موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:08 دقيقة • April 30th, 2023
جزيئات التصاق الخلايا الظهارية ، أو EpCAMs ، هي بروتينات سكرية عبر الغشاء السطحية يتم التعبير عنها بشكل مفرط في الخلايا الظهارية سريعة التكاثر في سرطانات البروستاتا. لعزل الخلايا الشفرة عن EpCAM ، ابدأ بسلك طبي يحمل طرفا وظيفيا مطلي بالذهب. طبقات وظيفية عبارة عن هلام بوليمري يحتوي على أجسام مضادة خاصة ب EpCAM مرتبطة تساهميا.
اغمر السلك في معلق دم محيطي يحتوي على خلايا سرطانية مصنفة بالفلورسنت. تأكد من أن الجزء الوظيفي يظل مغمورا في معلق الدم. تتعرف EpCAMs على الخلايا السرطانية وترتبط بأجسامها المضادة المحددة التي تعمل على السلك.
اغسل بمخزن مؤقت لإزالة أي خلايا غير مرتبطة من سطح السلك. قم بثني السلك وتثبيته على شريحة زجاجية تحتوي على عازلة ، مع غمر الجزء الوظيفي في المخزن المؤقت. استخدم المجهر الفلوري للتحقق من التألق الساطع من سيتوبلازم الخلية والنوى وتأكيد وجود الخلايا الملتقطة على السلك.
عالج السلك بمخزن مؤقت للتحرير. تشق الإنزيمات المحللة للبروتين في المخزن المؤقت الهلام البوليمري ، وتطلق مجمعات خلايا الأجسام المضادة السرطانية في المخزن المؤقت. الطرد المركزي لمجموعة الأسلاك لجمع مجمعات خلايا الأجسام المضادة المنبعثة في الحبيبات. قم بإزالة السلك والمادة المطفية المحتوية على الإنزيم. أعد تعليق الحبيبات المحتوية على الخلية المستهدفة في وسط مناسب.
في 5 ملليلتر من الدم المحيطي ، أضف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية