منهج تقني للتحليل الهيكلي لمركب غير معروف في سائل هووشيانغ تشنغتشي الفموي بناء على مطيافية الكتلة الخطية لمصائد الأيونات

تم تطوير طريقة تجزئة متعددة المراحل لتحديد وتوصيف المكونات المعقدة في سائل تشنغتشي الفموي هووشيانغ. لا يمكن لمطياف الكتلة التاثنية التقليدية تحليل هياكل مركبة مجهولة. يوفر مطيافية الكتلة متعددة المراحل تجزئة أعمق لتوضيح هيكلي شامل.

لتحضير الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الأداء، ابدأ بالنقر المزدوج على برنامج Xcalibur لفتحه. انقر على جاهز للتحميل، ثم اضغط على التحكم المباشر. في نافذة المنبثقة، انقر على عمود وحدة المضخة واضبط النسبة B إلى 50، ونسبة C إلى الصفر، والنسبة D إلى الصفر.

اضغط على زر المحرك لتحويله إلى حالة التشغيل. انقر على المزيد من الخيارات، واضبط التدفق إلى خمسة ملليلتر في الدقيقة والوقت إلى 180 ثانية في نافذة النوافذ المنبثقة. انقر على التطهير، ثم اضغط على التنفيذ رغم التحذير في نافذة المنبثقة.

ارجع إلى نافذة البرنامج الرئيسية واضغط على عرض إعداد التسلسل. انقر على فتح لاستيراد القالب المحرر. انقر بزر الفأرة الأيمن على اسم الطريقة ثم اضغط فتح الملف لفتح ملف الطريقة.

في النافذة الرئيسية للبرنامج، اضبط الكتلة الأولى إلى نسبة الكتلة إلى الشحنة 100 وآخر كتلة إلى نسبة الشحنة 1200. انقر على الحفظ لحفظ الطريقة. انقر على تشغيل التسلسل، اختر وضع الانتظار في نظام تعيين التسلسل التالي، ثم اضغط على موافق في نافذة المنبثقة.

انتظر حتى يكتمل حقن العينة. انقر على عرض خريطة الطريق، ثم انقر على أيقونة متصفح كوال لفتح نافذة متصفح كوال. انقر على فتح، اختر ملف البيانات بصيغة RAW وانقر مرتين لفتحه.

انقر بزر الفأرة الأيمن على نافذة الكروماتوجرام ثم اضغط على النطاقات. في قسم فلتر الفحص، اختر ESI كامل MS. وفي قسم نوع الحبكة، اختر TIC، ثم اضغط على موافق. راقب الكروماتوجرام الأيوني الكلي المعروض.

اضغط على زر الضغط في نافذة Mass Spectrum. في نافذة الكروماتوغرام، انقر وانزلق لاختيار منطقة زمنية ذات أقوى وفرة نسبية. راقب أيونات الطيف الكتلي المقابلة وسجل قيم نسبة الكتلة إلى الشحنة.

افتح نافذة إعداد الآلات. حدد عمود الكتلة الأب في N يساوي صفين وأدخل قيمة نسبة الكتلة إلى الشحنة المسجلة سابقا. انقر على الحفظ لحفظ الطريقة.

ارجع إلى عرض إعداد التسلسل في نافذة البرنامج، وعدل اسم الملف واضغط على حفظ الملف لحفظ التسلسل. اضغط على تشغيل التسلسل، ثم اضغط على موافق في نافذة المنبثقة. انتظر حتى يكتمل حقن العينة.

اذهب إلى نافذة متصفح Qual، اضغط على فتح، اختر ملف البيانات الخام وانقر مرتين لفتحه. انقر بزر الفأرة الأيمن على نافذة الكروماتوجرام ثم اضغط على النطاقات. في قسم فلتر المسح، اختر ESI الكامل MS.In قسم نوع الرسم البياني، اختر TIC واضغط على موافق لعرض الكروماتوغرام.

في نافذة الطيف الكتلي، اضغط على زر الضغط على الرقم البدبوس. اختر منطقة زمنية ذات أقوى وفرة نسبية وراقب أيونات الطيف الكتلي. سجل قيم نسبة الكتلة إلى الشحنة للمستوى التالي من مطيافية الكتلة.

في نافذة إعداد الأجهزة، حدد عمود الكتلة الأب في N يساوي ثلاثة صفوف وأدخل قيمة نسبة الكتلة إلى الشحنة المسجلة سابقا. انقر على الحفظ لحفظ الطريقة. كما تم توضيحه سابقا، كرر عملية عرض البيانات لإكمال حقن العينة والتحليل.

بعد فتح ملف البيانات الخام، اضغط على زر الضغط في نافذة الطيف الكتلي وراقب تغير ذروات الأيونات الجزئية. في نافذة إعداد الآلة، اذهب إلى عمود نوع الفعل واضغط على CID. ثم اختر PQD أو ETD لتغيير وضع التصادم.

في عمود طاقة التصادم الممهيأة، اضغط على 35 وغيره إلى 50 لضبط طاقة التصادم. ارسم الأيونات الأب وأيونات التجزئة في برامج الرسم، بما في ذلك بنية الأيونات الأب، واسم المركب، وقيمة نسبة الكتلة إلى الشحنة. كمثال، حدد الشظية بنسبة الكتلة إلى الشحنة 461.15، وافحص الأيون السلف بنسبة الكتلة إلى الشحنة 623.21 في طيف مطيافية الكتلة المتتالية.

احسب فرق الكتلة. حلل التجزئة الإضافية للأيون الوسيط بنسبة الكتلة إلى الشحنة 461.15. لتوليد أيون ناتج بنسبة كتلة إلى شحنة 315.09 في مكعب الكتلة القطقطوية، احسب فرق الكتلة بناء على موضع الربط وتحليلات الربط لجميع الشظايا.

استنتج البنية النهائية للمركب المجهول بنسبة الكتلة إلى الشحنة 623.21. المركب المجهول بنسبة كتلة إلى شحنة 623.21 فقد وحدة سداسية واحدة وأنتج أيونا جزئيا بنسبة كتلة إلى شحنة 461.15. أدى تجزئة مطيافية الكتلة الثالثية للوسيط إلى إنتاج نيوبياكانجيليكول بنسبة كتلة إلى شحنة 315.09 بعد فقدان وحدة رامنوز واحدة.

أنتج مطيافية الكتلة الرباعية لنيوبياكانجيليكول أيونا جزئيا بنسبة كتلة إلى شحنة 135.09. تم استنتاج بنية المركب المجهول من نمط التجزئة متعدد المراحل. تم استنتاج المركبات غير المعروفة ذات نسب الكتلة إلى الشحنة 545.41 و365.12 باستخدام نفس طريقة التجزئة.

يتيح هذا البروتوكول التحليل الدقيق وتوصيف البنيوي للمركبات غير المعروفة في الأعشاب الطبية والأدوية الصينية المسجلة ببراءات اختراع. فهم واضح للبنية الأساسية للمكونات الرئيسية ضروري للتجزئة والتحليل الدقيق باستخدام هذا البروتوكول. تمكن هذه العملية من تطوير قاعدة بيانات تجزئة متعددة المراحل لتحليل الطيف الكتلي لتحسين تحديد المركبات والتحليل المقارن.