Name: واجهة المستخدم الرسومية لتتبع بمساعدة برنامج تركيز البروتين في النتوءات الخلوية الديناميكية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 12 s
Description: اكتشف تحليل ديناميكيات البروتين في النتوءات الخلوية باستخدام برنامج تتبع شبه آلي. يتيح هذا الأسلوب قياس التمدد والانكماش مع تحديد تركيز البروتين مكانيًا على طول النتوءات في الخلايا الحية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يقر المؤلفون بتمويل من دفغ (إكسك-1003 إلى مغ).

<ol><li>Dunaevsky, A., Tashiro, A., Majewska, A., Mason, C., Yuste, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+regulation+of+spine+motility+in+the+mammalian+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Developmental regulation of spine motility in the mammalian central nervous system.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (23), 13438-13443 (1999).</li>
<li>Matus, A., Brinkhaus, H., Wagner, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+dynamics+in+dendritic+spines%3A+a+form+of+regulated+plasticity+at+excitatory+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Actin dynamics in dendritic spines: a form of regulated plasticity at excitatory synapses.</a> Hippocampus. 10 (5), 555-560 (2000).</li>
<li>Galic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+recruitment+of+the+curvature-sensitive+protein+ArhGAP44+to+nanoscale+membrane+deformations+limits+exploratory+filopodia+initiation+in+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Dynamic recruitment of the curvature-sensitive protein ArhGAP44 to nanoscale membrane deformations limits exploratory filopodia initiation in neurons.</a> Elife. 3, e03116(2014).</li>
<li>Hotulainen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+mechanisms+of+actin+polymerization+and+depolymerization+during+dendritic+spine+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Defining mechanisms of actin polymerization and depolymerization during dendritic spine morphogenesis.</a> J Cell Biol. 185 (2), 323-339 (2009).</li>
<li>Leijnse, N., Oddershede, L. B., Bendix, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Helical+buckling+of+actin+inside+filopodia+generates+traction%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Helical buckling of actin inside filopodia generates traction.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (1), 136-141 (2015).</li>
<li>Tsygankov, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CellGeo%3A+a+computational+platform+for+the+analysis+of+shape+changes+in+cells+with+complex+geometries%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">CellGeo: a computational platform for the analysis of shape changes in cells with complex geometries.</a> J Cell Biol. 204 (3), 443-460 (2014).</li>
<li>Xiong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+characterization+of+cell+shape+changes+during+amoeboid+motility+by+skeletonization%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">Automated characterization of cell shape changes during amoeboid motility by skeletonization.</a> BMC Syst Biol. 4, 33(2010).</li>
<li>Styner, M., Gerig, G., Lieberman, J., Jones, D., Weinberger, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistical+shape+analysis+of+neuroanatomical+structures+based+on+medial+models%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Image+Anal%22%5BJournal%5D)">Statistical shape analysis of neuroanatomical structures based on medial models.</a> Med Image Anal. 7 (3), 207-220 (2003).</li>
<li>Blum, H. A transformation for extracting new descriptors of shape. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBlum%2C+H+%22Models+for+the+Perception+of+Speech+and+Visual+Form%3A+Proceedings+of+a+Symposium%22">Models for the Perception of Speech and Visual Form: Proceedings of a Symposium</a>. Wathen-Dunn, W. , MIT Press. Cambridge, MA. 362-380 (1967).</li>
<li>Barry, D. J., Durkin, C. H., Abella, J. V., Way, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open+source+software+for+quantification+of+cell+migration%2C+protrusions%2C+and+fluorescence+intensities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Open source software for quantification of cell migration, protrusions, and fluorescence intensities.</a> J Cell Biol. 209 (1), 163-180 (2015).</li>
<li>Machacek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+Rho+GTPase+activities+during+cell+protrusion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Coordination of Rho GTPase activities during cell protrusion.</a> Nature. 461 (7260), 99-103 (2009).</li>
<li>Saha, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+filopodial+length+and+spatially+resolved+protein+concentration+via+adaptive+shape+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of filopodial length and spatially resolved protein concentration via adaptive shape tracking.</a> Mol Biol Cell. 27 (22), 3616-3626 (2016).</li>
<li>Argiro, V., Bunge, M. B., Johnson, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+study+of+growth+cone+filopodial+extension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">A quantitative study of growth cone filopodial extension.</a> J Neurosci Res. 13 (1-2), 149-162 (1985).</li>
<li>Mogilner, A., Rubinstein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physics+of+filopodial+protrusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">The physics of filopodial protrusion.</a> Biophys J. 89 (2), 782-795 (2005).</li>
<li>Shaner, N. C., Steinbach, P. A., Tsien, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+choosing+fluorescent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A guide to choosing fluorescent proteins.</a> Nat Methods. 2 (12), 905-909 (2005).</li>
<li>Abramoff, M. D., Magalhaes, P. J., Ram, S. J. <a target="_blank" href="https://imagescience.org/meijering/publications/download/bio2004.pdf">Image Processing with ImageJ.</a> Biophotonics International. 11, 36-42 (2004).</li>
<li>Courtney, J., Woods, E., Scholz, D., Hall, W. W., Gautier, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MATtrack%3A+A+MATLAB-Based+Quantitative+Image+Analysis+Platform+for+Investigating+Real-Time+Photo-Converted+Fluorescent+Signals+in+Live+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">MATtrack: A MATLAB-Based Quantitative Image Analysis Platform for Investigating Real-Time Photo-Converted Fluorescent Signals in Live Cells.</a> PLoS One. 10 (10), e0140209(2015).</li>
<li>Schell, M. J., Erneux, C., Irvine, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inositol+1%2C4%2C5-trisphosphate+3-kinase+A+associates+with+F-actin+and+dendritic+spines+via+its+N+terminus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Inositol 1,4,5-trisphosphate 3-kinase A associates with F-actin and dendritic spines via its N terminus.</a> J Biol Chem. 276 (40), 37537-37546 (2001).</li>
<li>Korobova, F., Svitkina, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+architecture+of+synaptic+actin+cytoskeleton+in+hippocampal+neurons+reveals+a+mechanism+of+dendritic+spine+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Molecular architecture of synaptic actin cytoskeleton in hippocampal neurons reveals a mechanism of dendritic spine morphogenesis.</a> Mol Biol Cell. 21 (1), 165-176 (2010).</li>
<li>Cheadle, L., Biederer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+novel+synaptogenic+protein+Farp1+links+postsynaptic+cytoskeletal+dynamics+and+transsynaptic+organization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The novel synaptogenic protein Farp1 links postsynaptic cytoskeletal dynamics and transsynaptic organization.</a> J Cell Biol. 199 (6), 985-1001 (2012).</li>
<li>Tarnok, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+tool+for+the+quantitative+analysis+of+dendritic+filopodial+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">A new tool for the quantitative analysis of dendritic filopodial motility.</a> Cytometry A. 87 (1), 89-96 (2015).</li>
<li>Hendricusdottir, R., Bergmann, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((F-dynamics%3A+automated+quantification+of+dendrite+filopodia+dynamics+in+living+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">F-dynamics: automated quantification of dendrite filopodia dynamics in living neurons.</a> J Neurosci Methods. 236, 148-156 (2014).</li>
<li>Fanti, Z., Martinez-Perez, M. E., De-Miguel, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NeuronGrowth%2C+a+software+for+automatic+quantification+of+neurite+and+filopodial+dynamics+from+time-lapse+sequences+of+digital+images%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">NeuronGrowth, a software for automatic quantification of neurite and filopodial dynamics from time-lapse sequences of digital images.</a> Dev Neurobiol. 71 (10), 870-881 (2011).</li>
<li>Costantino, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semi-automated+quantification+of+filopodial+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Semi-automated quantification of filopodial dynamics.</a> J Neurosci Methods. 171 (1), 165-173 (2008).</li>
<li>Nilufar, S., Morrow, A. A., Lee, J. M., Perkins, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FiloDetect%3A+automatic+detection+of+filopodia+from+fluorescence+microscopy+images%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">FiloDetect: automatic detection of filopodia from fluorescence microscopy images.</a> BMC Syst Biol. 7, 66(2013).</li>
</ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

هنا نقدم بروتوكول مفصل لتتبع ديناميات النمو فيلوبوديال وتحليل تركيزات البروتين النسبية في هذه الهياكل الديناميكية عبر خوارزمية محدبة-بدن. باستخدام البرنامج، يمكن مقارنة ما يصل إلى 3 قنوات زوج الحكمة في تشغيل واحد، حيث يتم تحديد التركيزات النسبية لقناتين ( أي البروتينات) طوال دورة التمديد / التراجع وتخزينها كملفات الصور والبيانات في مجلدات منفصلة. بالإضافة إلى العمليات الروتينية، ويوفر البرنامج أيضا عددا من المعلمات التي يمكن تعديلها لتحسين التحليل لتجربة منها. ويمكن الاطل...

وترتبط السيطرة المكانية والزمانية للبروتينات التنظيمية أكتين مع ديناميات فيلوبوديوم 1 ، 2 . تتبع مكانيا حل تركيز البروتين على طول طول فيلوبوديال كله من خلال الوقت هو بالتالي حاسمة لتعزيز فهمنا للآليات الكامنة بدء، استطالة، استقرار أو انهيار هذه الهياكل الديناميكية 3 ، 4 . على عكس تحليل البروتين في السيتوسول، حيث تحدث العديد من التغييرات شكل الخلية على نطاق أوسع، فيلوبوديا هي الهياكل الدقيقة الحيوية التي مشبك باستمرار 5 والانحناء، وبالتالي يحول دون تحليل باستخدام نهج بسيط مثل خط المسح الضوئي. حلول البرمجيات المختلفة لتتبع شكل فيلوبوديال متاحة 6 ، 7 ، 8 ، 9 . Likewأيس، وقد تم تطوير البرمجيات لتتبع راتيوميتريك من ديناميات البروتين داخل الجسم الخلية 10 ، 11 . للجمع بين التتبع الآلي لشكل فيلوبوديال وتحليل البروتين المكاني والزماني، قمنا مؤخرا بتطوير برنامج تحليل الصور على أساس خوارزمية محدبة-بدن 12 . طريقة التحليل الرواية هذه، التي يتم تشغيلها من خلال واجهة المستخدم الرسومية (غوي)، تجمع لأول مرة، تركيز البروتين النسبي على طول طول الفيلوبوديال وسرعة النمو، مما يسمح بالقياس الدقيق لتوزيع البروتين المكاني الزماني المستقل عن حركة هذه الهياكل الديناميكية 12 . الفكرة وراء البرنامج (شفرة المصدر متاحة بحرية، انظر أدناه) هو أن واحدة من القمم من بدن محدب سوف تتزامن مع غيض من فيلوبوديوم ( الشكل 1A ). من خلال النظر في الإطار اللاحق فوr أقرب قمة الرأس من محدب بدن، ويمكن تتبع طرف متحرك في جميع أنحاء الفيلم كله. مرة واحدة يتم الكشف عن طرف في كل إطار، يتم استخدام موقفها لرسم محور عن طريق الانضمام إلى طرف مع نقطة مرجعية في قاعدة فيلوبوديوم ( الشكل 1B ). وأخيرا، تستخدم النقاط العشرية متساوية البعد، التي يتم تحديد مواقفها من قبل بكسل المتوسط ​​مع أقصى كثافة على طول خط متعامد للمحور، وتستخدم لتحديد العمود الفقري الذي يتبع شكل فيلوبوديال. الاستفادة من هذا العمود الفقري للتكيف، يتم إنشاء كيموجراف لتتبع نمو فيلوبوديال وتركيزات البروتين لمدة تصل إلى ثلاث قنوات على طول طول فيلوبوديال ( الشكل 1C ). <img alt="شكل 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55653/55653fig1.jpg" /> الشكل 1: مبدأ العمل من برامج تحليل الصور. ( A ) الخوارزمية وراءالبرنامج. في STEP1 يحدد المستخدم المرجع (قاعدة) و قمة الرأس (غيض) من فيلوبوديوم. في الخطوة 2-1 يتم الحصول على العمود الفقري للفيلوبوديوم باستخدام بكسل المتوسطة مع أقصى قيمة شدة. في الخطوة 3 يتم استخدام العمود الفقري لملامح كثافة البروتين المكاني. في الخطوة 2-2 يقوم البرنامج بتتبع الطرف تلقائيا في الإطار اللاحق. الإجراء بأكمله يتكرر. ( ب ) لقطة من الخوارزمية مع فيلوبوديوم الحقيقي إدخال عناصر هامة مثل الهيكل المحدب الذي يتم استخدامه للتتبع. ( C ) نظرة عامة على المعلمات التي يمكن قياسها مع الخوارزمية. وقد عدل هذا الرقم من المرجع 12 . <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55653/55653fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> يتم تشغيل برنامج تحليل الصور في ماتلاب (المشار إليها باسم برمجة البرمجيات) عن طريق استخدام رسوميةr واجهة. لتحقيق أقصى قدر من المرونة والمتانة لإعداد تجريبي معين، يمكن للمستخدم ضبط سلسلة من المعلمات تتبع (على سبيل المثال يسمح زاوية الانحناء والحركة بين الإطار) وأيضا إجراء بعض التصحيحات على الأفلام ( مثل المحاصيل، والتناوب، وإزالة الأجسام غير المرغوب فيها) ( الشكل 2A والجدول 1) . <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> واجهة المستخدم الرسومية </td><td> لا. </td><td> إلزامي </td><td colspan="5"> وصف </td><td> الاسم (في واجهة المستخدم الرسومية) </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 1A </td><td> Y </td><td colspan="5"> تحميل ملف .tiff مكدسة تمثل الجسم الخلية (مع مربع فحص) أو إنشاء جسم خلية فرضه من القنوات </td><td> CellBody </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 1B </td><td> Y </td><td colspan=&quot;5&quot;&gt; تحميل ملف صورة مكدسة المقابلة للبروتين 1 </td><td> البروتين 1 </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 1C </td><td> Y </td><td colspan="5"> تحميل ملف صورة مكدسة المقابلة للبروتين 2 </td><td> بروتين 2 </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 1D </td><td> Y </td><td colspan="5"> تحميل ملف صورة مكدسة المقابلة للبروتين 3 </td><td> بروتين 3 </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 1E </td><td> N </td><td colspan="5"> إعادة تعيين كل شيء لتحميل مسبق ملفات الصور مكدسة </td><td> إعادة تعيين </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2A </td><td> Y </td><td colspan="5"> شريط التمرير لتحديد الإطار الأولي للتحليل في إطار واجهة المستخدم الرسومية # 2 </td><td> NA </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2B </td><td> Y </td><td colspan="5"> شريط التمرير لتحديد الإطار النهائي للتحليل في نافذة واجهة المستخدم الرسومية # 2 </td><td> NA </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2C </td><td> Y </td><td colspan="5"> شريط التمرير يمثل كيرنت الإطار </td><td> NA </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2D </td><td> N </td><td colspan="5"> القيمة الرمادية للبكسل التي سيتم تعيين جميع وحدات البكسل فيها على الصفر </td><td> NA </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2E </td><td> N </td><td colspan="5"> القيمة الرمادية للبكسل التي سيتم تعيين جميع وحدات البكسل فيها على القيم القصوى </td><td> NA </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2F </td><td> N </td><td colspan="5"> عين قيم شدة البكسل المحددة بواسطة &lt;2e&gt; &amp; &lt;2f&gt; </td><td> جلس </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2G </td><td> N </td><td colspan="5"> تلعب الفيلم تعديل كثافة </td><td> لعب </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2H </td><td> N </td><td colspan="5"> قص الصوره </td><td> ا &amp; قتصاص </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2I </td><td> N </td><td colspan="5"> تدوير الصورة </td><td> استدارة </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 2J </td><td> N </td><td colspan="5">احذف المناطق في المجموعة بأكملها </td><td> حذف المناطق </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 3A </td><td> Y </td><td colspan="5"> انقر لفتح &quot;نافذة التحليل&quot; (نافذة واجهة المستخدم الرسومية رقم 2) </td><td> نافذة التتبع </td></tr><tr><td> # 1 </td><td> 3B </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل حجم بكسل في ميكرون </td><td> أدخل حجم بكسل </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 4 </td><td> Y </td><td colspan="5"> انقر لتوليد صورة الحدود / حافة الجسم الخلية فرضه </td><td> حدود </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 5 </td><td> Y </td><td colspan="5"> انقر لتحديد قاعدة و غيض من فيلوبوديا </td><td> Referernce </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6A </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل عدد الشرائح أو العقد </td><td> لا من القطاعات </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6B </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل طول المسح الضوئي (عمودي على المحور) </td><td> عرض المسح الضوئي </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6C </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل طول أعلاه الذي فيلوبوديا يبدأ الانحناء </td><td> دقيقة دقيقة بعد </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6D </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل نصف قطر الدائرة الكشف عن طرف (أي المنطقة حيث يمكن أن تكون موضعيا قمة الرأس في الإطار التالي) </td><td> نصف القطر للكشف عن طرف </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6E </td><td> Y </td><td colspan="5"> أدخل أقصى زاوية فيلوبوديوم يمكن أن ينحني من المحور الرأسي </td><td> زاوية العتبة </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6F </td><td> N </td><td colspan="5"> إضافة نقاط مرجعية للقاعدة والطرف لهذا الإطار المحدد </td><td> حدد المرجع </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6G </td><td> N </td><td colspan="5"> أدخل طول أعلاه الذي فيلوبوديا يبدأ الانحناء لهذا الإطار محددة </td><td> دقيقة دقيقة بعد </td></tr><tr><td> # 2 </td> &lt;td&gt; 6H </td><td> N </td><td colspan="5"> أدخل نصف قطر دائرة الكشف عن هذا الإطار المحدد </td><td> نصف القطر للكشف عن طرف </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6I </td><td> N </td><td colspan="5"> بعد إدخال كافة المعلمات لإطار محدد انقر لتخزين القيم إلى الذاكرة والملف لمزيد من المرجع </td><td> إضافة </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6J </td><td> N </td><td colspan="5"> انقر لحذف مجموعة المعلمات يدويا لهذا الإطار </td><td> حذف </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6K </td><td> N </td><td colspan="5"> انقر لحذف جميع المعلمات المخزنة يدويا باستخدام &quot;لوحة الميزات الاختيارية&quot; لجميع الإطارات </td><td> إعادة تعيين </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 6L </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق قبل المتابعة لتخزين جميع نتائج التتبع في الذاكرة للرجوع إليها في المستقبل </td><td> تتبع التاريخ </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 7 </td><td> Y </td><td colspan="5"> انقر لبدء التتبع </td><td> تتبع وتحليل </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8A </td><td> N </td><td colspan="5"> انقر لبدء تتبع كثافة قناة البروتين </td><td> تحليل كثافة البروتين </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8B </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في لتتبع كثافة قناة البروتين على طول طول فيلوبوديال </td><td> فيلوبوديا كله </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8C </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في لتتبع البروتين المرجعي أو البروتين A </td><td> ProteinA </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8D </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في لتتبع البروتين B </td><td> ProteinB </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8E </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في لتتبع البروتين C </td><td> ProteinC </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8F </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في لتتبع متوسط ​​كثافة البروتين في ثe تلميح </td><td> نصيحة رئيسية </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8G </td><td> N </td><td colspan="5"> أدخل طول الطرف </td><td> طول النصيحة </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8H </td><td> N </td><td colspan="5"> أدخل الحد الأدنى للمسافة من القاعدة أعلاه التي تبدأ غيض تشكيلها </td><td> عتبة </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 8I </td><td> N </td><td colspan="5"> انقر لحفظ نتائج تحليل تلميح الرائدة للملف </td><td> اضغط الزر </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 9A </td><td> N </td><td colspan="5"> انقر لبدء تحليل البروتين راتيوميتريك </td><td> قارن </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 9B </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في مقارنة البروتين B فيما يتعلق A </td><td> LOG10 (B / A) </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 9C </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في مقارنة البروتين C فيما يتعلق A </td><td> LOG10 (C / A) </td></tr><tr><td> # 2 </td> &lt;td&gt; 9D </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في مقارنة البروتين B فيما يتعلق A في الطرف </td><td> LOG10 (B / A) </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 9E </td><td> N </td><td colspan="5"> تحقق في مقارنة البروتين C فيما يتعلق A في الطرف </td><td> LOG10 (C / A) </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 10A </td><td> N </td><td colspan="5"> اختر خريطة ألوان أخرى (افتراضي: جيتبلوت) </td><td> لون خريطة </td></tr><tr><td> # 2 </td><td> 10B </td><td> N </td><td colspan="5"> عدل كولورماب </td><td> تحرير كولورماب </td></tr></tbody></table> الجدول 1: نظرة عامة على جميع الوظائف الموجودة في واجهة المستخدم الرسومية ويندوز # 1 و # 2. مرة واحدة يتم إنجاز هذا، البرنامج بإنشاء بدن محدب وتتبع تلقائيا طرف في جميع أنحاء الفيلم. المعلمات المستخرجة من الفيلم، مثل كيموغراف راتيوميتريك، سرعة النمو، وطول فيلوبوديالإعادة عرض وتخزينها أيضا في مجلد العمل كصور وملفات البيانات. ويمكن بعد ذلك استخراج غيرها من المعالم مثل فيلوبوديال العمر، ومعدل النمو ومعدل التراجع وتحليلها من ملفات البيانات المخزنة ( الشكل 2B ). <img alt="الشكل 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55653/55653fig2.jpg" /> الشكل 2: واجهة المستخدم الرسومية لاستخدام برامج تحليل الصور. ( A ) يستخدم واجهة المستخدم الرسومية نافذة رقم 1 لتحميل الصور ومعالجتها. يمكن للبرنامج تحميل ما يصل إلى 3 قنوات البروتين، حيث يتم مقارنة 2 قنوات زوج من الحكمة. نافذة يأتي مع إلزامية (الأزرق) وميزات اختيارية (الأخضر) لمرحلة ما قبل تجهيز الصور قبل تتبع ( B ) يستخدم واجهة المستخدم الرسومية نافذة # 2 لتتبع فيلوبوديوم وكذلك المكاني الزماني وتحليل نسبة البروتين متري. مرة أخرى، يتم تمييز الميزات الاختيارية باللون الأخضر. وقد كان هذا الرقم معدلاإد من المرجع 12 . <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55653/55653fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> هنا، نقدم بروتوكول مفصل لإعداد العينات والتعامل مع البرمجيات. نبدأ مع تعليمات مفصلة حول زراعة الخلايا والحصول على الأفلام الأمثل لتحليل الصور. ويتبع هذا القسم المتعلق باقتناء البيانات وصفا تفصيليا لتشغيل برمجيات تحليل الصور. في جميع أنحاء البروتوكول، ونحن نقدم خطوات حاسمة والميزات الاختيارية التي ينبغي النظر فيها عند جمع ومعالجة البيانات. وأخيرا، فإننا نحلل فيلوبوديا من أنظمة نموذجية مختلفة مع برنامج تحليل الصور، قبل أن يغلق مع مقارنة بين برامج تحليل الصور الموصوفة مع البرامج الأخرى المتاحة للقياس الكمي فيلوبوديال ومناقشة حول القيود والتوجه المستقبلي.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Life Technologies</td><td>31966-021</td><td></td></tr><tr><td>10٪ مصل الأبقار الجنيني</td><td>Biochrom AG</td><td>L11-044</td><td></td></tr><tr><td>Lipofectamine 2000</td><td>Life Technologies</td><td>11668-027</td><td></td></tr><tr><td>1٪ بنسلين / ستربتومايسين</td><td>Biochrom AG</td><td>12212</td><td></td></tr><tr><td>تقنيات العمر المتوسط العصبي</td><td></td><td>21103-049</td><td></td></tr><tr><td>B27</td><td>Life Technologies</td><td>17504-044</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (حل مخزون 1M)</td><td>Life Technologies</td><td>15630</td><td></td></tr><tr><td>Citrine-N1</td><td>Addgene</td><td>54593</td><td></td></tr><tr><td>Labtech</td><td>Thermo</td><td>155411</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax-I</td><td>Thermo</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>معهد هيلا</td><td>لايبنيز DSMZ</td><td>ACC-57</td><td></td></tr><tr><td>COS 7</td><td>لايبنيز معهد DSMZ</td><td>ACC-60</td><td></td></tr><tr><td>3T3 خلايا</td><td>معهد لايبنيز DSMZ</td><td>ACC-59</td><td></td></tr><tr><td>مجهر</td><td>كاميرا نيكون كسوف</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>أندور</td><td>DU888 وحدة متحد البؤر الفائقة</td><td></td></tr><tr><td></td><td>يوكاغاوا</td><td>CSU-X1</td><td></td></tr><tr><td>بيروفات</td><td>جيبكو</td><td>31966-021</td><td></td></tr></tbody></table>

واجهة المستخدم الرسومية لتتبع بمساعدة برنامج تركيز البروتين في النتوءات الخلوية الديناميكية

A Graphical User Interface for Software-assisted Tracking of Protein Concentration in Dynamic Cellular Protrusions

فيلوبوديا هي ديناميكية، تشبه الإصبع النتوءات الخلوية المرتبطة الهجرة والاتصالات الخلوية الخلية. من أجل فهم أفضل لآليات الإشارات المعقدة الكامنة وراء بدء فيلودوديال، استطالة وتثبيت لاحق أو تراجع، فمن الأهمية بمكان لتحديد النشاط البروتيني الزماني المكاني في هذه الهياكل الحيوية. لتحليل وظيفة البروتين في فيلوبوديا، قمنا مؤخرا بتطوير خوارزمية التتبع شبه الآلي التي تتكيف مع فيلوبوديال شكل التغييرات، مما يسمح تحليل مواز للديناميات نتوء وتركيز البروتين النسبي على طول طول فيلوبوديال كله. هنا، نقدم بروتوكول مفصل خطوة بخطوة لتحسين التعامل مع الخلايا، والحصول على الصور وتحليل البرمجيات. كما نقدم إرشادات لاستخدام الميزات الاختيارية أثناء تحليل الصور وتمثيل البيانات، بالإضافة إلى إرشادات تحري الخلل وإصلاحه لجميع الخطوات المهمة على طول الطريق. وأخيرا، فإننا تشمل أيضا مقارنة دبرنامج تحليل الصور المقتبسة مع البرامج الأخرى المتاحة لتقدير فيلوبوديا. معا، يوفر البروتوكول المقدم إطارا لتحليل دقيق للديناميات البروتين في نتوءات فيلوبوديال باستخدام برنامج تحليل الصور.

باستخدام خلايا كوز ترانزفكتد مع علامة للأكتين الخيطية (و- تراكتين 18 والأحمر) ومرجع عصاري خلوي (الأخضر)، وجدنا نتوءات فيلوبوديال الغنية أكتين ( الشكل 3A ، لوحة أعلى). وأظهرت سلسلة زمنية أن فيلوبوديا تمتد بسرعة وسحب ( الشكل 3A ، لوحة الأوسط). باستخدام برنامج تحليل الصور، ثم تتبعنا فيلوبوديا الفردية. مقارنة بين طول فيلوبوديال يقاس باليد مقابل برنامج تحليل الصور أظهرت ...

نقدم حل البرمجيات لتتبع شبه الآلي من تركيز البروتين النسبي على طول نتوءات الخلوية الديناميكية.

Filopodia are dynamic, finger-like cellular protrusions associated with migration and cell-cell communication. In order to better understand the complex ...

الهدف العام لبرنامج تحليل الصور هذا هو التحليل الموازي لديناميكيات النتوء وتركيز البروتين النسبي على طول الأرجل بالكامل. يمكن أن تساعدنا هذه الطريقة حقا في فهم الأسئلة الرئيسية في بيولوجيا الخلية ، وخاصة البروتينات الفردية المشاركة في تمديد وتراجع الخيط. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن خوارزمية تتبع الشكل التكيفية المقدمة ، تسمح بالتقييم الكمي لديناميكيات النتوء وتوطين البروتين الذي تم حله مكانيا.للبدء ، زراعة الخلايا العصبية ، خلايا HeLa أو COS ، في وسط مكمل كما هو مفصل في بروتوكول النص. بمجرد الوصول إلى التقاء 40٪ ، قم بنقل الخلايا بالتركيبات التي تختارها ، باستخدام كاشف النقل وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. احتفظ بالخلايا المنقولة في حاضنة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 15 إلى 18 ساعة.بعد الحضانة ، املأ غرف زراعة الخلايا حتى 90٪ بوسط مسخن مسبقا بدرجة حرارة 37 درجة مئوية ، يحتوي على 20 ملي من HEPES المولي ، لتقليل التغيرات في الأس الهيدروجيني والأوسمولية بسبب التبخر أثناء الحصول على الصورة. لإغلاق الغطاء ، ضع طبقة رقيقة من الشحوم المفرغة من الهواء على الجزء الداخلي من الغطاء واضغط عليها برفق على غرفة الثقافة التي تحتوي على الخلايا المنقولة. ربما يكون الجزء الأكثر أهمية لتحليل الصور هو جودة الصورة.شيء واحد يجب أن نحتني به هو نسبة الإشارة إلى الضوضاء ، والتي يجب أن تكون أكثر من أربعة ويمكننا التأكد من أنه من خلال ضبط وقت التعرض للكاميرا وشدة الليزر وقوته ، يجب أن يكون معدل الإطارات أكثر من هرتز واحد. احصل على الصور باستخدام مجهر بهدف 60x أو 100x وبدون ثني بكسل. استخدم معدلات اكتساب لا تقل عن هرتز واحد لتتبع ديناميكيات الأرجل الخيطية.لتقليل القطع الأثرية الخارجة عن التركيز ، قم بتصوير خيطية الأرجل بالقرب من غشاء الريحان. لضمان التتبع السلس ، اضبط وقت التعرض للكاميرا وشدة الليزر بحيث تكون نسبة الإشارة إلى الضوضاء أكبر من أربعة. بمجرد اكتمال ذلك ، ابدأ الحصول على الصورة.بعد المعالجة المسبقة للصورة، كما هو موضح في بروتوكول النص، قم بتحميل الصور عن طريق تنزيل المجلد المضغوط الذي يحتوي على جميع الملفات المطلوبة لتحليل الصور. قم بفك ضغط الملفات ونسخها في مجلد العمل. بمجرد التثبيت ، ابدأ واجهة المستخدم الرسومية عن طريق فتح الملف المسمى filopodiaAnalysisM3.fig.قم بتحميل ملفات TIFF المكدس المحفوظة للبروتينات الفردية في واجهة المستخدم الرسومية أو واجهة المستخدم الرسومية. باستخدام الأزرار 1B للبروتين A و 1C للبروتين B واختياريا 1D للبروتين C.قم بإنشاء صورة متراكبة للخلية من قنوات البروتين بالنقر فوق 1A. ثم انقر فوق 2A ، لتعيين الإطار الأول وانقر فوق 2B ، لتعيين الإطار الأخير للتحليل.اختياريا، قم بقص منطقة الاهتمام أو عائد الاستثمار، الذي يحتوي على الوقود محل الاهتمام باستخدام الزر 2H. قم بتدوير الصورة باستخدام الزر 2I ، أو احذف المناطق غير المرغوب فيها باستخدام أداة الرسم باليد الحرة ، 2J. حرك شريط التمرير ، 2C لكل إطار لمراقبة الجودة والتحقق مما إذا كان الخيط يظل مرئيا بوضوح طوال الفيلم بأكمله.لإنشاء التتبع ، انقر أولا فوق الزر 3A في نافذة واجهة المستخدم الرسومية الأولى ، لفتح نافذة واجهة المستخدم الرسومية الثانية. انقر فوق الزر الأربعة في نافذة واجهة المستخدم الرسومية الثانية ، لإنشاء كتلة جسم الخلية المتراكبة التي تم إنشاؤها في نافذة واجهة المستخدم الرسومية الأولى ، بعد النقر فوق 1A. نوصي بقضاء بعض الوقت في تحسين المعلمات مثل عدد المقاطع وعرض المسح ونصف قطر الفحص لمجموعة البيانات التجريبية.حرك شريط التمرير في النافذة رقم اثنين، للتحقق من مكان ظهور الطرف العرضي لأول مرة. ثم انقر فوق الزر خمسة وسيظهر المؤشر. استخدم المؤشر لتحديد القاعدة التي يتم من خلالها قياس مسافة الطرف المستقيم.متبوعا بطرف الخيط في الإطار حيث يظهر لأول مرة. بعد ذلك ، حدد طول العتبة الذي ستنحني فوقه الخيطية ، باستخدام 6 درجة مئوية. بعد ذلك ، حدد عدد المقاطع المستخدمة لتقريب شكل الصف في المربع 6A.حدد عرض المسح الضوئي، الذي يعمل كماسح ضوئي أفقي، لوضع العقد في 6B. حدد نصف قطر المسح الضوئي في المربع 6D، واستخدم قيمة أكبر بنسبة 50٪ تقريبا من إزاحة طرف الإطارات بين الإطارات المرصودة. ثم حدد زاوية الانحناء في المربع 6E.حدد تتبع محفوظات المربع في نافذة واجهة المستخدم الرسومية الثانية ، لحفظ بروتوكول التتبع بالكامل للرجوع إليه في المستقبل ثم انقر فوق زر التتبع والتحليل لبدء التتبع. للتحليل الزمني المكاني ، حدد المربع الذي يمثله 8B ، متبوعا بقناة البروتين ذات الأهمية. انقر فوق 8A ، لبدء تتبع البروتين على طول الأرجل الخيطية ، باستخدام التتبع الذي تم إنشاؤه مسبقا.لتحليل البروتين النسبي ، حدد المربع 9B أو 9C وانقر على الزر 9A للحصول على مخطط النسبة الزمنية المكانية. لإجراء تحليل الطرف العرضي، حدد الخانة 8F وحدد طول الطرف وطول العتبة من القاعدة، باستخدام 8G و8H. انقر فوق الزر الانضغاطي ، لحفظ البيانات في ملف Excel باسم dynamics.xlsx.ثم انقر فوق تحليل شدة البروتين لتوليد أثر شدة البروتين في الطرف الخيطي وحفظه لتحليل القياس النسبي. انقر فوق النسبة المطلوبة ليتم تحليلها باستخدام 9D أو 9E. أخيرا ، انقر فوق زر المقارنة ، 9A لإنشاء بيانات النسبة.يكشف تحليل خلايا COS المنقولة بعلامة للأكتين الخيطي باللون الأحمر ، ومرجع العصارة الخلوية باللون الأخضر عن نتوءات خيوطية الأقدام الغنية بالأكتين. تظهر السلسلة الزمنية أن النتوءات الخيطية الغنية بالأكتين تمتد وتتراجع بسرعة. باستخدام برنامج تحليل الصور ، تم تتبع الخيط الفردي.يتتبع برنامج تحليل الصور بشكل موثوق الامتداد الخافي ، بالإضافة إلى معدلات النمو والتراجع للخيطية الفردية ، تصور الصور الكيميائية أيضا تركيز الأكتين الطبيعي إلى مرجع العصارة الخلوية. إذا تم استخدامها بشكل صحيح ، تسمح هذه التقنية بالتحليل الكمي لديناميكيات النتوء وتركيز البروتين الذي تم حله مكانيا على طول الخيط. عند محاولة الإجراء ، من المهم تذكر سرعة الاستحواذ والحفاظ على نسبة الإشارة إلى الضوضاء أكبر من أربعة ، مع عدم تشبع الصور الفردية.

a-graphical-user-interface-for-software-assisted-tracking-protein

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

Photoactivated المجهر التعريب (النخيل) جنبا إلى جنب مع تتبع جزيء واحد يسمح الملاحظة المباشرة والكمي للتفاعلات الحمض النووي البروتين في الخلايا القولونية الحية.

تصور التفاعلات الحمض النووي البروتين في الخلايا البكتيرية عن طريق لايف Photoactivated تتبع جزيء واحدة

يصف هذا البروتوكول كيفية استخدام الفحص المجهري الفلوري للانعكاس الداخلي الكلي لتصور وتتبع المستقبلات المفردة على سطح الخلايا الحية وبالتالي تحليل الحركة الجانبية للمستقبلات وحجم مجمعات المستقبلات وكذلك لتصور تفاعلات المستقبلات العابرة. يمكن تمديد هذا البروتوكول ليشمل بروتينات الغشاء الأخرى.

عالية الدقة تحليل الزمانية المكانية من مستقبلات حيوية من قبل جزيء واحدة الإسفار الميكروسكوب

في بروتوكول الفيديو هذا ، نتتبع - بسرعة عالية وبثلاثة أبعاد - الجسيمات الحالة المصنفة بالفلورسنت داخل الخلايا الحية ، باستخدام طريقة التتبع المداري في مجهر ثنائي الفوتون المعدل.

3D تتبع المداري في التعديل المجهر ثنائي الفوتون: دراسة تطبيقية على تتبع من بين الخلايا الحويصلات

الالتقام الخلوي بوساطة كلاثرين ، وهي عملية سريعة وديناميكية للغاية تستوعب العديد من البروتينات ، بما في ذلك مستقبلات الإشارات. يصور البروتوكول الموصوف هنا بشكل مباشر حركية الأحداث الداخلية الفردية. هذا ضروري لفهم كيفية تنسيق الأعضاء الأساسيين في آلية الخلية مع بعضهم البعض ، وكيف تؤثر شحنة البروتين على هذه العملية.

تصور الإلتقام بالكلاذرين بوساطة من G مستقبلات البروتين يقترن قرار واحد في الحدث عبر الميكروسكوب TIRF

نقدم هنا، بروتوكولا للجسيمات واحدة تتبع تحليل الصور التي تتيح التقييم الكمي لنشر معاملات، أنواع الحركة والكتلة أحجام الجسيمات واحد الكشف عنها بواسطة الفحص المجهري الأسفار.

معالجة البروتوكول لتحليل نشر وحجم الكتلة من مستقبلات الغشاء بالفحص المجهري Fluorescence الصور

يتم استخدام الفحص المجهري لتوطين جزيء واحد ثلاثي الدمنل لسبر المواقف المكانية ومسارات الحركة للبروتينات ذات العلامات الفلورية في الخلايا البكتيرية الحية. يحدد بروتوكول تحليل البيانات التجريبية الموضحة هنا السلوكيات المشتتة السائدة للبروتينات الخلوية استناداً إلى مسارات أحادية الجزيء مجمعة.

مجهريتتبع جزيء واحد - أداة لتحديد الدول المنافية للجزيئات الخلوية

تقدم هذه المقالة طريقة للتحليل المكاني الزماني للمجسات المتنقلة أحادية الجزيء Förster القائمة على نقل الطاقة بالرنين (smFRET) باستخدام المجهر الفلوري واسع المجال. تسمح مجموعة أدوات البرامج المطورة حديثا بتحديد آثار الوقت smFRET للمجسات المتحركة ، بما في ذلك كفاءة FRET الصحيحة والمواقع الجزيئية ، كوظائف للوقت.

التحليل المكاني الزماني الآلي ثنائي الأبعاد لمجسات FRET أحادية الجزيء المتنقلة

يهدف هذا البروتوكول إلى قياس المعلمات الديناميكية (النتوءات ، التراجع ، الكشكشة) للنتوءات على حافة الخلايا المنتشرة.

قياس ديناميكيات نتوء حافة الخلية أثناء الانتشار باستخدام المجهر الخلوي الحي

يصف هذا البروتوكول نهج معالجة الصور القائم على iSCAT وتتبع الجسيمات المفردة الذي يتيح التحقيق المتزامن للكتلة الجزيئية والسلوك المنتشر للجزيئات الكبيرة التي تتفاعل مع الأغشية الدهنية. يتم توفير إرشادات خطوة بخطوة لإعداد العينات، والتحويل من الكتلة إلى التباين، والحصول على الأفلام، وما بعد المعالجة جنبا إلى جنب مع الاتجاهات لمنع المزالق المحتملة.

تتبع الجسيمات الحساسة للكتلة لتوصيف ديناميكيات الجزيئات الكبيرة المرتبطة بالغشاء

تقدم هذه المقالة وصفا مفصلا لكيفية إنشاء عينات لتتبع البروتين الواحد في طبقات الدهون الثنائية المدعومة بالمواد الصلبة. كما يشرح المجهر الفلوري البسيط بحساسية جزيء واحد ومعدل إطارات سريع. وأخيرا، نستعرض الإجراء لاستخراج مسارات البروتين الواحد.

تتبع البروتينات المفردة في طبقات الدهون الثنائية باستخدام المجهر الفلوري

اكتشف تحليل ديناميكيات البروتين في النتوءات الخلوية باستخدام برنامج تتبع شبه آلي. يتيح هذا الأسلوب قياس التمدد والانكماش مع تحديد تركيز البروتين مكانيًا على طول النتوءات في الخلايا الحية.

واجهة المستخدم الرسومية لتتبع بمساعدة برنامج تركيز البروتين في النتوءات الخلوية الديناميكية

استكشف المزيد من الفيديوهات