تحديد البروتينات ملزمة جزيء صغير في الخلوي البيئة الأصلية التي تعيش خلية Photoaffinity وصفها

12.4K مشاهدة

استشهد بها 4

10:49 دقيقة

سبتمبر 20, 2016

10.3791/54529-v

سبتمبر 20, 2016

12.4K مشاهدة
 , 
1Department of Pharmacology and Molecular Sciences, Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Oncology, Johns Hopkins University School of Medicine

نصف هنا طريقة لتحديد البروتينات المرتبطة بالجزيئات الصغيرة باستخدام وضع العلامات على التقارب الضوئي. تتمثل ميزة هذه التقنية في أن الربط والتساهمية للبروتينات المستهدفة يحدث داخل البيئة الخلوية الحية ، مما يزيل خطر تعطيل بنية البروتين الأصلي وظروف الارتباط عند تحلل الخلية.

استكشف المزيد من الفيديوهات

تحديد هدف الجزيء الصغير
ارتباط مسبار التقارب الضوئي
التشبيك التساهمي
خلايا HEK 293 T
المسح الفلوري للهلام
حبيبات أغاروز الستربتافيدين
تحليل SDS-PAGE
التحديد بواسطة مطيافية الكتلة

Chapters in this video

0:05

Title

0:43

Preparation of Cultured Cells

1:23

Treatment of Cells and Photocrosslinking

4:34

Attachment of Fluorescent Tag by Click Chemistry for Visualization of Labeled Proteins

5:48

Attachment of Biotin Tag by Click Chemistry for Affinity Purification of Labeled Proteins

8:54

Results: Live-cell Photoaffinity Labeling Identifies a Major Itraconazole-binding Protein

10:14

Conclusion

Related Videos

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.