الأسلوب الكمي والنوعي سفينجوميلين من LC-MS استخدام اثنين مستقرة نظير المسمى الأنواع سفينجوميلين

الهدف العام من هذا الإجراء هو التحليل الدقيق لكمية وهيكل كل نوع من أنواع Sphingomyelin في العينات البيولوجية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الدهون المتعلقة ببيولوجيا الدهون والدهون الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكننا توصيف مجموعة متنوعة من أنواع Sphingomyelin في العينات البيولوجية عن طريق نظام قياس الطيف الكتلي الكروماتوغرافيا. للبدء ، قم بإزالة وسائط الثقافة من طبق زراعة الأنسجة الذي يبلغ طوله 10 سم والذي يحتوي على خلايا HeLa واشطف الخلايا مرتين بستة ملليلتر من PBS المثلج.

ثم أضف ملليلترا واحدا من PBS المثلج البارد إلى طبق زراعة الأنسجة الذي يبلغ طوله 10 سم واستخدم مكشطة الخلايا لحصاد الخلايا. بمجرد إزالتها من سطح الطبق ، انقل الخلايا إلى أنبوبين بلاستيكيين من السيليكون. بعد الطرد المركزي ، قم بإزالة المادة الطافية وأضف مليلتر واحد من الميثانول إلى كل حبيبات خلية.