervation therapy for hypertension. Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).
- Zhang, Y. J., et al. NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux. Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).
- Wang, M., et al. Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats. American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).
- Lu, H., et al. Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).
- Wilde, E., et al. Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse. Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).
- Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).
- Esler, M. Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings. Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).
- Han, W., et al. Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation. Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).
- Han, W., et al. The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment. Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).
- Cai, X., et al. Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model. Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).
