Waiting
登录处理中...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Immunology and Infection
Click here for the English version

Immunology and Infection

شاملة والتكلفة الفعالة لمختبر مراقبة فيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز : قدوة الأفريقية

Published: October 31, 2010 doi: 10.3791/2312
Automatic Translation
1,2, 2, 3, 1,2
1National Health Laboratory Services (NHLS-SA), 2Department of Molecular Medicine and Haematology, University of Witwatersrand, 3Lightcurve Films

Summary

ويتم رصد العلاج المضاد للفيروسات لعلاج فيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز في أفريقيا الجنوبية على نطاق واسع. يتم الجمع بين التدفق الخلوي لامراض الدم (CD45) ، علم المناعة (CD4) والفيروسية الحمل مرتبط مقايسة CD38. سجلت في NHLS - SA المختبرات ، وجوهانسبرغ ، وهذه الأساليب الحديثة والفعالة من حيث التكلفة مع ازدياد المحلية لمراقبة الجودة الداخلية ، بوصفه الدور نماذج محدودة الموارد التشخيص.

Abstract

نقدم فيديو حول مساعدة العلاج المضاد للفيروس (ART) عن طريق خدمة مختبر مناسب -- وهو ما يمثل نموذجا يحتذى به في جنوب أفريقيا من أجل اختبار اقتصادية واسعة النطاق التشخيص. في البلدان ذات الدخل المنخفض حولت ART رخيصة احتمالات البقاء على قيد الحياة لمرضى فيروس نقص المناعة البشرية مصليا ولكن هناك شكوك فيما إذا كانت هناك حاجة لرصد مختبر للفيروسات القهقرية وعلى ما التكاليف -- في الحالات عندما الجودة الشاملة للخدمات الباثولوجيا لا يزال تكون منخفضة جدا. الجواب المناسب لإنشاء خدمات سليمة اقتصاديا مع تنسيق أفضل وأكثر صرامة تقييم الجودة الداخلية من المشاهدة في البلدان الغربية. هذا الفيديو وتصويرها في مكان ما في المختبر الوطني للخدمات الصحية (NHLS - SA) في جامعة ويتووترسراند في جوهانسبرج ، جنوب أفريقيا ، وتوفر هذه الخطة المنسقة توسيع الأصلي 2 - اللون CD4 - CD45 استراتيجية PanLeucoGating (PLG). وبالتالي الوحدات الست في عرض الفيديو تكشف عن بساطة مقايسة تدفق 4 لون cytometric الجمع بين اختبارات الدم ، المناعة والفيروسات ذات الصلة في أنبوب واحد. هذه الوحدات الفيديو هي : (ط) لانشاء الصكوك ، (ب) الاستعدادات العينة ، (ج) اختبار الجودة المطلقة وتعول لرصد كل عينة بواسطة حبة معدل العد ، (الرابع) في heamatological CD45 اختبار لخلايا الدم البيضاء وبحساب الفوارق ؛ (V) التهم CD4 ، و (السادس) لتنشيط خلايا CD8 + T تقاس CD38 الشاشة ، معلمة الحمل الفيروسي ذات الصلة. إمكانات وفورات في التكاليف لافتة للنظر. هذا الترتيب هو مثال ساطع على جدوى تنفيذ> 800-1000 اختبارات يوميا مع مراقبة الجودة صرامة من تلك المطبقة في المختبرات الغربية ، وكذلك مع نقل التكنولوجيا إلى مختبرات أخرى في إطار شبكة NHLS - SA. الخبراء المستشارين ، ومديري المختبرات وصناع السياسة الذين يحملون واجب اتخاذ القرارات حول إدخال التكنولوجيا الطبية الحديثة وكثيرا ما تكون ليست في وضع يمكنها من الاطلاع على أحدث التفاصيل التقنية التي يضطلع بها في مختبرات إقليمية كبيرة مع أعباء ضخمة من عبء العمل. وبالتالي هذا الفيديو يبين تفاصيل هذه التطورات الجديدة.

Protocol

مقدمة

الجهود العلمية الحديثة في مجال الطب الحيوي يؤدي إلى الفوائد العملية بما في ذلك إدخال فعالة لتشخيص الأمراض المعدية. وهناك حاجة عالية الجودة والتشخيص السريع بسبب خطر انتشار المرض بسبب السفر العالمية الحالية وتأثيرها المدمر للعدوى الفيروسية والبكتيرية في المناطق الفقيرة من العالم 1.

في البلدان الفقيرة الموارد العلاج لمرضى فيروس نقص المناعة البشرية إيجابية مع العلاج المضاد للفيروسات الرجعية (ART) قد أدخلت بنجاح 2،3. وتقوم حاليا بروتوكولات ART على (ط) الاختبارات المصلية للأفراد + فيروس نقص المناعة البشرية ، (ب) تركيبات مرة واحدة يوميا من نظم المخدرات الوراثية المستخدمة في ART "الخط الأول" و (ثالثا) CD4 و / أو فحوصات الحمل الفيروسي تقرر بعد موعدا لبدء المعالجة. ويمكن الآن للبروتوكولات ، على أية حال ، وتغيير بوصفه مجالا لمزيد من المعالجة تكون اتسعت أكثر استرخاء مع المبادئ التوجيهية لبدء المعالجة في وقت سابق أعلى CD4 التهم 2. الأهم ، وزيادة عدد المرضى الذين يتلقون فيروس نقص المناعة البشرية + ART في أعلى خلية CD4 + / ميكرولتر من الدم قد حتى إبطاء انتشار فيروس نقص المناعة البشرية على الرغم من النقص الحالي من لقاح فيروس نقص المناعة البشرية 4 ، 5.

هكذا تستعد لتصبح العدوى بفيروس الإيدز وهو مرض مزمن في الأعداد المتزايدة من الناجين ، والتي تتطلب الطب نظمت أكثر من أي وقت مضى ولكن سوء حالة الطب المخبري مايو أفريقيا لا تزال تشكل حاجزا للرعاية الصحية الفعالة 6. هناك أصوات في التأكيد على أن توفير المنح قصيرة الأجل لا تقدم حلولا مستدامة 7-9 ، والمنح المتصلة بفيروس نقص المناعة التي توفرها الدول الغربية في الجدول الحالي لا يمكن ان يستمر الى الابد 8،9. دولار في عام 2008 انفق 15600000000 على برامج مكافحة الإيدز في البلدان ذات الدخل المنخفض والمتوسط ​​، وحوالي 50 ٪ من هؤلاء كانوا من الخارج ، بما في ذلك أمريكا الشمالية والمصادر. الاتجاهات المحسوبة تدل على أن هذا الإنفاق هو زيادة تصل إلى مستوى 2-3 أضعاف ، وهذا الوباء سيظل معنا في 2031 ما لم يكن هناك تغيير في النهج العام الحالي 9.

وبالتالي يجب على البلدان الأفريقية المساهمة من خلال الوقاية من فيروس نقص المناعة البشرية على نحو أفضل وأكثر حكمة وفورات في التكاليف 9. هنا نقترح أن يتم إنشاء "قدوة" للالابتكاري الأخير عن العمل الروتيني ، والتي طبقت في بلدان فقيرة الموارد (مثلا في أفريقيا أو في الهند). هذه هي المناطق من العالم حيث العلماء سيتعلمون من الاستفادة الكاملة من الدعم الدولي الراهن ومن ثم للاستفادة من مهاراتهم لمواصلة تحسين التكنولوجيا كل يوم ، من خلال المساهمة في التنمية العالمية.

في الطب الغربي كثيرا ما تكون الأنشطة التشخيصية في المراكز الأكاديمية الكبيرة والمستشفيات "إدارات تعني" ، أي منفصلة "مناطق المصالح" قد تكون موجودة في مختلف التخصصات مما أدى إلى تجزئة في haemato ، viro ، retroviro ، bacterio ، - المصلية ، المناعية ، والمختبرات الخلوي بدلا من إجراء مقاربة موحدة باستخدام مجموعة صغيرة من فحوصات التشخيص متعدد التخصصات في مختبر الأمراض المعدية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضا أن تكون اختبارات تشخيصية بعيدا معقدة جدا ومكلفة. ومن الواضح أن هذه الخدمات تحتاج إلى تنسيق أفضل ولكن هذه توحيد الجهود من غير المحتمل تماما أن يأتي من اتجاهات الغربية. وبالتالي فإن المختبرات والمعاهد الرائدة ، مثل الخدمات الصحية المختبر الوطني (NHLS - SA) بالتعاون مع جامعة ويتواترسراند في جوهانسبورغ ، جنوب أفريقيا ، وتواجه مهمة اضافية لمواصلة تطوير وتعديل ، وإعادة التركيز وتحسين أوضاعهم فعالة من حيث التكلفة التشخيص القائمة على التكنولوجيا الحديثة.

في الفيديو الحالية وصفنا تدفق cytometric أساليب لرصد العلاج المضاد للفيروسات الرجعية (ART) في المرضى المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية. يتم تقديم هذه التكنولوجيا خطوة حكيمة في ست وحدات لمزيج من haemato ذات الصلة ، المناعية ، وفحوصات الفيروسية في أنبوب واحد ، جنبا إلى جنب مع الضروري مراقبة الجودة الداخلية (QC) لضمان استنساخ التجارب 10. استخدامات الاجسام المضادة المستخدمة هنا هي كل علميا المنشأة بالكامل. CD45 هو الكاشف لكريات الدم البيضاء 11-13 ، جنبا إلى جنب مع تعداد CD4 "المساعد" اللمفاويات التائية التي هي الأهداف الرئيسية لفيروس نقص المناعة البشرية 12-14. بل هو "خدعة بناءة" في أنبوب أن يتم الكشف عن نفسه علامة على تفعيل CD38 CD8 + الخلايا التائية كما الحمل الفيروسي لفيروس الإيدز (VL) مقايسة المتعلقة 15-17. من أجل التأكيد على مساهمة جنوب افريقيا ، ان نشير الى ان كانت جميعها على هذه المفاهيم وفعالة من حيث التكلفة تركيبات العملية عملت في NHLS - يتس التعاون القائمة على التكنولوجيا الغربية الرائدة 10،12،13،16،17.

هذه المقايسات ، التي نفذت في الجمع ، وستكون هناك حاجة لرصد السليم للمرضى الذين يخضعون لفترة طويلة الأجل ART. عندما التكاليف efficieهو تمحيص NCY ، وهذا التدفق الخلوي منسقة التكنولوجيا يبرهن على أن يكون اقتصاديا 16،18،19. هذه المقايسات واحد أنبوب تمثل تكلفة إنقاذ أكثر من المتغيرات في الغرب وعلى تجارب مماثلة قامت به الصكوك منفصلة و / أو نفذت واختبارات بديلة مختلفة باستخدام أساليب أخرى. يتم سرد هذه الوفورات في المناقشة.

لقبول هذه التكنولوجيا ببساطة أساسا ، الذي يستخدم أربعة ألوان التدفق الخلوي في أنبوب واحد ، فمن الضروري أن تظهر الخطوات الفنية في شكل شريط فيديو. الخبراء المستشارين ، ومديري المختبرات وصناع السياسة الذين يحملون واجب اتخاذ القرارات حول إدخال التكنولوجيا الطبية الحديثة وكثيرا ما تكون ليست في وضع يمكنها من الاطلاع على أحدث التفاصيل التقنية التي يضطلع بها في مختبرات إقليمية كبيرة مع أعباء ضخمة من عبء العمل. وبالتالي هذا الفيديو يظهر تفاصيل التطورات الجديدة التي أدخلت في جنوب أفريقيا لتحسين سير العمل لاختبار> 1000 العينات السريرية في كل يوم عمل 10،13،16،17.

بروتوكول

التدفق الخلوي

وأجريت اختبارات من قبل 4 لون التدفق الخلوي ولكن يمكن أيضا أن يقوم به المقايسات 2 - الألوان في أنبوبين موازية (أنظر أدناه). يستخدم بيكمان كولتر - XL - MCL ، وهو من عداد الكريات fluidics مستقرة 21 ، إلا أن نفس التكنولوجيا يمكن أن ينطبق أيضا على cytometers الأخرى. تقنية معالجة عبء العمل اليومي ووصف كبير من العينات 800-1100 ~ / اليوم 10،13.

الوحدة 1 : إعداد الصكوك

يوميا في منزل الصيانة تنظيف أداء كل يوم مرتين : في البدء وعند الانتهاء من العينة المريض الماضي. وهذا يشمل التنظيف خطوط الفراغ واكتساب Clenz (هيبوكلوريت الصوديوم 5 ٪ ؛ قبل الميلاد ، وميامي ، فلوريدا). أيضا ، في نهاية كل Clenz دائري 30 أنبوب الماء المقطر ويتم تشغيله من خلال نظام للحد من تراكم البروتين.

في البدء يوميا يتم التحقق القراءات الفراغ والضغط. وأكد أن التهم الخلفية تظل مقبولة (<100 حدث في 100 ثانية). بعد تشغيل عينة من الدم الأول هو إثبات أن في قسامة من السوائل في غمد المرحل هو <1 ٪. ثم يتم رصد محاذاة الليزر وحساسية مضان به يوميا عينة من FlowCheck 21. لوحظ أن متوسط ​​أرقام القناة تتسق (500 ± 50) مع اختلاف منخفضة (الشوط ذروة القيم الذاتية <2 ٪). يتم فحص التعويض الأسبوعية ؛ يتم رسم حبات FlowSet لرؤية ما إذا كانت القيم القناة يعني هي في حدود 1 ٪ من القيم المستهدفة مسبقا 22. للتأكد من دقة البصر على ليفي ، جينينغز المؤامرات ، وأرقام القنوات ونصف يعني معامل ذروة القيم (HPCV) الاختلاف عن القنوات الأربع الإسفار (FL1 - FL4) يتم عرضها يوميا. التالي هو تأكيد دقة التهم CD4 على الصعيدين CD4 اثنين. خلال CD4 - PLG تستخدم عملية اختبار الدم استقر التحكم (IMMUNOTROL) العادي منخفضة (450-700 خلايا CD4 / ميكرولتر) ومستويات منخفضة (100-200 خلايا CD4 / ميكرولتر ، اعتمادا على دفعات ؛ المرجع 23). هناك حاجة هذه القيم Immunotrol أن يكون في حدود 0.5 SD للمتوسط ​​مع السيرة الذاتية ٪ من 5 ٪ <على النحو المطلوب من قبل البرنامج الدولي IQAP BC - 24 ، المملكة المتحدة NEQAS 25 و 26 AFREQAS. المهم أن هذه التدابير مع المنظمة بسيطة كما هو موضح في الفيديو cytometers تدفق قوية قادرة على المحافظة على الاستقرار المطلوب لكلا الخلية المطلق العد مثل الاختبارات والقياسات CD4 كثافة مضان يستخدم لتنشيط علامة CD38. وقد تم مؤخرا هذا الاستقرار موثقة بالتفصيل 17 تؤكد دراسات سابقة أخرى باستخدام cytometers 15،27.

أثناء الصيانة الأسبوعية يتم أرشفة البيانات وضع قائمة (LMD) الملفات لتكون مرجعا في المستقبل ، وبعد ذلك يتم حذف هذه المواد المؤرشفة من محرك عداد الكريات الثابت.

صيانة شهرية تتضمن تنظيف الحاويات الكاشف ، غمد ، وclenz والدبابات النفايات. يتم تنظيف الرأس دائري وضع العينة في حين يتم أيضا إزالة جميع المرشحات وغسلها. وامتد هذا إلى تنظيف وإعداد محطات TQPrep PrepPlus2 (قبل الميلاد ، فلوريدا). يتم التحقق من صحة والماصات المستخدمة في إعداد دليل في المنزل على الأقل كل 3 أشهر ولكن إذا اشتبه خطأ pipetting تؤخذ فورا ماصة خارج الخدمة لاتخاذ إجراءات تصحيحية. ومن المقرر ستة الصيانة الشهرية التي كولتر بيكمان ، SA.

الوحدة 2 : تحضير عينات

لبروتوكول اللونين CD45/CD4 PanLeucogated 5 يستخدم بيكمان كولتر FlowCARE طقم 28 في إجراء ليز ، أي غسل (IMMUNOPREP ، بيكمان كولتر ، فلوريدا). هذه المجموعة تحتوي على CD45 - فلوريسئين - ثيوسيانات (FITC ؛ الخضراء) وCD4 - فيكوإيريترين (PE ؛ البرتقالي). يتم شراؤها تدفق عدد الخرز 29 بكميات كبيرة وتضاف إلى مشغل خاص تلعب دور الصديقة والمعروف numbeوpipetted التمرير من الخرز في مجلد ويعرف على الفور في 30 عينة. يتم ذلك مع نفس pipetting تستخدم لايصال حجم الدم. وبالتالي معدل العد الخرزة (BCR) في النطاق المتوقع يظهر أن يتم بدقة pipetting في نموذج معين ، كما هو موضح في الوحدة رقم 3 أدناه. الأهم هنا طريقة بسيطة pipetting ، ويشار إلى 'pipetting إلى الأمام' ، يعمل على نحو أفضل ، تنص على أن حبة ويتم تسليم كميات الدم مع نفس ماصة وغيض ومتطابقة مع تداول 30. وجدنا أن تسفر pipetting قدما التوحيد الشامل الأمثل بين المختبرات ، مع كل الاحترام لمشغلي تحقيق الأهداف pipetting ضمن حدود مقبولة والتسامح استنساخ المتكرر الاستغناء مقاسا التباين المشترك الفعال (٪ CV) 10،31،32. تمت الموافقة على هذه الطريقة ، التي قدمت في المؤتمرات المحلية 32 ، لاستخدامها في إطار خطة جنوب افريقيا الاعتماد الوطني (SANAS ، www.SANAS.co.za) المبادئ التوجيهية. هذا الاستخدام BCR من الخرز المختلف عن أساليب الفرز الحجمي أخرى حيث غالبا ما يتم استخدام المنتج مثل مجفف بالتجميد حبة الاستعدادات Trucount BDS التي تحتوي على أرقام معروفة من الخرز. هذه الاستعدادات ممتازة لتوثيق استقرار fluidics الصكوك التدفق من معدل التدفق الكونت (FCR) طريقة 20،31. ومع ذلك ، واستخدام أنابيب جاهزة حبة تحتوي على التكنولوجيا التي تجعل أكثر تعقيدا لان الناس هنا لا بد من ايصال الدم الى حجم هذه الأنابيب بدقة مطلقة قصوى. ومن المتفق عليه عموما أن لهذا الغرض فقط "عكس pipetting" التكنولوجيا هي مقبولة بعد التدريب المعمول بها. أسلوبنا BCR بالتالي ، أقل تكلفة ، بالمعلومات أكثر من ذلك ، أبسط وأسهل للتعلم ، كما هو مبين في الفيديو -- بالمقارنة مع أساليب بديلة مماثلة 10،31،32 نجد أيضا أن المشغلين باستخدام pipetting قدما هم أقل عرضة لل نضح في العينة التي ماصة مع pipetting العكسي يمكن أن يؤدي إلى ضرر على حد سواء إلى آلية داخلية ، والحاجة إلى إعادة معايرة وهي صعبة في الأماكن النائية. أسلوبنا BCR يغني أيضا على الحاجة إلى أنظمة مؤتمتة pipetting في المختبرات الصغيرة والمتوسطة الحجم (قائمة 1).

تتم معالجة عينات الدم دائما في خزانات بيولوجية الدرجة الثانية. من أجل تجنب الضجيج واسعة النطاق خلال التصوير ، والفيديو المعروضة على إعادة سن بمواد آمنة خارج هذه الخزانات. بروتوكول اقتناء PLG - CD4 على cytometers يسمح الوقت ليتوقف عند حد زمني معين أو الاستمرار في الحصول على أحداث 5000 لمفاوية لتحسين دقة على عينات مع التهم CD4 منخفضة.

الوحدة 3 : معدل العد الخرزة (BCR)

ويتم احتساب معدلات رصد الاعتماد حبة (BCR) في نظامنا أو مراقبة كل عينة باستخدام الصيغة حبة الأحداث / ثانية 10،13،30،32،33. الوسطية ، وتستخدم SD ٪ القيم الذاتية على جدول لتوليد مؤامرة لتحديد تسلسل القيم المتطرفة BCR 30. هذه العملية تؤكد الأمثل لهذه النظم الثلاثة لتجهيز ، وتحليل pipetting يشار إلى التحقق من إعداد العينات (SPV) ، ينطبق على كل من عينات pipetted يدويا أو باستخدام أداة pipetting PrepPlus2 الآلي 10.

خلال اقتناء يتم عرضها مباشرة على نتائج BCR في الوقت الحقيقي على شاشات. على cytometers ق قيمة BCR يعني هو 80 ± 5 أحداث / ثانية. نظهر أن يتم تحديد الشاذة BCR - S وإعادة التشغيل قبل ان يتم الافراج عن نتائج المريض. ويتضح خوارزمية شجرة القرارات في الشكل 1 (انظر ref.10 أيضا).

يشار إلى أعطال الصك التقلبات في BCR عندما رصدت خلال التحقق من الدقة طولية (LPV) للكشف عن الاتجاهات pipetting وأنماط والتحولات المفاجئة 10. Fluidics التحقق الدقة (FPV) هو اختياري في المنزل حيث يتم إجراء aliquoted إلى إضعاف واحد من الخرز في 10 أنابيب لشراء المسلسل لتأكيد علامات على عدم الاستقرار fluidic على صك يحتمل الفاسقة 10.

الوحدة 4 : CD45

لتعول مطلقة روتينية في دراساتنا يستخدم تعداد الدم الكامل محلل LH - 750 (بيكمان كولتر) ، معايرة الشهرية واليومية كمرجع لفرز الخلايا البيضاء (مجلس الكنائس العالمي) التي هي ضد مقارنة cytometers التدفق. يتم التحقق من صحة أيضا CD45 المولدة WCC - S على cytometers التدفق اليومي بالمقارنة مع المستويات الثلاثة للبيكمان كولتر استقرت 5C الضوابط كلها خلايا الدم. الحدود المقبولة في اتفاق بين مجلس الكنائس العالمي التهم CD45 تدفق وتحليل تعداد الدم الكامل و<5 ٪ 10. هذا يشير إلى أن القيود المفروضة على الموارد عندما تكون أكثر حدة ثم في خدمتنا من صك واحد ، مثل تدفق عداد الكريات ، ويبدو أن يكون كافيا لتوفير سريريا المناسبة بما في ذلك مجلس الكنائس العالمي CD4 التهم.

أبيض ميتم إجراء تعداد الفرق ليرة لبنانية على تحليل الدم المختلفة والتي تختلف ، ولا سيما في تقييم التهم الوحيدات. نمط التعبير CD45 الفرق هو استخدام تكنولوجيا تدفق الكلاسيكية لمجلس الكنائس العالمي الفرق 11،12 ، 34. كما ثبت تدفق عداد الكريات المستمدة CD45 مجلس الكنائس العالمي وتعول الفرق أن تكون دقيقة ودقيقة وقوية ، يمكن إدراج هذه بشكل روتيني في طريقة الاختبار PLG - CD4 كما سيتاح للأطباء في أي تكلفة اضافية.

ويلاحظ على أنماط شاذة CD45 المؤامرات مبعثر CD45/side البروتوكول PLG - CD4 ومتابعتها على فيلم ملون الدم موجه إلى إجراء مزيد من التحقيقات السريرية. هذا الأسلوب يكشف العدوى (البكتيرية والفيروسية) ، وسرطان الدم وسرطان الغدد الليمفاوية في كل من المرضى بفيروس نقص المناعة البشرية + السلبية وفيروس نقص المناعة البشرية 34 ، 35. خلال المخبرية الروتينية المتابعة للمرضى فيروس نقص المناعة البشرية + كثيرا ما عد الدم الكامل لم يطلب من المختبر الدم. ولذلك الشاذ CD45 أنماط التشخيص وبصراحة عندما لوحظت في العينات المرسلة للتعداد CD4. ميزة إضافية هي أنه لا يزال في الدقيقة العد CD4 تكون مطلقة ، حتى في المرضى الذين يعانون من اللوكيميا اللمفاوية نتائج أو في الدم 35.

هي مناسبة تماما لتوحيد تدفق الدم CD45. الصكوك الدم تختلف كثيرا عن بعضها البعض. نقترح إدخال CD45 القائم على التحكم في التدفق الجودة cytometric عن فروق WBC لمقارنة وتحليل الدم توحيد 10،36.

الوحدة 5 : CD4

بروتوكول PLG - CD4 أدخلت على البرنامج بيكمان كولتر XL يتكون من ثمانية الدوت المؤامرات. 4 من هذه تستخدم لتحديد التهم CD4 و 4 لرصد نوعية 12،13. من بين هذه ، وهما الدوت المؤامرات هو مبين في Fig.2 هامة. ويتم تحديد كافة الخلايا البيضاء باستخدام CD45 والتشرذم الجانب (منطقة A 2 دوت المؤامرة) ، في حين يتم تجاهل الحطام ، وخلايا الدم الحمراء / الأشباح والصفائح الدموية. ثم يتم نقل الأحداث + CD45 لمؤامرة دوت CD4 + 3 حيث يتم تحديدها من قبل التعبير عنها اللمفاويات CD4 مشرق وانخفاض الجانب مبعثر (منطقة C). وتحسب CD4 + عدد اللمفاويات المطلق من عدد من الأحداث في المنطقة ، ومجلس الكنائس العالمي C (في المنطقة F الكونت تدفق المعايرة). ويتم الحصول على قيم ٪ من الخلايا اللمفاوية CD4 من المنطقة B - مؤامرة نقطة 2. وCD4 + الخلايا اللمفية تي بقوة وCD4 + ضعيف يتعرضون للتمييز من قبل حيدات CD4 ومضان كثافة وميزات مبعثر دون الحاجة لاستخدام الخلايا التائية اضافي CD3 الضد محددة في الكوكتيل كاشف (استعرضت في ref.13).

الوحدة 6 : CD8/CD38

CD8 - CD38 تلطيخ هو جزء من تلطيخ 4 اللون باستخدام CD45-FITC/CD4-PE/CD8-ECD/CD38-PC5. وCD4/CD45 هو نفسه على النحو الوارد أعلاه (فيض العناية PLG - CD4) ، والكواشف اضافيين وأضاف CD8-ECD/CD38-PC5 17. إذا كان عداد الكريات يعمل فقط لونين ، يضاف أنبوب إضافية لأداء اللونين CD8-FITC/CD38-PE تلوين ، مرة أخرى باستخدام الإجراء ليز ، أي غسل (IMMUNOPREP ، بيكمان كولتر ، فلوريدا). ويستخدم استراتيجية مماثلة لتبوب CD4 + CD8 لتحديد الخلايا التائية CD8 تنمية الطفولة المبكرة ، مع الجانب مبعثر مقابل (الشكل 3). يتم رسم CD38 التعبير على الخلايا اللمفية + CD8 ومعلمة واحدة من الرسم البياني PC5 - CD38 يعني كثافة مضان (MFI) في مقابل 16،17 خلية العد. يتم رسم القيم الأصغر CD38 بالتتابع لكل زيارة للمريض نفسه. الزيارة الأولى (قبل العلاج) هو "خط" القيمة الأصغر الذي يتم مقارنة كل زيارة غيرها من مؤسسات التمويل الأصغر CD38 نفس الشخص ال 16.

وتستند الضوابط والاستقرار كما هو موضح في الصك الوحدة رقم 1 على اكتساب التدفق اليومي للتحقق لرصد محاذاة الليزر واستقرار التيار الكهربائي. تعيين تدفق مجموعات تعويض اللون لجميع القنوات الأربع فلوري (انظر أعلاه). Immunotrol هو "السلبية" مراقبة عملية العينة. في "ايجابية" ضوابط هي حيدات في الدم الطبيعي معربا عن 9 × 10 3 CD38 الجزيئات في الخلية ، والمعروفة عينة فيروس نقص المناعة البشرية + 17 غير المعالجة.

شبكة الوطنية لجنوب افريقيا مختبر الصحة العامة (SA - NHLS) اعتمدت مختبرات

أساليب مراقبة الجودة موحدة عبر 70 المختبرات 13 ، 33 مع قاعدة بيانات مركزية تحتوي على إجراءات التشغيل القياسية والمواد التدريبية. وساعدت في المختبرات في الشبكة من خلال المناقشات ، ومزيد من التدريب والاختبار العادية بما في ذلك التدقيق في pipetting التكنولوجيا 32،33. ويتم رصد برنامج تقييم الجودة الشهرية. في هذه الطريقة ، آلت إدارة الجودة على الصعيد الإقليمي ولكن الحفاظ على مستويات عالية مع مساهمة من وزارة QA NHLS SA - 13 ، 26.

قائمة 1 التكلفة المحتملة الادخار مع الخلوي منسقة في مرض فيروس نقص المناعة البشرية :

  1. استخدام أداة واحدة مع الألفة وعقد الخدمة ، بدلا من أبتبحر متعددة الصكوك الدم ، المناعية والفيروسية
  2. أداء المقايسات في أنبوب واحد ، من دون تكاليف اضافية وبدون ارسال عينات من وإلى مواقع مختلفة بما في ذلك كل من مجلس الكنائس العالمي WBC الفرق ، والاختبار ورصد CD4 التهم CD38MFI التكهن ردا على ART
  3. الإبلاغ الفوري للاستجابة لART مع مؤسسات التمويل الأصغر CD38 التقرير ، تحسن كبير بالنسبة لعدد مرات دوران التقليدية الإبلاغ VL فيروس نقص المناعة البشرية (الوقت الحقيقي)
  4. استخدام الوضوح والسريرية لتقييم النتائج مجتمعة على نماذج الإبلاغ نفسه
  5. قد تبطل الحاجة إلى صكوك pipetting التلقائي كطريقة بسيطة "إلى الأمام pipetting" يستخدم ورصد العينات التي BCR ،
  6. أثناء العملية ، يتم تعريف دقيق للمناولة العينات ونتائج الاختبار تصحيح إشكالية قبل أذن النتائج
  7. وقائية استباقية لإدارة عطل الصك تؤدي إلى خدمة الحجز في وقت مبكر قبل حادث شديد
  8. تشخيص الحالات لم تكن متصورة من الأورام اللمفاوية / اللوكيميا خلال نشاط خدمة روتين
  9. تمديد تكنولوجيا مماثلة لتدفق الدم ورصد phenotyping
  10. تنسيق اختبار CD38 مع تخزين بقع الدم المجففة (DBS) لاختبار فيروس نقص المناعة البشرية في جميع VL المرضى وتوفير التكاليف من خلال ارسال DBS للتقييم فقط إذا كان هناك مؤشرات سريرية أو CD38 للقيام بذلك
  11. تشبه تدفق التكنولوجيا ليحل محل الإنترفيرون γ - ELISpot الأسلوب في المقايسات السل
  12. مراقبة الجودة للمختبرات الطرفية التي تؤدي إلى "نقطة من الرعاية" CD4 الاختبارات
  13. توفير تكاليف الكواشف "غير مرغوب فيها" مثل الأجسام المضادة لCD3 وعلامات فرعية (ولكن بدلا من شراء CD38)
  14. شراء الجزء الأكبر من الخرز رخيصة لاختبار BCR (بدلا من شراء مكلفة قبل pipetted العد أنابيب)
  15. في المفاوضات ، شبكة مشتركة لمعظم أسعار فائدة مع الشركات التجارية

الشكل 1
الشكل 1. قرار شجرة / الخوارزمية المستخدمة عند عينة اختبار يظهر نتيجة خراج بلدة معدل العد حبة (BCR). المهمة الرئيسية هي استبعاد الخطأ pipetting مقابل الفشل الحجمي على فترات متقطعة. ويبين الرسم الأسباب المحتملة للأخطاء. ويشار أيضا إلى أن التي تتأثر رسوم بيانية وإحصائيات بروتوكول 10.

الشكل 2
الشكل 2 مثال على بروتوكول CD4 PLG يتضمن CD45 - FITC (أخضر ؛ محور س). المبعثر في مقابل الجانب (التعقيد ؛ المحور الصادي) وCD4 PE ؛ (البرتقالي ؛ X - المحور) مبعثر الجانب مقابل ( التعقيد ؛ المحور الصادي). بوابة "A" هو مجموع السكان الخلايا البيضاء مع مجموعة مختارة من البوابة "ب" الخلايا الليمفاوية. ونقلت بوابة "أ" إلى الرسم التخطيطي الثاني على اليمين من أجل التعرف على الخلايا اللمفاوية CD4 + في 'ج' البوابة.

الشكل 3
الشكل 3 مزيج من CD45/CD4 مقايسة panleucogating (في المخططات '2' و '3' ، وانظر أيضا Fig.2) مع مقايسة CD8/CD38 (في ''4 المخططات و'6). عندما يتم نقل leucocytes الإجمالي ("A" البوابة) إلى الرسم التخطيطي '4' ، هنا CD8 + الخلايا الليمفاوية هي بوابات على أساس تنمية الطفولة المبكرة ، CD8 ('x' المحور) ، والجانب مبعثر (' y' المحور ؛ كما هو موضح في 'D' البوابة). ثم يتم نقل خلايا + CD8 إلى ''6 تخطيطي لتصور شدة CD38 - PC5 تلطيخ في رسم تخطيطي واحد المعلمة. ويظهر هذا النحو 'G' المعلمة في مخطط '6'. يتم تسجيل يعني مضان CD38 - PC5 كثافة (MFI). ART على هذه القيمة تنخفض تدريجيا 16،17.

Discussion

في السنوات الأخيرة ساعدت برامج خيرية يحركها والمنحة المخصصة ، وإنشاء بعض الممارسات السريرية ممتازة في المناطق المحدودة الموارد من العالم مع عبء فيروس نقص المناعة البشرية العالية. برامج ART نجحت في خفض معدل وفيات ، ويجري الآن بدأت في أعلى CD4 التهم 2،3. هناك بالفعل دلائل على أن هذه التدابير الجديدة سوف تقلل من انتشار العدوى بفيروس نقص المناعة البشرية 4،5 ، على الرغم من عدم وجود لقاح ضد فيروس نقص المناعة البشرية محددة. في الوثيقة التي لدينا ونحن الفيديو عند رصد المرضى على ART ، يمكن أن تركز هذه التقنيات بشكل أفضل وتصبح أكثر فعالية من حيث التكلفة التي لوحظت في الممارسة الروتينية التي أجريت في المختبرات الغربية (قائمة 1).

مثل هذا النهج قد الافريقية التي تقودها تكون ضرورية لدعم تطوير خدمات المختبرات في وقت عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، وتعامل مع ART ، أصبح مرضا مزمنا. هذا يتطلب رصد ART CD4 دقيقة العد والفيروسية الحمل التكنولوجيا المتصلة بها ، وهي مهمة أكثر صعوبة من مجرد لأداء CD4 العد لوضع المرضى في مجموعات التعسفي من أجل مساعدة قرارا حول بدء ART 16. مع مساعدة من هذه التشخيصات ، وذلك باستخدام أي اختبار CD8/CD38 ، فمن الممكن للحد من تكاليف الرصد VL - المرتبطة في 60 ٪> من المرضى على ART 16،19. من المهم أيضا أن أؤكد أن هذا هو الاختبار CD8/CD38 16،17 ، وليس عدد CD4 37 ، التي من المرجح أن التقط كرة مرتدة من العلامات المبكرة VL و / أو عدم التزام المريض في تناول الدواء.

عنصرا أساسيا في خدمة فعالة من حيث التكلفة المنسقة المركزية هو توافر شبكة واسعة النطاق الوطني أو الإقليمي بدعم من الخبراء والمستشارين الأكاديميين الذين هم على دراية بالجوانب التقنية والطبية لهذه العملية. ويتجلى ذلك من خلال أنشطة شبكة NHLS جنوب أفريقيا ، وخطط التدريب CD4 - PLG.net 33 و 36 التي تقدم التشجيع والتعليم وتقييم جودة لأصغر هذه المراكز ويمكن أن تشمل أيضا "نقطة من الرعاية" الخدمات.

الأهم من ذلك أن عمليات المختبرات المركزية ونقطة من الرعاية متكاملان. في حين السابق له دور مزدوج لتوفير فعالة من حيث التكلفة عملية الخدمة على نطاق واسع ، فضلا عن التدريب الأساسي / المتقدمة لمختبرات المحيطية 33،38 ، وهذه الأخيرة تساهم في وقف انتشار فيروس نقص المناعة البشرية من خلال تجنيد ART + المرضى الذين يحق لهم ART من قاعدة أوسع ، بما في ذلك العيادات الريفية. هنا بعض الحذر ضروري لأن نقطة من الرعاية التشخيص يمكن أن يكون أكثر كلفة ولا تضمن دقة تلقائيا 38. ولذلك فمن المنطقي أن يحتفظ النظام المزدوج وتيسير التنسيق بين الطبقات من دون السماح لكلتا المجموعتين في التناقص.

في الختام ، في مجال رصد التشخيص السريري لإدارة الأمراض المعدية شرط ضروري لتوفير التكاليف يمكن تحقيقه عن طريق خدمات ملائمة التي تستخدم التكنولوجيا الحديثة أقل كلفة وأفضل تنسيقا مع نوعية 13،39 تحسنت بشكل ملحوظ. منظمة تنظيما جيدا الوطنية (والإقليمية) وينبغي توفير الخدمات التشخيصية دعم أفضل 6-8 عن طريق تجنب هذا السيناريو عندما يضيع تقريبا كل الدعم منحة على طرق مكلفة و / أو الذين لم يحاكموا حالما يتم استيراد هذه من البلدان الغنية بدون دقيق قبل بناءة التدقيق الوقائية. وبالمثل ، يجب أن يكون أكثر مرونة تصميم التجارب السريرية العلاجية بمشاركة كاملة من الأطباء المحليين والعاملين في الرعاية الصحية يؤدي إلى خفض و / أو تكرار لا داعي له الإفراط في الطموح الاختبارات المعملية 3. وهذه السياسة تعطي فرصة أكبر لأكمل الاستفادة من نتائج التشخيص الدقيق المتوفرة في تقييم منسقة السريرية / المختبرية للمرضى على ART. ويمكن تشخيص هذه ذكية أيضا رائدة بالنسبة للبلدان الفقيرة في الموارد 8 في مجالات السل وleukaemias باستخدام القائمة منصة تدفق مألوفة cytometric 40.

Disclosures

وصف حقوق براءات الاختراع الدولية لأسلوب CD4 هنا NHLS التي عقدها في جنوب أفريقيا ، وحاليا بموجب ترخيص لBCI ، ميامي ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية.

Acknowledgments

شكر خاص ومن المقرر ان دائرة الصحة المختبر الوطني (NHLS) من جمهورية جنوب أفريقيا لمنظمة وطنية لتدفق الخدمات المتعلقة بفيروس نقص المناعة البشرية التشخيصية (HTTP : \ \ www.nhls.ac.za وhttp://www.plgcd4 . صافي). وقد أجريت دراسات مميزة في قسم أمراض الدم والطب الجزيئي ، جامعة ويتووترسراند (جوهانسبرغ ، جنوب أفريقيا ، وبدعم من رئيس القسم ، البروفسور ويندي ستيفنز). وقد تلقى أي دعم من الكتاب منحة لهذا المنشور من قبل الشركات التجارية أو وكالات التمويل. الآراء التي أعرب عنها هي تلك التي من المؤلفين دون تعكس بالضرورة وجهات نظر المؤسسات التابعة لجامعة ويتواترسراند NHLS أو جنوب أفريقيا.

References

  1. UNAIDS Report on the global HIV/AIDS epidemic. , Available from: http://www.unaids.org/en/ KnowledgeCentre/HIVData/GlobalReport/2008/2008_Global_report.asp (2008).
  2. World Health Organization Rapid advice: Antiretroviral therapy for HIV infection in adults and adolescents. , Available from: http://www.who.int/hiv/pub/arv/rapid_advice_art.pdf (2009).
  3. Mugyenyi, P. DART Trial Team. Routine versus clinically driven laboratory monitoring of HIV antiretroviral therapy in Africa (DART): a randomized non-inferiority trial. Lancet. 375, 123-131 (2009).
  4. Donnell, D., Kiarie, J., Thomas, K., Baeten, J., Lingappa, J., Cohen, C., Celum, C. ART and risk of heterosexual HIV-1 transmission in HIV-1 serodiscordant African couples: A Multinational Prospective Study. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).
  5. Montaner, J., Wood, E., Kerr, T., Yip, B., Lima, V., Shannon, K., Harrigan, R., Hogg, R. Association of Expanded HAART Coverage with a Decrease in New HIV Diagnoses, Particularly among Injection Drug Users in British Columbia, Canada. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).
  6. Petti, C. A., Polage, C. R., Quinn, T. C., Ronald, A. R., Sande, M. A. Laboratory medicine in Africa: a barrier to effective health care. Clin Infect Dis. 42, 377-382 (2006).
  7. Brown, H. Global health: Great expectations. BMJ. 334, 874-876 (2007).
  8. Crisp, N. Turning the World Upside Down. Royal Society of Medicine Press. , (2009).
  9. Hecht, R., Bollinger, L., Stover, J., McGreevey, W., Muhib, F., Madavo, C. E., de Ferranti, D. Critical choices in financing the response to the global HIV/AIDS pandemic. Health Aff. 28, 1591-1605 (2009).
  10. Lawrie, D., Coetzee, L. M., Glencross, D. K. A model for continuous quality control incorporating sample-to sample assessment of optical alignment, fluorescence sensitivity and volumetric operation fo flow cytometers. Cytometry B Clin Cytom. 78, 201-208 (2010).
  11. Loken, M. R., Brosnan, J. M., Bach, B. A., Ault, K. A. Establishing optimal lymphocyte gates for immunophenotyping by flow cytometry. Cytometry. 11, 453-459 (1990).
  12. Glencross, D., Scott, L. E., Jani, I. V., Barnett, D., Janossy, G. CD45-assisted PanLeucogating for accurate, cost-effective dual-platform CD4+ T-cell enumeration. Cytometry. 50, 69-77 (2002).
  13. Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Aggett, H. M., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. Large-scale affordable PanLeucogated CD4+ testing with proactive internal and external quality assessment: in support of the South African national comprehensive care, treatment and management programme for HIV and AIDS. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S40-S51 (2008).
  14. Dalgleish, A. G. The CD4 (T4) antigen is an essential component of the receptor for the AIDS retrovirus. Nature. 312, 763-767 (1984).
  15. Liu, Z., Cumberland, W. G., Hultin, L. E., Prince, H. E., Detels, R., Giorgi, J. V. Elevated CD38 antigen expression on CD8+ T cells is a stronger marker for the risk of chronic HIV disease progression to AIDS and death in the Multicenter AIDS Cohort Study than CD4+ cell count. J Acquir Immune Defic Syndr Hum Retrovirol. 16, 83-92 (1997).
  16. Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. CD8/CD38 activation yields important clinical information of effective antiretroviral therapy: findings from the first year of the CIPRA-SA cohort. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S131-S140 (2008).
  17. Coetzee, L. M., Tay, S. S., Lawrie, D., Janossy, G., Glencross, D. K. From research tool to routine test: CD38 monitoring in HIV patients. Cytometry B Clin Cytom. 76, 375-384 (2009).
  18. Larsen, C. H. The fragile environments of inexpensive CD4+ T-cell enumeration in the least developed countries: strategies for accessible support. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S107-S116 (2008).
  19. Glencross, D. K., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Sanne, I., McIntyre, J. A., Janossy, G., Stevens, W. Longitudinal monitoring of CD38 activation can obviate costly viral load testing in 60% of patients on ART. 11th IUSTI World Congress, , (2009).
  20. Bergeron, M., Lustyik, G., Phaneuf, S., Ding, T., Nicholson, J. K., Janossy, G., Shapiro, H., Barnett, D., Mandy, F. Stability of currently used cytometers facilitates the identification of pipetting errors and their volumetric operation: "time" can tell all. Cytometry B Clin Cytom. 52, 37-39 (2003).
  21. Coulter, B. Flow Cytometer Alignment Verification Package insert of Flow-CheckTM Fluorospheres. Volume PN 4276179-LA. , Beckman Coulter USA. Galway. (2008).
  22. Coulter, B. Flow-SetTM Fluorospheres (Flow Cytometer Standardization Fluorospheres). Package insert of Flow-SetTM Fluorospheres. Volume PN 6607007. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).
  23. Coulter, B. Immuno-TrolTM Cells. Package insert of Immuno-TrolTM Cells. Volume PN 6607077. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).
  24. Beckman Coulter Hematology IQAP program. , Available from: https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/wsr/support/quality-assurance-programs/interlaboratory-quality-assurance-program-iqap/index.htm (2009).
  25. UKNEQAS. United Kingdom National External Quality Assessment Service. , Available from: http://www.ukneqas.org.uk (2009).
  26. Glencross, D. K., Aggett, H. M., Stevens, W. S., Mandy, F. African regional external quality assessment for CD4 T-cell enumeration: development, outcomes, and performance of laboratories. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S69-S79 (2008).
  27. Tilling, R., Kinloch, S., Goh, L. E. Parallel decline of CD8+/CD38++ T cells and viraemia in response to quadruple highly active antiretroviral therapy in primary HIV infection. AIDS. 16, 589-596 (2002).
  28. Coulter, B. FLOWCARETM PLG CD4 Reagent (CD45-FITC/CD4-PE). Package insert of FLOWCARETM PLG CD4 Reagent. , Beckman Coulter USA. Galway. (2004).
  29. Coulter, B. Flow-CountTM Fluorospheres. PN 7507992-M. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).
  30. Scott, L. E., Glencross, D. K. Monitoring reproducibility of single analysis, single platform CD4 cell counts in a high volume, low resource laboratory setting using sequential bead count rates. Cytometry B Clin Cytom. 67, 31-32 (2005).
  31. Storie, I., Sawle, A., Goodfellow, K., Whitby, L., Granger, V., Reilly, J. T., Barnett, D. Flow rate calibration: a new approach for performing absolute cell counts. Cytometry B Clin Cytom. 55, 1-7 (2003).
  32. Coetzee, L., Lawrie, D., Stevens, W., Glencross, D. K. Evaluation of pipetting methodology to assess precision and accuracy of single platform PLG/CD4 enumeration. 2nd SA-AIDS Congress, Durban, South Africa, , (2006).
  33. NHLS Training Manual, PLG/CD4 Workshop. , Available from: http://www.plgcd4.net/ (2008).
  34. Borowitz, M. J., Guenther, K. L., Shults, K. E., Stelzer, G. T. Immunophenotyping of acute leukemia by flow cytometric analysis. Use of CD45 and right-angle light scatter to gate on leukemic blasts in three-color analysis. Am J Clin Pathol. 100, 534-540 (1993).
  35. Mokone, G. N., Lawrie, D., Coetzee, L., Glencross, D. K. Interpretation of CD45 patterns in the PanLeucoGating CD4 test can be used for diagnosis of white cell abnormalities. Poster presentation. , (2007).
  36. Lawrie, D. The wide-spread clinical uses of PanLeucoGating technology in the HIV diagnosis oriented immunohaematology laboratory. PhD Thesis, in preparation. , (2010).
  37. Badri, M., Lawn, S. D., Wood, R. Utility of CD4 cell counts for early prediction of virological failure during antiretroviral therapy in a resource-limited setting. BMC Infect Dis. 8, 89 (2008).
  38. Peter, T., Badrichani, A., Wu, E., Freeman, R., Ncube, B., Ariki, F., Daily, J., Shimada, Y., Murtagh, M. Challenges in implementing CD4 testing in resource-limited settings. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S123-S130 (2008).
  39. Denny, T. N., Gelman, R., Bergeron, M., Landay, A., Lam, L., Louzao, R., Mandy, F. F., Schmitz, J., Spira, T., Wilkening, C., Glencross, D. K. A North American multilaboratory study of CD4 counts using flow cytometric panLeukogating (PLG): a NIAID-DAIDS Immunology Quality Assessment Program Study. Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S52-S64 (2008).
  40. Janossy, G. The changing pattern of "smart" flow cytometry (S-FC) to assist the cost-effective diagnosis of HIV, tuberculosis, and leukemias in resource-restricted conditions. Biotechnol J. 3, 32-42 (2008).

Tags

علم المناعة ، العدد 44 ، وفيروس نقص المناعة البشرية (الإيدز) ؛ خلايا CD4 اللمفاوية ، الخلايا البيضاء ، CD45 ، panleucogating وتنشيط الخلايا اللمفاوية ، CD38 ، فيروس نقص المناعة البشرية الحمل الفيروسي ، والعلاج المضاد للفيروسات الرجعية (ART) ، والداخلية لمراقبة الجودة
شاملة والتكلفة الفعالة لمختبر مراقبة فيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز : قدوة الأفريقية
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Lawrie, D., Janossy, G., Roos, M.,… More

Lawrie, D., Janossy, G., Roos, M., Glencross, D. K. Comprehensive & Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model. J. Vis. Exp. (44), e2312, doi:10.3791/2312 (2010).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter