Summary
Her præsenterer vi en protokol for nyresympatisk denervation (RDN) hos mus med hypertension induceret af Angiotensin II infusion. Proceduren er gentagelig, praktisk og gør det muligt at studere RDN's reguleringsmekanismer på hypertension og hjertehypertrofi.
Abstract
Fordelene ved renal sympatisk denervation (RDN) på blodtrykket er blevet bevist i et stort antal kliniske forsøg i de senere år. Imidlertid forbliver reguleringsmekanismen for RDN på hypertension undvigende. Derfor er det vigtigt at etablere en enklere RDN-model hos mus. I denne undersøgelse blev osmotiske minipumper fyldt med Angiotensin II implanteret i 14 uger gamle C57BL/6-mus. En uge efter implantationen af mini-osmotisk pumpe blev der udført en modificeret RDN-procedure på musens bilaterale nyrearterier ved anvendelse af phenol. Aldersmatchede mus fik saltvand og fungerede som falsk gruppe. Blodtrykket blev målt ved baseline og hver uge efterfølgende i 21 dage. Derefter blev nyrearterie, abdominal aorta og hjerte indsamlet til histologisk undersøgelse ved hjælp af H&E og Masson farvning. I denne undersøgelse præsenterer vi en enkel, praktisk, gentagelig og standardiseret RDN-model, som kan kontrollere hypertension og lindre hjertehypertrofi. Teknikken kan denervate perifere nyresympatiske nerver uden nyrearterieskader. Sammenlignet med tidligere modeller letter den modificerede RDN undersøgelsen af patobiologi og patofysiologi af hypertension.
Introduction
Hypertension er en stor kronisk hjerte-kar-sygdom rundt om i verden. Ukontrolleret hypertension kan beskadige målorganer og bidrage til hjertesvigt, slagtilfælde og kroniske nyresygdomme 1,2,3. Forekomsten af hypertension er steget fra 20% til 31% mellem 1991 og 2007 i Kina. Antallet af voksne med hypertension i Kina kan fordobles efter en nylig revision af de diagnostiske kriterier for hypertension (130/80 mmHg)4. Hypertension kan kontrolleres af medicin, men ca. 20% af patienterne er ikke i stand til at kontrollere deres hypertension, selv når de modtager mindst tre antihypertensive lægemidler (herunder et diuretikum) ved maksimalt tolereret dosis, hvilket kan føre til udvikling af lægemiddelresistent hypertension5.
Renal sympatisk denervation (RDN) har vist sig at være en potentiel behandling for hypertension. I 2009 rapporterede Krum og kolleger resistent hypertensionsbehandling ved hjælp af RDN for første gang. Det blev konstateret, at perkutan nyrearterieablation effektivt kan forårsage vedvarende blodtryksreduktion hos patienter6. Fejlen i Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) forsøget hindrede imidlertid anvendelsen af RDN7, hvilket gjorde RDN til en kontroversiel terapi. Ikke desto mindre er udsigten til RDN endnu ikke udelukket. Nylige kliniske forsøg, herunder RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED / ON MED og SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal har bekræftet effekten af RDN på hypertension 8,9,10,11,12. Således skal der udføres mere detaljeret mekanistisk forskning for at undersøge virkningerne af RDN.
Det overordnede formål med denne undersøgelse er at demonstrere, hvordan RDN hos mus kan ændres til at producere en enklere og mere stabil operation. Et stort antal eksperimenter har studeret forskellige tilgange til RDN, såsom intravaskulær kryoablation, ekstrakorporal ultralyd og lokal anvendelse af et kemikalie eller neurotoksin i forskellige dyremodeller 13,14,15,16,17. RDN-modellen genereret ved hjælp af kemisk ablation med phenol er en veletableret eksperimentel model til at studere patogenesen af sympatisk aktivering på hypertension. Denne model genereres ved kemisk korrosion af nyresympatiske nerver med 10% phenol/ethanolopløsning ved anvendelse af en vatpind18. På den ene side hæmmer den konventionelle RDN potentielt renal sympatisk aktivitet, som derefter nedsætter reninsekretion og natriumreabsorption og øger nyreblodgennemstrømningen. På den anden side undertrykker det renin-angiotensin-aldosteronsystem19. Derved har RDN en gavnlig effekt på hypertension. Imidlertid mangler den kemiske ablationsgenererede RDN-model ablationskriterier og ablationstid, og detaljerne i den eksperimentelle procedure er endnu uklare. Der er heller ingen tekniske rapporter tilgængelige. I denne rapport beskriver vi en kirurgisk protokol til generering af RDN-model med phenol ved hjælp af vejepapir i Angiotensin II (Ang II) induceret hypertension hos C57BL / 6 mus. Vi pakker nyrearterien med vejepapir indeholdende phenol og forener ablationstiden, hvilket hjælper med at etablere en mere reproducerbar, pålidelig RDN-model. Denne eksperimentelle model har til formål at evaluere effekten af RDN på hypertension.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøg var i overensstemmelse med den relevante etiske vejledning for pleje og brug af forsøgsdyr (NIH-publikation nr. 85-23, revideret 2011) og blev godkendt af udvalgene for dyreforsøg på Huadong Hospital tilknyttet Fudan University. Fjorten uger gamle C57BL/6-hanmus (28-30 g) blev tilfældigt opdelt i fire grupper: Sham-gruppe, Sham+Ang II-gruppe, RDN-gruppe, RDN+Ang II-gruppe, n = 6 i hver gruppe. Alle dyr blev holdt under specifikke lukkede patogenfrie forhold i et temperaturkontrolleret rum ved 24 ± 1 °C med en 12 timers lys/mørk cyklus og fri adgang til standard gnaver chow og vand ad libitum.
1. Forberedelse af operationsområdet
- Desinficer operationsbordet med 70% ethanol. Temperaturen på varmepladen justeres til 37 °C.
- Sørg for, at alle kirurgiske instrumenter steriliseres før operationen ved 121 °C i 30 minutter eller ved andre metoder. Denne procedure kræver mikrokirurgisk saks, to fine lige tang, to fine buede tang, hæmostatiske tang, sterile gasbind og vejepapir.
2. Angiotensin II induceret hypertension
- Giv meloxicam (0,5 mg/kg, SC) til C57BL/6-musene kort før anæstesiinduktion. Derefter bedøves musene ved hjælp af natriumpentobarbital injektion som tidligere beskrevet20,21. Isofluran kan også bruges, hvis det foretrækkes. Bekræft anæstesidybde med en negativ tåspidsrefleks.
- Fjern håret på bagsiden med en barbermaskine. Påfør dyrlæge salve på øjnene for at forhindre tørhed under anæstesi.
- Placer dyret på et operationsbord i dorsal position. Svøm og tør det barberede område af med povidon-jod efterfulgt af tre klude med 70% ethanol.
- Lav et 1 cm snit ved hjælp af et sterilt skalpelblad, vinkelret på halen, bag øret over skulderbladet på forbenet.
- Brug en steril hæmostat til at lave en subkutan tunnel under huden og skabe en lomme til pumpen22. Indsæt forsigtigt en osmotisk pumpe fyldt med Angiotensin II (1.000 ng/kg/min) i lommen. Sørg for, at der er nok ledig plads til at suturere såret uden at strække huden.
- Sutur musklen med afbrudte 6-0 Vicryl suturer og luk huden med afbrudte 4-0 nylon suturer. Svøm og tør sårstedet med povidon-jod. Udfør den samme operation med samme mængde saltvand til kontrolgruppen.
- Anbring alle de kirurgiske instrumenter i en sterilisator i 10 s og udskift de sterile handsker mellem operationer. Overvåg alle mus, indtil de er helt genoprettet.
- Overvåg nøje og observer sårheling hos mus mindst to gange om dagen i løbet af den første uge og en gang hver dag efterfølgende, herunder rødme, hævelse og infektion. Udfør dissektion straks, hvis musene dør under Ang II infusion.
- Mål blodtrykket ved baseline og hver uge efter Ang II infusion med halemanchet plethysmografi metode23 i bevidste mus. Sørg for, at blodtryksmålingsforsøgene udføres i et roligt område ved 22 ± 2 °C, hvor mus akklimatiseres i 1 time, før forsøget begynder. Habituate mus i mindst 5 på hinanden følgende dage før baseline blodtryksmålinger23,24.
3. Bilateral renal denervation
- Vælg musene med forhøjet blodtryk (BP) ≥140/90mmHg eller 25% stigning i systolisk BP/diastolisk BP, 1 uge efter Ang II infusionen.
- Optag dyrevægt før operationen, og vælg dyr med en minimumsvægt på 24 g til nyredenervationskirurgi.
- Anæstetiser musene ved hjælp af natriumpentobarbital. Bekræft anæstesidybde med en negativ tåspidsrefleks.
- Fjern håret på maven med en barbermaskine. Udfør denne procedure omhyggeligt og grundigt for at undgå kirurgisk forurening.
- Placer musene på operationsbordet, hold maven op og fastgør dens lemmer med tape. Desinficer maveskindet med povidon-jod efterfulgt af tre klude med 70% ethanol.
- Lav et 2 cm ventral midterlinje abdominal snit ved hjælp af et skalpelblad. Træk tarmen tilbage med gasbind gennemblødt i 37 ° C saltvand for at udsætte venstre nyrearterie. Disseker forsigtigt fedtet væk fra nyrearterien ved hjælp af buet pincet. (Figur 1A-C).
- Skær vejepapiret i et rektangel af samme størrelse som nyrearterien med steril skarp saks. Til reference skal du klippe vejepapiret i samme størrelse som vist med den stiplede linje i figur 1C.
BEMÆRK: Det er en kritisk del af operationen, prøv at skære flere stykker af vejepapiret ad gangen for at holde den samme form. - Vejepapiret dyppes i 10 % phenol/ethanolopløsning i mindst 30 s. Dæk overfladen af venstre nyrearterie og pakk beholderen med vejepapiret, hold i 2 minutter (figur 1D). Brug gaze til at beskytte det omgivende væv for at undgå, at vejepapiret rører ved den omgivende nyre og tarm.
BEMÆRK: Phenolopløsningen er stabil i plastrør, men ikke i hætteglas af glas. Derfor skal opløsningen være frisklavet til hvert forsøg18. - Udfør den samme procedure for højre nyrearterie. Udfør den falske operation med vejepapir nedsænket i saltvand.
- Reposition muskler i deres oprindelige position og luk peritoneum med 6-0 Vicryl suturer i en afbrudt sutur. Luk derefter huden med afbrudte 4-0 nylonsuturer. Overvåg alle mus, indtil de er helt genoprettet.
4. Postoperativ pleje
- Påfør povidon-jod på snittet og læg dyret i et opvarmet elektrisk tæppe til genopretning og postoperativ overvågning.
- Overvåg musene to gange om dagen for at vurdere for rødme, hævelse og smerter eller abdominal infektion. Giv meloxicam (0,5 mg/kg, SC) til alle mus ca. 1 time før og 24 timer efter RDN-proceduren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Statistik
Alle data udtrykkes som gennemsnit ± standardafvigelse. Envejs ANOVA blev brugt til eksperimenter med tre eller flere betingelser efterfulgt af Bonferroni posthoc-tests til sammenligninger mellem individuelle grupper. Betragt en p-værdi lig med eller mindre end 0,05 som signifikant. En kommerciel software blev brugt til at udføre al statistisk analyse.
Stigning i blodtryk induceret af Ang II blev svækket efter RDN
Signifikant stigning i systolisk BP (SBP) blev observeret 1 uge efter infusion af Ang II. RDN + Ang II-gruppen viste signifikant reduktion i SBP sammenlignet med Sham + Ang II-gruppen 21 dage efter RDN-proceduren (143,50 ± 5,43 vs 196,67 ± 14,26 mmHg, p < 0,01). Der var ingen forskel mellem Sham-gruppen og RDN-gruppen (113,33 ± 9,35 vs 113,17 ± 8,47 mmHg, p > 0,05) 2 uger efter RDN (figur 2).
Bekræftelse af RDN og beskadigelse af nyrearterien
Efter 21 dages infusion af Ang II blev dyrene aflivet med intraperitoneal injektion af natriumpentobarbital (250 mg/kg). Hjerte og nyre blev indsamlet. H&E-farvning blev udført for at detektere skaden på nyrenerven og nyrearterierne. Resultaterne viste, at der ikke var nogen tydelig fortykkelse af det renale vaskulære intime lag i hver gruppe (figur 3A-D). H&E-farvning af nyrenerver viste et stort antal pyknotiske kerner, fordøjelseskamre og svulmende nervekerner forårsaget af RDN (figur 3E-H). Immunohistokemi af nervebundterne afslørede, at ekspressionen af tyrosinhydroxylase (TH, 1:500 fortynding) var signifikant nedsat i RDN-gruppen og RDN + Ang II-gruppen (figur 4). RDN reducerede nyrekortikal noradrenalinindhold i både normotensiv og hypertensiv gruppe (sham-gruppe vs RDN-gruppe, 18,60 ± 6,91 vs 180,76 ± 11,47 ng / g, p < 0,01; Figur 5).
RDN-behandling mildnede Ang II infusionsinduceret patologisk hjertehypertrofi
Masson farvning viste ingen bemærkelsesværdig stigning i intima medier af abdominal aorta blandt disse grupper. Ang II infusionsinduceret hjertehypertrofi blev forbedret ved RDN-behandling som vist ved faldet i interstitiel fibrose (7,45% ± 0,28 vs 4,53% ± 0,32, p < 0,01) og kardiomyocytstørrelse (348,39 ± 31,56 vs 322,21 ± 22,26 μm, p = 0,37; Figur 6).
Figur 1: Procedure for RDN med vejepapir . (A,B) Anatomiske billeder af nyrearterie fra C57BL/6 (ex vivo) mus. (C) Delen inden for de to stiplede linjer henviser til det område, der er dækket af vejepapiret. D) Dækning af overfladen af den bilaterale nyrearterie med det relevante vejepapir nedsænket i 10 % phenol/ethanolopløsning. Dæk ikke filterpapiret ud over den stiplede linje. * angiver vejepapiret. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: RDN lindrer hypertension induceret af Ang II infusion. Blodtrykket blev målt ved halemanchet plethysmografi metode ved baseline og hver uge efter Ang II infusion. * angiver statistisk signifikans (p < 0,05), ** angiver statistisk signifikans (p < 0,01). Værdier er repræsenteret som middel ± standardfejl; N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II-gruppen indikerer nyredenervation opereret 1 uge efter Ang II-infusion hos C57BL/6-mus. Forkortelser: SBP = systolisk blodtryk. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Repræsentative billeder af nyresympatisk nerve og nyrearterie. (A-D) Der blev ikke observeret nogen fortykkelse af intimalaget af nyrearterien i de fire grupper. Repræsentative billeder af de beskadigede nyrenerver efter RDN. (E-H) Fragmenterede og pyknotiske kerner, fordøjelse, hævelse af endoneuralt væv blev observeret i både RDN og RDN + Ang II gruppe. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Immunostaining af tyrosinhydroxylase i nyresympatisk nerve . (A) Stærk positiv reaktion på TH-antistoffarvning blev observeret hos sham-opererede mus, mens en svagere reaktion blev observeret hos RDN-opererede mus. Skala bar = 50 μm. (B) Kvantificering af TH-ekspression i nyrenerver. ** angiver statistisk signifikans (p < 0,01), ns angiver ikke signifikant. Værdier er middel ± standardfejl; N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II-gruppen indikerer nyredenervation opereret 1 uge efter Ang II-infusion hos C57BL/6-mus. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Renal kortikale væv noradrenalin niveauer analyseret af ELISA. Renal kortikal noradrenalinindhold i de denerverede nyrer blev markant reduceret sammenlignet med dem fra den innerverede nyre. ** angiver statistisk signifikans (p < 0,01), ns angiver ikke signifikant. Værdier er middel ± standardfejl; N = 6 i hver gruppe; RDN+Ang II-gruppen indikerer nyredenervation opereret 1 uge efter Ang II-infusion i C57BL/6. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: RDN lindrer Ang II induceret patologisk hjertehypertrofi . (A) Repræsentative billeder af abdominal aorta. Ingen fortykkelse af intimalaget af abdominal aorta blev observeret i denne gruppe (Masson farvning). (B,C) Repræsentative billeder af myokardiet i forskellige grupper (H&E, Masson farvning). (D) Kvantificering af procentdelen af fibrose i venstre ventrikulære område og analyse af procentdelen af fibroseareal (antallet af synsfelter pr. Mus). Skala bar = 50 μm. N = 6 i hver gruppe; RDN + Ang II indikerer nyredenervation opereret 1 uge efter Ang II infusion i C57BL/6. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Hvorvidt RDN kunne sænke blodtrykket er blevet kontroversielt siden offentliggørelsen af det negative resultat af symplicitet HTN-3 forsøg 7,25. Imidlertid har de mange kliniske forsøg og dyreforsøg vist positive og effektive resultater af RDN på hypertensive mennesker og dyr 9,10,11,12,13,14,15,16,17. Phenol bruges til ødelæggelse af nyrenerven hos dyr, og detaljerne i ablation forbliver ukendte i tidligere forskning, såsom ablationsområdet og ablationstiden, hvilket kan have bidraget til forskellige resultater16.
De konventionelle metoder til RDN, såsom anvendelse af vatpind med phenol hos rotter, kateterbaseret ablation og stereotaktisk strålebehandling hos svin, forårsager skade på nyrenerven 18,26,27,28. Disse metoder er heller ikke egnede til mus, der kun vejer titusinder af gram, og er mere tilbøjelige til at føre til døden. Desuden forårsager disse metoder nyrearteriestenose. Faktisk forberedte vi RDN-modeller og brugte disse metoder i vores præeksperiment. Imidlertid døde 40/50 mus. Metoden med vatpind med phenol resulterede i høj dødelighed.
I denne undersøgelse blev der således etableret en metode, der muliggør den standardiserede ydeevne af RDN, men kræver mindre kirurgisk færdighed og reduceret driftstid. Vi brugte 10% phenol / ethanolopløsning-gennemblødt vejepapir, placeret i 2 minutter på nyrearterien, hvilket giver en pålidelig metode til at korrodere den nyresympatiske nerve hos mus. Dens effektivitet bekræftes af histopatologi af nyrenerven. Det svækkede signifikant SBP-højden induceret af Ang II. Desuden lindrede det også Ang II-induceret hjertehypertrofi. Derudover har den forbedrede procedure flere egenskaber, herunder let at udføre og øget succesrate og overlevelsesrate sammenlignet med konventionelle procedurer.
Den mest kritiske del af protokollen er, at vejepapiret med phenol ikke bør røre ved det omgivende væv, ellers kan det forårsage dødelig tarmobstruktion, abdominal infektion og nyrearteriestenose. Det anbefales ikke at røre ved opløsningen på nyrerne, da kun en lille mængde phenol muligvis kan forårsage nyresympatisk overaktivitet18. Desuden skal der lægges særlig vægt på, når vejepapiret skæres. Det er bedre at skræddersy det under mikroskopet med kirurgisk saks. Vi anbefaler ikke at isolere nyrenerver med mikropincet, da dette kan beskadige nyreblodkarrene. Normalt kan proceduren udføres sikkert inden for 20 minutter, selv med langsom ydeevne. Desuden er smeltepunktet for phenol 40,5 °C.
Den største begrænsning af den forbedrede RDN-procedure er, at den postoperative opfølgningstid kun var 2 uger. Effekten af langsigtet RDN på BP og nyrenerveregenerering er uklar.
Fremtidig anvendelse af denne model er at producere mere standardiserede denervationsdyrmodeller, der kan bidrage til at forklare de veje, der ligger til grund for processen med hypertension og hjertehypertrofi.
Afslutningsvis er denne metode praktisk og gentagelig. Vigtigst er det, at det kan generere standardiserede RDN-modeller til at studere de mekanismer, der styrer hypertension og bekæmper hjerte-kar-sygdomme som hjertehypertrofi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Der er ingen interessekonflikter, økonomiske eller på anden måde, som erklæret af forfatterne.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81770420), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (20140900600), Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) og Center for geriatrisk koronararteriesygdom, Huadong Hospital tilknyttet Fudan University.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | To make a hypertensive animol model |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody | Abcam | ab137869 | To evaluate the expression of TH of renal nerves |
| Blood Pressure Analysis | Visitech Systems | BP-2000 | Measure the blood pressure of mice |
| Mini-osmotic pump | DURECT Corporation | CA 95014 | To fill with Angiotensin II |
| Norepinephrine ELISA Kit | Abcam | ab287789 | to measure renal norepinephrine levels |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Damage the renal sympathetic nerve |
| Weighing paper | Sangon Biotech | F512112 | To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
References
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research. Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).
- Rossignol, P., et al. The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease. The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).
- Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement. JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).
- Valenzuela, P. L., et al. Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension. Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).
- Krum, H., et al. Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study. The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).
- Bhatt, D. L., et al. A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension. The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).
- Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure. Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).
- Böhm, M., et al. Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).
- Azizi, M., et al. Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).
- Kandzari, D. E., et al. Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial. The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).
- Townsend, R. R., et al. Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial. The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).
- Sun, X., et al. Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury. Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).
- Sharp, T. E., et al. Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system. Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).
- Wang, H., et al. Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering. Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).
- Chen, H., et al. Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation. American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).
- Wang, Y., et al. Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II. Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).
- Eriguchi, M., Tsuruya, K.
- Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. Renal denervation therapy for hypertension. Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).
- Zhang, Y. J., et al. NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux. Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).
- Wang, M., et al. Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats. American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).
- Lu, H., et al. Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).
- Wilde, E., et al. Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse. Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).
- Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).
- Esler, M. Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings. Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).
- Han, W., et al. Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation. Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).
- Han, W., et al. The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment. Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).
- Cai, X., et al. Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model. Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).
