RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/60616-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol provides a robust and sensitive method for identifying and quantifying major lipid classes in Saccharomyces cerevisiae using liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry. The method allows for the detection of isobaric and isomeric lipidic species.
نقدم بروتوكولا باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة إلى جانب قياس الطيف الكتلي جنبا إلى جنب لتحديد وقياس الدهون الخلوية الرئيسية في saccharomyces cerevisiae. الطريقة الموصوفة للتقييم الكمي لفئات الدهون الرئيسية داخل خلية الخميرة متعددة الاستخدامات وقوية وحساسة.
يوفر هذا البروتوكول طريقة دقيقة وقابلة للتكرار لتحديد كمي عشر فئات مختلفة من الدهون من Saccharomyces cerevisiae باستخدام طريقة استخراج واحدة وطريقة واحدة LC-MS. هذه الطريقة تسمح الكشف عن و كمية الأنواع الدهنية الأيوبريكية و isomeric لها خصائص كيميائية وفيزيائية مختلفة. لثقافة Saccharomyces cerevisiae، أولا إضافة 5 مل من محلول مخزون الجلوكوز 20٪ العقيمة لكل من اثنين من قارورة إرلينميير التي تحتوي على وسيط YNB العقيمة إلى تركيز نهائي من 2٪ الجلوكوز.
ثم، استخدام ماصة معقمة لنقل حجم من ثقافة الخميرة بين عشية وضحاها تحتوي على خمسة أضعاف عشرة إلى خلايا الخميرة السابعة في كل قارورة والثقافة القارورة لمدة 24 ساعة على الأقل في 30 درجة مئوية مع اهتزاز التناوب في 200 الثورات في الدقيقة الواحدة. لاستخراج الدهون، وتحديد العدد الإجمالي للخلايا الخميرة لكل ملليلتر من الثقافة ونقل خمسة أضعاف عشرة إلى الخلايا السابعة في أنبوب الطرد المركزي 15 مل. إضافة الجليد الباردة نانو نقية المياه لتحقيق حجم يصل إلى 15 مل وجمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
11:12
Related Videos
13.7K Views
15:41
Related Videos
10.6K Views
08:43
Related Videos
13.1K Views
08:43
Related Videos
8.5K Views
07:25
Related Videos
5.1K Views
08:30
Related Videos
3.5K Views
09:18
Related Videos
10.4K Views
09:35
Related Videos
14.6K Views
08:03
Related Videos
10.7K Views
10:23
Related Videos
10.8K Views