RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/60003-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol enables the specific labeling of mitochondrial nucleoids in live cells, facilitating the quantitative study of their motion at high resolution. By utilizing a commercially available DNA gel stain, the method circumvents the need for fluorescent protein overexpression, thus avoiding artifacts and broadening applicability to non-transfectable cell types.
يصف البروتوكول وضع علامات محددة على النيوكليويدات الميتوكوندريا مع وصمة عار هلام الحمض النووي المتاحة تجاريًا ، واكتساب سلسلة مرور الوقت من الخلايا الحية المسماة بواسطة المجهر المجهري للإضاءة المهيكلة (SR-SIM) ، والتتبع التلقائي لحركة النيوكليويد.
يسمح البروتوكول وضع العلامات المحددة للنيات الميتوكوندريا في الخلايا الحية والدراسة الكمية لاقتراحها بدقة عالية. الحضانة مع صبغة الفلورسنت يتجاوز فقط الحاجة إلى البروتين الفلورسنت على التعبير، وتجنب التحف ذات الصلة والقيود والسماح لدينا بروتوكول ليتم تطبيقها على الخلايا غير قابلة لtransfectable. لتحقيق تلطيخ نووكلويد تفضيلية، ينبغي للمرء استخدام الذهب SYBR ولا شيء آخر في ظل الظروف التي قمنا الأمثل.
وإلا، قد يكون الحمض النووي الخلوي الكلي ملطخاً. قبل يوم واحد من إجراء وضع العلامات ، والثقافة أربع مرات 10 إلى الخلايا الخامسة HeLa في مليلترين من المتوسط في طبق بيتري 35 ملليمتر. في صباح اليوم التالي، وغسل الخلايا في ملليلترين من برنامج تلفزيوني قبل إضافة ملليلتر واحد من الفينول الأحمر ثقافة حرة المتوسطة وميليلتر واحد من الحل المناسب 2X وضع العلامات.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
04:50
Related Videos
17.3K Views
04:11
Related Videos
591 Views
10:31
Related Videos
10.7K Views
11:06
Related Videos
9.1K Views
09:21
Related Videos
14K Views
08:33
Related Videos
4.9K Views
10:47
Related Videos
4.5K Views
08:33
Related Videos
1K Views
08:48
Related Videos
4.9K Views
06:57
Related Videos
1.5K Views