Summary
Qui, presentiamo un protocollo per la denervazione simpatica renale (RDN) nei topi con ipertensione indotta dall'infusione di angiotensina II. La procedura è ripetibile, conveniente e consente di studiare i meccanismi regolatori della RDN sull'ipertensione e l'ipertrofia cardiaca.
Abstract
I benefici della denervazione simpatica renale (RDN) sulla pressione sanguigna sono stati dimostrati in un gran numero di studi clinici negli ultimi anni. Tuttavia, il meccanismo regolatore di RDN sull'ipertensione rimane elusivo. Pertanto, è essenziale stabilire un modello RDN più semplice nei topi. In questo studio, mini pompe osmotiche riempite con angiotensina II sono state impiantate in topi C57BL / 6 di 14 settimane. Una settimana dopo l'impianto della pompa mini-osmotica, è stata eseguita una procedura RDN modificata sulle arterie renali bilaterali dei topi usando fenolo. Ai topi di sesso di età corrispondente è stata somministrata soluzione salina e serviti come gruppo fittizio. La pressione sanguigna è stata misurata al basale e successivamente ogni settimana per 21 giorni. Quindi, l'arteria renale, l'aorta addominale e il cuore sono stati raccolti per l'esame istologico utilizzando H & E e la colorazione Masson. In questo studio, presentiamo un modello RDN semplice, pratico, ripetibile e standardizzato, che può controllare l'ipertensione e alleviare l'ipertrofia cardiaca. La tecnica può denervare i nervi simpatici renali periferici senza danni alle arterie renali. Rispetto ai modelli precedenti, l'RDN modificato facilita lo studio della patobiologia e della fisiopatologia dell'ipertensione.
Introduction
L'ipertensione è una delle principali malattie cardiovascolari croniche in tutto il mondo. L'ipertensione incontrollata potrebbe danneggiare gli organi bersaglio e contribuire a insufficienza cardiaca, ictus e malattie renali croniche 1,2,3. La prevalenza dell'ipertensione è aumentata dal 20% al 31% tra il 1991 e il 2007 in Cina. Il numero di adulti con ipertensione in Cina potrebbe raddoppiare a seguito di una recente revisione dei criteri diagnostici per l'ipertensione (130/80 mmHg)4. L'ipertensione può essere controllata dalla medicina, tuttavia, circa il 20% dei pazienti non è in grado di controllare la propria ipertensione, anche quando riceve almeno tre farmaci antipertensivi (incluso un diuretico) alla dose massima tollerata, che può portare allo sviluppo di ipertensione resistente ai farmaci5.
La denervazione simpatica renale (RDN) ha dimostrato di essere un potenziale trattamento per l'ipertensione. Nel 2009, Krum e colleghi hanno riferito di un trattamento per l'ipertensione resistente utilizzando RDN per la prima volta. È stato riscontrato che l'ablazione percutanea dell'arteria renale può causare efficacemente una riduzione persistente della pressione arteriosa nei pazienti6. Tuttavia, il fallimento dello studio Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) ha impedito l'applicazione di RDN7, trasformando RDN in una terapia controversa. Tuttavia, la prospettiva di RDN non è stata ancora esclusa. Recenti studi clinici, tra cui RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED e SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal hanno confermato l'efficacia di RDN sull'ipertensione 8,9,10,11,12. Pertanto, è necessario eseguire ricerche meccanicistiche più dettagliate per esplorare gli effetti di RDN.
Lo scopo generale di questo studio è dimostrare come l'RDN nei topi può essere modificato per produrre un intervento chirurgico più semplice e stabile. Un gran numero di esperimenti ha studiato vari approcci di RDN, come la crioablazione intravascolare, l'ecografia extracorporea e l'applicazione locale di una sostanza chimica o neurotossina in diversi modelli animali 13,14,15,16,17. Il modello RDN generato mediante ablazione chimica con fenolo è un modello sperimentale consolidato per studiare la patogenesi dell'attivazione simpatica sull'ipertensione. Questo modello è generato dalla corrosione chimica dei nervi simpatici renali con una soluzione di fenolo / etanolo al 10% utilizzando un batuffolo di cotone18. Da un lato, l'RDN convenzionale potenzialmente inibisce l'attività simpatica renale, che quindi diminuisce la secrezione di renina e il riassorbimento di sodio e aumenta il flusso sanguigno renale. D'altra parte, sopprime il sistema renina-angiotensina-aldosterone19. In tal modo, RDN ha un effetto benefico sull'ipertensione. Tuttavia, il modello RDN generato dall'ablazione chimica manca di criteri di ablazione e tempo di ablazione e i dettagli della procedura sperimentale non sono ancora chiari. Inoltre, non ci sono rapporti tecnici disponibili. In questo rapporto, descriviamo un protocollo chirurgico per la generazione del modello RDN con fenolo utilizzando carta pesata nell'ipertensione indotta da angiotensina II (Ang II) nei topi C57BL / 6. Avvolgiamo l'arteria renale con carta pesata contenente fenolo e unifichiamo il tempo di ablazione, il che aiuta a stabilire un modello RDN più riproducibile e affidabile. Questo modello sperimentale ha lo scopo di valutare l'effetto di RDN sull'ipertensione.
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Protocol
Tutte le procedure sperimentali sugli animali sono conformi alla guida etica pertinente per la cura e l'uso degli animali da laboratorio (pubblicazione NIH n. 85-23, rivista nel 2011) e sono state approvate dai comitati per la ricerca sugli animali dell'ospedale Huadong affiliato all'Università Fudan. Topi maschi C57BL / 6 di quattordici settimane (28-30g) sono stati divisi casualmente in quattro gruppi: gruppo Sham, gruppo Sham + Ang II, gruppo RDN, gruppo RDN + Ang II, n = 6 in ciascun gruppo. Tutti gli animali sono stati mantenuti in specifiche condizioni chiuse prive di agenti patogeni in una stanza a temperatura controllata a 24 ± 1 °C con un ciclo luce/buio di 12 ore e libero accesso al chow standard per roditori e all'acqua ad libitum.
1. Preparazione del campo operativo
- Disinfettare il tavolo operatorio con etanolo al 70%. Regolare la temperatura del termoforo a 37 °C.
- Assicurarsi che tutti gli strumenti chirurgici siano sterilizzati prima dell'intervento chirurgico a 121 °C per 30 minuti o con altri metodi. Questa procedura richiede micro forbici chirurgiche, due pinze dritte sottili, due pinze curve sottili, pinze emostatiche, garze sterili e carte da pesare.
2. Ipertensione indotta da angiotensina II
- Fornire meloxicam (0,5 mg/kg, SC) ai topi C57BL/6 poco prima dell'induzione dell'anestesia. Quindi, anestetizzare i topi usando l'iniezione di pentobarbital di sodio come descritto in precedenza20,21. L'isoflurano può anche essere usato, se si preferisce. Confermare la profondità dell'anestesia con un riflesso negativo del pizzico della punta.
- Rimuovere i peli sulla schiena con un rasoio. Applicare unguento veterinario agli occhi per prevenire la secchezza durante l'anestesia.
- Posizionare l'animale su un tavolo operatorio in posizione dorsale. Tamponare e pulire l'area rasata con povidone-iodio seguito da tre salviette con etanolo al 70%.
- Fai un'incisione di 1 cm usando una lama sterile di bisturi, perpendicolare alla coda, dietro l'orecchio sopra la scapola della gamba anteriore.
- Utilizzare un emostatico sterile per creare un tunnel sottocutaneo sotto la pelle e creare una tasca per la pompa22. Inserire delicatamente nella tasca una pompa osmotica riempita con angiotensina II (1.000 ng/kg/min). Assicurarsi che ci sia abbastanza spazio libero per suturare la ferita senza allungare la pelle.
- Sutura il muscolo con suture Vicryl 6-0 interrotte e chiudere la pelle con suture di nylon 4-0 interrotte. Tamponare e pulire il sito della ferita con povidone-iodio. Eseguire lo stesso intervento chirurgico con uguale volume di soluzione salina per il gruppo di controllo.
- Mettere tutti gli strumenti chirurgici in uno sterilizzatore per 10 secondi e sostituire i guanti sterili tra un intervento chirurgico e l'altro. Monitorare tutti i mouse fino a quando non sono completamente recuperati.
- Monitorare attentamente e osservare la guarigione delle ferite nei topi almeno due volte al giorno durante la prima settimana e una volta al giorno successivamente, inclusi arrossamento, gonfiore e infezione. Eseguire immediatamente la dissezione se i topi muoiono durante l'infusione di Ang II.
- Misurare la pressione sanguigna al basale e ogni settimana dopo l'infusione di Ang II con il metodo di pletismografia coda-cuffia23 nei topi coscienti. Assicurarsi che gli esperimenti di misurazione della pressione sanguigna siano condotti in una zona tranquilla, a 22 ± 2 ° C, dove i topi sono acclimatati per 1 ora prima dell'inizio dell'esperimento. Topi abituati per almeno 5 giorni consecutivi prima delle misurazioni basali della pressione arteriosa23,24.
3. Denervazione renale bilaterale
- Selezionare i topi con pressione sanguigna elevata (BP) ≥140/90mmHg o aumento del 25% della pressione sistolica / pressione diastolica, 1 settimana dopo l'infusione di Ang II.
- Registrare il peso degli animali prima dell'intervento chirurgico e scegliere animali con un peso minimo di 24 g per la chirurgia di denervazione renale.
- Anestetizzare i topi usando pentobarbital di sodio. Confermare la profondità dell'anestesia con un riflesso negativo del pizzico della punta.
- Rimuovere i peli sull'addome con un rasoio. Eseguire questa procedura con attenzione e accuratamente per evitare qualsiasi contaminazione chirurgica.
- Posiziona i topi sul tavolo operatorio, mantenendo l'addome sollevato e fissando i suoi arti con del nastro adesivo. Disinfettare la pelle addominale con povidone-iodio seguita da tre salviette con etanolo al 70%.
- Fai un'incisione addominale della linea mediana ventrale di 2 cm usando una lama di bisturi. Tirare indietro l'intestino con una garza imbevuta di soluzione salina a 37 °C per esporre l'arteria renale sinistra. Sezionare attentamente ma senza mezzi termini il grasso lontano dall'arteria renale usando una pinzetta curva. (Figura 1A-C).
- Tagliare la carta pesata in un rettangolo delle stesse dimensioni dell'arteria renale con forbici affilate sterili. Per riferimento, tagliare la carta pesata con le stesse dimensioni mostrate dalla linea tratteggiata nella figura 1C.
NOTA: È una parte fondamentale dell'intervento chirurgico, provare a tagliare diversi pezzi della carta pesata alla volta per mantenere la stessa forma. - Immergere la carta pesata in una soluzione di fenolo/etanolo al 10% per almeno 30 s. Coprire la superficie dell'arteria renale sinistra e avvolgere il vaso con la carta da pesata, conservare per 2 minuti (Figura 1D). Utilizzare una garza per proteggere i tessuti circostanti per evitare che la carta pesata tocchi il rene e l'intestino circostanti.
NOTA: La soluzione di fenolo è stabile nei tubi di plastica ma non nei flaconcini di vetro. Pertanto, la soluzione deve essere preparata al momento per ogni esperimento18. - Eseguire la stessa procedura per l'arteria renale destra. Eseguire l'intervento chirurgico fittizio con carta pesata immersa nella soluzione salina.
- Riposizionare i muscoli nella loro posizione iniziale e chiudere il peritoneo con 6-0 suture Vicryl in una sutura interrotta. Quindi, chiudere la pelle con suture di nylon 4-0 interrotte. Monitorare tutti i mouse fino a quando non sono completamente recuperati.
4. Assistenza post-operatoria
- Applicare povidone-iodio all'incisione e posizionare l'animale in una coperta elettrica riscaldata per il recupero e il monitoraggio post-operatorio.
- Monitorare i topi due volte al giorno per valutare arrossamento, gonfiore e dolore o infezione addominale. Fornire meloxicam (0,5 mg/kg, SC) a tutti i topi circa 1 ora prima e 24 ore dopo la procedura RDN.
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Representative Results
Statistica
Tutti i dati sono espressi come media ± deviazione standard. ANOVA unidirezionale è stato utilizzato per esperimenti con tre o più condizioni seguiti da test posthoc Bonferroni per confronti tra singoli gruppi. Si consideri un valore p uguale o minore di 0,05 come significativo. Un software commerciale è stato utilizzato per eseguire tutte le analisi statistiche.
L'aumento della pressione arteriosa indotto da Ang II è stato attenuato dopo RDN
Un aumento significativo della pressione sistolica (SBP) è stato osservato a 1 settimana dopo l'infusione di Ang II. Il gruppo RDN + Ang II ha mostrato una significativa riduzione della SBP rispetto al gruppo Sham + Ang II a 21 giorni dopo la procedura RDN (143,50 ± 5,43 vs 196,67 ± 14,26 mmHg, p < 0,01). Non c'era differenza tra il gruppo Sham e il gruppo RDN (113,33 ± 9,35 vs 113,17 ± 8,47 mmHg, p > 0,05) a 2 settimane dopo RDN (Figura 2).
Conferma di RDN e danno dell'arteria renale
Dopo 21 giorni di infusione di Ang II, gli animali sono stati sottoposti a eutanasia con iniezione intraperitoneale di pentobarbital sodico (250 mg/kg). Cuore e rene sono stati raccolti. La colorazione H & E è stata eseguita per rilevare il danno al nervo renale e alle arterie renali. I risultati hanno mostrato che non vi era alcun evidente ispessimento dello strato intimale vascolare renale in ciascun gruppo (Figura 3A-D). La colorazione H & E dei nervi renali ha mostrato un gran numero di nuclei picnotici, camere di digestione e nuclei nervosi gonfi causati da RDN (Figura 3E-H). L'immunoistochimica dei fasci nervosi ha rivelato che l'espressione della tirosina idrossilasi (TH, diluizione 1:500) era significativamente diminuita nel gruppo RDN e nel gruppo RDN + Ang II (Figura 4). RDN ha ridotto il contenuto di noradrenalina corticale renale sia nel gruppo normotensivo che in quello iperteso (gruppo sham vs gruppo RDN, 18,60 ± 6,91 vs 180,76 ± 11,47 ng / g, p < 0,01; Figura 5).
Il trattamento con RDN ha mitigato l'ipertrofia cardiaca patologica indotta dall'infusione di Ang II
La colorazione di Masson non ha mostrato un notevole aumento dell'intima media dell'aorta addominale tra questi gruppi. L'ipertrofia cardiaca indotta da infusione di Ang II è stata migliorata dal trattamento con RDN, come dimostrato dalla diminuzione della fibrosi interstiziale (7,45% ± 0,28 vs 4,53% ± 0,32, p < 0,01) e delle dimensioni dei cardiomiociti (348,39 ± 31,56 vs 322,21 ± 22,26 μm, p = 0,37; Figura 6).
Figura 1: Procedura di RDN con carta pesata. (A,B) Immagini anatomiche dell'arteria renale di topi C57BL/6 (ex vivo). (C) La parte all'interno delle due linee tratteggiate si riferisce alla superficie coperta dalla carta pesata. D) Coprire la superficie dell'arteria renale bilaterale con l'appropriata carta pesata immersa in una soluzione di fenolo/etanolo al 10%. Non coprire la carta da filtro oltre la linea tratteggiata. * indica la carta pesata. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 2: RDN allevia l'ipertensione indotta dall'infusione di Ang II. La pressione arteriosa è stata misurata con il metodo di pletismografia della coda al basale e ogni settimana dopo l'infusione di Ang II. * indica la significatività statistica (p < 0,05), ** indica la significatività statistica (p < 0,01). I valori sono rappresentati come media ± errore standard; N = 6 in ciascun gruppo; Il gruppo RDN + Ang II indica la denervazione renale operata 1 settimana dopo l'infusione di Ang II nei topi C57BL/6. Abbreviazioni: SBP = pressione arteriosa sistolica. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 3: Immagini rappresentative del nervo simpatico renale e dell'arteria renale. (A-D) Nei quattro gruppi non è stato osservato alcun ispessimento dello strato intima dell'arteria renale. Immagini rappresentative dei nervi renali danneggiati dopo RDN. (E-H) Nuclei frammentati e picnotici, digestione, gonfiore del tessuto endoneurale sono stati osservati sia nel gruppo RDN che RDN + Ang II. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 4: Immunocolorazione della tirosina idrossilasi nel nervo simpatico renale . (A) Una forte reazione positiva alla colorazione degli anticorpi TH è stata osservata nei topi operati da sham, mentre una reazione più debole è stata osservata nei topi operati da RDN. Barra di scala = 50 μm. (B) Quantificazione dell'espressione di TH nei nervi renali. ** indica significatività statistica (p < 0,01), ns indica non significativo. I valori sono una media ± un errore standard; N = 6 in ciascun gruppo; Il gruppo RDN + Ang II indica la denervazione renale operata 1 settimana dopo l'infusione di Ang II nei topi C57BL/6. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 5: Livelli di noradrenalina nel tessuto corticale renale analizzati mediante ELISA. Il contenuto di noradrenalina corticale renale nei reni denervati era marcatamente diminuito rispetto a quelli del rene innervato. ** indica significatività statistica (p < 0,01), ns indica non significativo. I valori sono una media ± un errore standard; N = 6 in ciascun gruppo; Il gruppo RDN+Ang II indica denervazione renale operata 1 settimana dopo l'infusione di Ang II in C57BL/6. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 6: RDN allevia l'ipertrofia cardiaca patologica indotta da Ang II . (A) Immagini rappresentative dell'aorta addominale. In questi gruppi non è stato osservato alcun ispessimento dello strato intima dell'aorta addominale (colorazione Masson). (B,C) Immagini rappresentative del miocardio in diversi gruppi (H & E, colorazione Masson). (D) Quantificazione della percentuale di fibrosi nell'area ventricolare sinistra e analisi della percentuale di area fibrosica (il numero di campi visivi per topo). Barra di scala = 50 μm. N = 6 in ciascun gruppo; RDN + Ang II indica denervazione renale operata 1 settimana dopo l'infusione di Ang II in C57BL/6. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
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Discussion
Se RDN potrebbe abbassare la pressione sanguigna è diventato controverso dopo la pubblicazione del risultato negativo dello studio di symplicity HTN-3 7,25. Tuttavia, i numerosi studi clinici e gli esperimenti sugli animali hanno dimostrato risultati positivi ed efficaci di RDN su esseri umani e animali ipertesi 9,10,11,12,13,14,15,16,17. Il fenolo è usato per la distruzione del nervo renale negli animali e i dettagli dell'ablazione rimangono sconosciuti in ricerche precedenti, come l'area di ablazione e il tempo di ablazione, che potrebbero aver contribuito a risultati diversi16.
I metodi convenzionali per RDN, come l'uso di tampone di cotone con fenolo nei ratti, l'ablazione basata su catetere e la radioterapia stereotassica nei suini, causano danni al nervo renale 18,26,27,28. Questi metodi non sono adatti anche per i topi, che pesano solo decine di grammi e hanno maggiori probabilità di portare alla morte. Inoltre, questi metodi causano stenosi dell'arteria renale. In effetti, abbiamo preparato modelli RDN e utilizzato questi metodi nel nostro pre-esperimento. Tuttavia, 40/50 topi sono morti. Il metodo che utilizza un batuffolo di cotone con fenolo ha provocato un'elevata mortalità.
Pertanto, in questo studio, è stato stabilito un metodo che consente le prestazioni standardizzate di RDN, ma richiede meno abilità chirurgiche e tempi operativi ridotti. Abbiamo usato carta pesata imbevuta di soluzione di fenolo / etanolo al 10%, posta per 2 minuti sull'arteria renale, che fornisce un metodo affidabile per corrodere il nervo simpatico renale nei topi. La sua efficacia è confermata dall'istopatologia del nervo renale. Ha attenuato significativamente l'elevazione di SBP indotta da Ang II. Inoltre, ha anche alleviato l'ipertrofia cardiaca indotta da Ang II. Inoltre, la procedura migliorata ha diverse caratteristiche, tra cui facile da eseguire e aumento del tasso di successo e dei tassi di sopravvivenza rispetto alle procedure convenzionali.
La parte più critica del protocollo è che la carta pesata con fenolo non deve toccare i tessuti circostanti, altrimenti potrebbe causare ostruzione intestinale fatale, infezione addominale e stenosi dell'arteria renale. Si consiglia di non toccare la soluzione al rene poiché solo una piccola quantità di fenolo può causare iperattività simpatica renale18. Inoltre, è necessario prestare particolare attenzione quando si taglia la carta da pesare. È meglio adattarlo al microscopio con forbici chirurgiche. Non è consigliabile isolare i nervi renali con micropinzette, poiché ciò potrebbe danneggiare i vasi sanguigni renali. Di solito, la procedura può essere eseguita in sicurezza entro 20 minuti, anche con prestazioni lente. Inoltre, il punto di fusione del fenolo è 40,5 °C.
La principale limitazione della procedura RDN migliorata è che il tempo di follow-up postoperatorio era di sole 2 settimane. L'effetto della RDN a lungo termine sulla BP e sulla rigenerazione del nervo renale non è chiaro.
L'applicazione futura di questo modello è quella di produrre modelli animali di denervazione più standardizzati che possano contribuire ad esporre i percorsi che sono alla base del processo di ipertensione e ipertrofia cardiaca.
In conclusione, questo metodo è pratico e ripetibile. Ancora più importante, può generare modelli RDN standardizzati per studiare i meccanismi che controllano l'ipertensione e combattono le malattie cardiovascolari come l'ipertrofia cardiaca.
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Disclosures
Non ci sono conflitti di interesse, finanziari o di altro tipo, come dichiarato dagli autori.
Acknowledgments
Questo lavoro è stato supportato dalla National Natural Science Foundation of China (81770420), dalla Science and Technology Commission della municipalità di Shanghai (20140900600), dallo Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), dalla Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) e dal Centro di malattia coronarica geriatrica, Huadong Hospital affiliato alla Fudan University.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | To make a hypertensive animol model |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody | Abcam | ab137869 | To evaluate the expression of TH of renal nerves |
| Blood Pressure Analysis | Visitech Systems | BP-2000 | Measure the blood pressure of mice |
| Mini-osmotic pump | DURECT Corporation | CA 95014 | To fill with Angiotensin II |
| Norepinephrine ELISA Kit | Abcam | ab287789 | to measure renal norepinephrine levels |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Damage the renal sympathetic nerve |
| Weighing paper | Sangon Biotech | F512112 | To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
References
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research. Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).
- Rossignol, P., et al. The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease. The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).
- Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement. JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).
- Valenzuela, P. L., et al. Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension. Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).
- Krum, H., et al. Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study. The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).
- Bhatt, D. L., et al. A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension. The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).
- Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure. Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).
- Böhm, M., et al. Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).
- Azizi, M., et al. Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial. The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).
- Kandzari, D. E., et al. Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial. The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).
- Townsend, R. R., et al. Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial. The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).
- Sun, X., et al. Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury. Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).
- Sharp, T. E., et al. Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system. Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).
- Wang, H., et al. Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering. Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).
- Chen, H., et al. Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation. American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).
- Wang, Y., et al. Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II. Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).
- Eriguchi, M., Tsuruya, K.
- Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. Renal denervation therapy for hypertension. Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).
- Zhang, Y. J., et al. NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux. Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).
- Wang, M., et al. Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats. American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).
- Lu, H., et al. Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).
- Wilde, E., et al. Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse. Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).
- Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).
- Esler, M. Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings. Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).
- Han, W., et al. Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation. Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).
- Han, W., et al. The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment. Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).
- Cai, X., et al. Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model. Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).
