Summary
כאן אנו מתארים פרוטוקול צעד אחר צעד של פירוק אבי העורקים הכירורגי במודל העכברים המבוסס היטב של התכווצות אבי העורקים. הליך זה לא רק מאפשר ללמוד את המנגנונים שבבסיס שיפוץ הפוך החדר השמאלי ורגרסיה של היפרטרופיה, אלא גם כדי לבדוק אפשרויות טיפוליות חדשניות שעשויות להאיץ את ההתאוששות שריר הלב.
Abstract
כדי להבין טוב יותר את החדר השמאלי (LV) שיפוץ הפוך (RR), אנו מתארים מודל מכרסמים שבו, לאחר שיפוץ LV הנגרמת על ידי תחבושת, עכברים עוברים RR עם הסרת התכווצות האב העורקים. במאמר זה, אנו מתארים הליך שלב אחר שלב לביצוע ניתוק אבי העורקים כירורגית זעיר פולשנית בעכברים. אקו-קרדיוגרפיה שימשה לאחר מכן כדי להעריך את מידת היפרטרופיה לב ותפקוד לקוי במהלך שיפוץ LV ו RR ולקבוע את התזמון הטוב ביותר עבור debanding אבי העורקים. בסוף הפרוטוקול נערכה הערכה המודינמית סופנית של תפקוד הלב, ונאספו דגימות למחקרים היסטולוגיים. הראינו כי debanding קשורה שיעורי ההישרדות כירורגית של 70-80%. יתר על כן, שבועיים לאחר debanding, הפחתה משמעותית של לאחר העומס בחדר מפעילה את הרגרסיה של היפרטרופיה חדרית (~ 20%) ופיברוזיס (~ 26%), התאוששות של תפקוד דיאסטולי כפי שהוערך על ידי נורמליזציה של מילוי חדרי שמאל ולחצים דיאסטוליים קצה (E / e ' ו LVEDP). ניתוק באבי העורקים הוא מודל ניסיוני שימושי לחקר LV RR במכרסמים. היקף ההתאוששות שריר הלב משתנה בין הנבדקים, ולכן, מחקה את המגוון של RR המתרחשת בהקשר הקליני, כגון החלפת שסתום אבי העורקים. אנו מסיקים כי מודל פסים /debanding אב העורקים מייצג כלי רב ערך כדי לפענח תובנות חדשניות לתוך המנגנונים של RR, כלומר רגרסיה של היפרטרופיה לב ואת ההתאוששות של תפקוד דיאסטולי.
Introduction
ההתכווצות של אב העורקים רוחבי או עולה בעכבר הוא מודל ניסיוני בשימוש נרחב עבור היפרטרופיה לב הנגרמת על ידי עומס יתר, תפקוד דיאסטולי וסיסטולי ואי ספיקת לב1,2,3,4. התכווצות העורקים מובילה בתחילה היפרטרופיה קונצנטרית (LV) של החדר השמאלי לפיצוי כדי לנרמל את לחץ הקיר1. עם זאת, בנסיבות מסוימות, כגון עומס לב ממושך, היפרטרופיה זו אינה מספיקה כדי להפחית את הלחץ על הקיר, מה שמפעיל תפקוד דיאסטולי וסיסטולי (היפרטרופיה פתולוגית)5. במקביל, שינויים במטריצה חוץ-תאית (ECM) מובילים לתצהיר הקולגן ולהצלבה בתהליך המכונה פיברוזיס, אשר ניתן לחלקו לפיברוזיס חלופי ופיברוזיס תגובתי. פיברוזיס הוא, ברוב המקרים, בלתי הפיך ומתפשר התאוששות שריר הלב לאחר הקלה עומס יתר6,7. עם זאת, מחקרי דימות תהודה מגנטית לב לאחרונה גילו כי פיברוזיס תגובתי הוא מסוגל לסגת בטווח הארוך8. בסך הכל, פיברוזיס, היפרטרופיה ותפקוד לקוי של הלב הם חלק מתהליך המכונה שיפוץ שריר הלב שמתקדם במהירות לכיוון אי ספיקת לב (HF).
הבנת התכונות של שיפוץ שריר הלב הפכה למטרה מרכזית להגבלה או היפוך ההתקדמות שלה, האחרון המכונה שיפוץ הפוך (RR). המונח RR כולל כל שינוי שריר הלב הפוך באופן כרוני על ידי התערבות נתונה, טיפול תרופתי כזה (למשל, תרופות נגד יתר לחץ פנים), ניתוח שסתום (למשל, היצרות אבי העורקים) או מכשירי סיוע חדריים (למשל, HF כרוני). עם זאת, RR הוא לעתים קרובות לא שלם בשל היפרטרופיה השוררת או תפקוד סיסטולי / דיאסטולי. לכן, ההבהרה של מנגנוני RR הבסיסית ואסטרטגיות טיפוליות חדשניות עדיין חסרים, וזה בעיקר בשל חוסר האפשרות לגשת וללמוד רקמת שריר הלב האנושי במהלך RR ברוב החולים האלה.
כדי להתגבר על מגבלה זו, מודלים מכרסמים מילאו תפקיד משמעותי בקידום ההבנה שלנו של מסלולי האיתות המעורבים בהתקדמות HF. באופן ספציפי, ניתוק אבי העורקים של עכברים עם התכווצות אבי העורקים מייצג מודל שימושי ללמוד את המנגנונים המולקולריים שבבסיס שיפוץ LV שלילי9 ו RR10,11 כפי שהוא מאפשר איסוף של דגימות שריר הלב בנקודות זמן שונות בשני שלבים אלה. יתר על כן, הוא מספק הגדרה ניסיונית מצוינת לבחון מטרות חדשניות פוטנציאליות שיכולות לקדם / להאיץ RR. לדוגמה, בהקשר היצרות אבי העורקים, מודל זה עשוי לספק מידע על המנגנונים המולקולריים המעורבים במגוון העצום של התגובה שריר הלב שבבסיס השלמות (in) של RR6,12, כמו גם, העיתוי האופטימלי להחלפת שסתום, המייצג חסרון גדול של הידע הנוכחי. ואכן, העיתוי האופטימלי להתערבות זו הוא נושא לדיון, בעיקר משום שהוא מוגדר על סמך גודלם של שיפועים בגור העורקים. מספר מחקרים תומכים כי נקודת זמן זו עשויה להיות מאוחר מדי עבור התאוששות שריר הלב כמו פיברוזיס ותפקוד דיאסטולי הם לעתים קרובות כברנוכחים 12.
למיטב ידיעתנו, זהו המודל החייתי היחיד כי מסכם את התהליך של שיפוץ שריר הלב והן RR המתרחשים בתנאים כגון היצרות אבי העורקים או יתר לחץ דם לפני ואחרי החלפת שסתום או תחילתה של תרופות נגד יתר לחץ דם, בהתאמה.
בניסיון להתמודד עם האתגרים שסוכמו לעיל, אנו מתארים מודל חיה כירורגי שניתן ליישם הן בעכברים והן בחולדות, תוך התייחסות להבדלים בין שני מינים אלה. אנו מתארים את הצעדים והפרטים העיקריים הכרוכים בביצוע ניתוחים אלה. לבסוף, אנו מדווחים על השינויים המשמעותיים ביותר המתרחשים ב- LV מיד לפני ולאורך RR.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל הניסויים בבעלי חיים מצייתים למדריך לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה (פרסום NIH מס' 85-23, מתוקן ב-2011) והחוק הפורטוגלי לרווחת בעלי חיים (DL 129/92, DL 197/96; פ' 1131/97). הרשויות המקומיות המוסמכות אישרו פרוטוקול ניסיוני זה (018833). עכברי C57B1/J6 זכרים בני שבעה שבועות נשמרו בכלובים מתאימים, עם סביבת מחזור רגילה של 12/12 שעות בחושך בהיר, טמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס ולחות של 60% עם גישה למים וליביטום מודעת דיאטה סטנדרטי.
1. הכנת השדה הכירורגי
- לחטא את אתר הניתוח עם 70% אלכוהול ומניחים שולחן ניתוח חד פעמי לכסות על האזור הכירורגי.
- לעקר את כל המכשירים לפני הניתוח.
הערה: הליך זה דורש מספריים מיקרו כירורגיות, 2 מלקחיים מעוגלים עדינים, 3 מלקחיים ישרים עדינים, אזמל, מלקחיים קטנים, מספריים מפרק זוויתי, מחזיק מחט, סיוע קשירה אולטרה-דק, 2 hemostats, ולבסוף, מערכת פיתול קיבוע מגנטי מומלץ מאוד (איור 1A). - עקום את קצה המחט הקהה 26 G ל 90° לגישה קלה יותר לאגור העורקים. מחט בקוטר 26 גרם תיצור צמצום של 0.45 מ"מ בציר העורקים (איור 1B).
- כוונן את טמפרטורת כרית החימום ל-37 ± 0°C(0°C).
2. הכנת עכברים וצנרור
- הרדמה עכברים צעירים C57B1/J6 (20-25 גרם) על ידי שאיפה של 8% sevoflurane עם 0.5 - 1.0 L /min 100% O2 בצינור חרוט.
- בדוק את עומק ההרדמה באמצעות רפלקס משיכה צביטה בוהן.
- מניחים את העכבר על שכיבה הגב על צלחת נוטה ולהמשיך לצנרור orotracheal.
- להזיז את העכבר אל כרית החימום במהירות לחבר את הצינור orotracheal למכונות ההנשמה ליזום את ההנשמה מכני.
- להתאים את הפרמטרים מאוורר לתדר של 160 נשימות / דקה ונפח גאות ושפל של 10 מ"ל / ק"ג.
3. הכנה לניתוח (הן לניתוחי פסים והן לניתוחים)
- לגלח ולהחיל את קרם depilatory מן הצוואר לרמת החזה האמצעי של העכברים.
- יש למרוח ג'ל עיניים על עיני בעלי החיים כדי למנוע התייבשות מהקרנית.
- מניחים בדיקה רקטלית ואת oximeter על כף רגל או זנב לניטור טמפרטורה וחמצון בדם, וקצב הלב, בהתאמה.
הערה: הרדמה מעוררת היפותרמיה משמעותית, ולכן, חשוב לשמור על טמפרטורת גוף נורמלית במהלך הניתוח, כדי למנוע ירידה מהירה בקצב הלב. - לשמור על הרדמה עם sevoflurane (2.0 - 3.0%). בדוק את הרמה הנכונה של הרדמה על ידי חוסר רפלקס צביטה בוהן.
- הניחו את העכברים בדקוביטוס ימני-לרוחב על כרית חימום ואבטחו את הגפיים למערכת הנסיגה של המקבע המגנטי באמצעות קלטת כדי לשמור על החיה במצב הנכון במהלך הניתוח (איור 2, איור 3A).
- לחטא את חזה העכבר עם 70% אלכוהול ואחריו לספק פתרון יוד.
4. ניתוח פסים של פי העורקים העולה
הערה: לקבלת תיאור פרוטוקול מפורט, התייעץ עם 2,3,4,13.
- עם להב חד פעמי, לבצע חתך קטן (~ 0.5 ס"מ) העור בצד שמאל מיד מתחת לרמת אקסילה לנתח את העור.
- בעדינות לנתח ולהפריד את שריר החזה ושכבות שרירים אחרות עד הצלעות להיות גלוי. השתמש מלקחיים עדינים ולהימנע חיתוך השריר.
- תחת מיקרוסקופ, זהה את החללים הבין-צלעיים ופתח חתך קטןבין החלל הבין-צלעיהשני והשלישי עם מלקחיים עדינים.
- שחזרו את הצלעות על ידי הנחת מחזר החזה (איור 2A).
- השתמש מלקחיים קטנים בעדינות לנתח ולהפריד את האונות התימית עד אבי העורקים עולה הופך גלוי.
הערה: אפליקטורים כותנה צריך להיות שימושי במקרה של דימום. מלוחים סטריליים חמים צריכים להינתן תת עורית במקרה של דימום משמעותי (למשל, עורק החלב). - השתמש במלקחיים קטנים כדי לנתח בעדינות את העורקים.
הערה: Aorta נחשב להיות מנותח כאשר אין שומן או הידבקויות אחרות סביבו וניתן בקלות לכתר את הכלי עם מלקחיים עקומה קטנה. - לאחר ניתוח בגור העורקים, הניחו ליגטורת פוליפרופילן 7-0 סביב אגירה באמצעות סיוע קשירה ומלקחיים מעוגלים (איור 2B).
- מקם את המחט הקהה של 26 גרם במקביל לאגורטה (קצה המכוון לכיוון ראש העכברים) (איור 2B). עבור עכברים במשקל 20-25 גרם, מחט זו גורם לשחזור 65-70% התכווצות של העורקים.
- צרו 2 קשרים רופפים סביב העורקים ומחט ה-26 G בעזרת 2 מלקחיים(איור 2B).
- הדקו את הקשרה-1, ובמהירות לאחר מכן, את הקשרהשני. לאשר בקצרה את המיקום הנכון של ההתכווצות ולהסיר במהירות את המחט כדי לשחזר את זרימת הדם בציר העורקים. לבסוף, לעשות קשר3 (קבוצת BA).
- מקם מחדש את התימוס והשרירים למצבם הראשוני.
- בצע את הליך הזיוף זהה להליך ההתכווצות אך שמירה על התפירה רופפת סביב העורקים (קבוצת SHAM).
- חותכים את הקצוות של התפירה ולהסיר את רקטור החזה.
הערה: קצות תפר קצרים עשויים להגדיל את ההסתברות של קשרים מתרופפים עם לחץ על העורקים, בעוד קצוות ארוכים להפוך את הליך debanding מסוכן יותר מאז הידבקויות יכול להתרחש בין התפר לבין אטריום שמאל. - סגור את דופן החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט מופרע או מתמשך באמצעות המספר הנמוך ביותר של תפרים אפשריים. הדק את קשר החזה האחרון עם הריאות מנופח בסוף השראה על ידי צבט את זרימת ההנשמה עבור 2s כדי לנפח מחדש את הריאות.
- סגור את העור עם תפר משי /פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה.
הערות: אם נעשה שימוש במאוורר עדכני יותר, ניתן לתכנת אותו להשהות בהשראה (Setup-Advanced-Pause-Inspiring)
5. טיפול לאחר הניתוח
- יש למרוח תמיסת יוד באתר התפרים של העור.
- עבור משככי כאבים נאותים, לנהל buprenorphine תת עורית 0.1 מ"ג / קילוגרם, פעמיים ביום, עד החיה מתאוששת לחלוטין (בדרך כלל 2-3 ימים לאחר הניתוח).
- להזריק מלוחים סטריליים תוך-אופן כדי למנוע התייבשות במקרה של דימום משמעותי במהלך הניתוח.
- מכבים את ההרדמה (מבלי להכתיר את העכבר) ומחכים עד שהחיה תתאושש מהרפלקסים (תנועות שפם הן אות התעוררות) ותתחיל לנשום באופן ספונטני.
- הסר את קנולה קנה הנשימה.
- תן לחיה להתאושש באינקובטור ב-37 מעלות צלזיוס.
- החזירו את החיה לחדר מחזור אור/כהה של 12 שעות לאחר החלמה מלאה.
6. ניתוח להשבתת העורקים
- שבעה שבועות לאחר מכן, לבצע את debanding של העורקים במחצית בעלי החיים BA ולהסיר את התפר רופף ממחצית העכברים SHAM, הוליד 2 קבוצות חדשות - debanding (DEB) ו debanding SHAMA (DESHAM), בהתאמה. DESHAM מייצג את הפקד עבור הקבוצה DEB (איור 4).
- חזור על כל השלבים 2.1 עד 3.6 שהוזכרו לעיל.
- לנתח בעדינות את הרקמות, הידבקויות, פיברוזיס סביב העורקים עד ההתכווצות שלה הופך גלוי.
- לנתח בזהירות את העורקים ולהפריד את התפר מן העורקים. חותכים את התפירה במספר מספריים אביבי זוויתי חד-בדיקה(איור 3B).
- סגור את דופן החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט מופרע או מתמשך באמצעות המספר המינימלי של תפרים אפשריים.
הערה: נסה להדק את תפר החזה האחרון כאשר הריאות מנופחות כדי למנוע pneumothorax. - סגור את העור עם תפר משי /פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה.
- בצע את כל הליכי הטיפול שלאחר הניתוח כאמור ב- 5.
- להקריב את החיות 2 שבועות מאוחר יותר.
7. אקו לב כדי להעריך את תפקוד הלב והשאיר היפרטרופיה חדרית ב vivo
- בצע את הבדיקה אקו כל 2-3 שבועות כדי לעקוב אחר ההתקדמות של היפרטרופיה ותפקוד הלב.
- הרדמה את בעלי החיים, כמתואר, על ידי שאיפה של 5% sevoflurane עם חרוט האף. התאימו את רמת ההרדמה על ידי הפחתתה ל-2.5%.
- לגלח ולהחיל את קרם depilatory מן הצוואר עד רמת החזה באמצע החזה.
- מניחים את החיה על כרית חימום ומניחים את אלקטרודות א.ק.ג. להבטיח עקבות אק"ג טוב ולשמור על קצב הלב בין 300 ל 350 פעימות / דקה.
- לפקח על הטמפרטורה (~ 37 מעלות צלזיוס).
- יש למרוח ג'ל הד ולמקם את החיה בדבקה צדדית שמאלית.
- הפעל את ההד והתאם את ההגדרות.
- מקם בדיקת אולטרסאונד מעל בית החזה.
- להעריך את שיפוע הלחץ על פני הרצועות ב 7 ו 2 שבועות לאחר פסים וניתוח debanding, בהתאמה. מקמו את הגשוש בציר הארוך של LV והניחו את הקרן מעל העורקים. לחץ על הלחצן PW כדי להפעיל אקו-קרדיוגרפיה של דופלר. לאחר שבעה שבועות של פסים, שיפוע בצינור יהיה >25 מ"מ-ח"ג בבעלי החיים התחבושות.
- הקלט תמונות מונחות דו מימדיות של אבירה המראות את נוכחותו או היעדרו של התכווצות העורקים העולה כדי לדמיין באופן אנטומי את היעילות של הפסים וההתפרקות.
הערה: ניתן לדמיין זרימה סוערת ברמת ההתכווצות אם מצב הצבע זמין. - להעריך היפרטרופיה על ידי מיקום החללית בציר קצר LV, ברמת השרירים הפפילריים, ולחץ על מעקב מצב M כדי לדמיין קיר LV קדימי (LVAW), קוטר LV (LVD) וקיר אחורי LV (LVPW) בדיסטול (D) וסיסטולה (S) (איור 5).
- להעריך את הפונקציה הסיסטולית, לחשב את שבר הפליטה וקיצור שבר כפי שתואר קודם לכן14,15.
- להעריך את הפונקציה הדיאסטולית על ידי 1) קביעת השיא של דופלר גל פעמו של מהירות זרימה מיטרלית מוקדמת ומאוחרת (E ו- A גלים, בהתאמה) באמצעות נוף apical 4 תאים apical רק מעל העלונים המיטרליים; 2) הקלטת דיאסטולי מוקדם (E) ו שיא של מהירויות סיסטוליות (S') תוך שימוש ב- TDI פעמו ובתצוגה אפיקלית של 4 תאים (איור 5).
- רשום לפחות שלוש פעימות לב רצופות לכל הערכת פרמטר. ערכים אלה יהיו ממוצעים לאחר מכן.
8. הערכה המודינמית
- בסוף הפרוטוקול (איור 4), בצע אקו-קרדיוגרפיה סופית, כמתואר ב-7, לפני ההערכה המודינמית של הטרמינל.
- חזור על שלבים 2.1 עד 3.6.
- ניתן ללגום את הווריד הצווארי הנכון ולהחדיר מלוחים סטריליים ב 64 מ"ל / קילוגרם / שעה.
- לסובב מעט את החיה בצד שמאל ולעשות חתך בעור ברמה של נספח xiphoid.
- להפריד את העור מן השריר עם מלקחיים או עם מספריים.
- בצע חתך לרוחב בין הצלעות השמאליות ברמת התוספתן xiphoid.
- בצע כריתת חזה לרוחב שמאל כדי לחשוף את הלב במלואו.
הערה: כדי למנוע דימום ונזק לריאות, הכנס ספוגית כותנה לחלל בית החזה ודחוף את הריאה בעדינות תוך החדרת שני hemostats בצד ימין ושמאל של המקום לחתוך. - מחממים מראש את קטטרי הלולאה P-V באמבט מים ב-37 מעלות צלזיוס.
- כייל את הקטטר (התקנה, הגדרת ערוץ, בחר את הערוץ הנכון עבור לחץ ועוצמה, יחידות).
- הכנס קטטר באופן נקודתי לתוך LV ולהבטיח חיישני עוצמת הקול ממוקמים בין שסתום אבי העורקים לשיא. ניתן להעריך כרכים באמצעות אקו לב (איור 5). הדמיה של לולאות עוצמת הלחץ מסייעת לאשר את המיקום הנכון של הצנתר (איור 6).
- אפשר לחיה לייצב 20-30 דקות ללא שינויים משמעותיים בצורת לולאות נפח הלחץ.
- עם אוורור מושעה בסוף התפוגה, לרכוש הקלטות בסיסיות (איור 6). באופן רציף לרכוש נתונים ב 1,000 הרץ כדי להיות מנותח לאחר מכן כבוי על ידי תוכנה מתאימה.
- לחשב מוליכות מקבילה לאחר בולוס מלוחים היפרטוני (10%, 10 μL).
- בעודו מורדם, להקריב את החיה על ידי exsanguination, לאסוף צנטריפוגה הדם.
- לבסוף, בלו ולאסוף את הלב. משקלל את הלב, השמאלי, ואת החדר הימני בנפרד ומיד לאחסן את הדגימות חנקן נוזלי או פורמלין למחקרים מולקולריים או היסטולוגיים הבאים, בהתאמה.
9. הליך רצועות/ביטול פסים של העורקים בחולדות
- בצע רצועות אב העורקים ב- Wistar הצעיר (70-90 גרם) באמצעות מחט 22 G ו 6-0 ליגטורת פוליפרופילן כדי לכווץ את אב העורקים.
- להבטיח הליכים הרדמה ומשככי כאבים נאותים עם 3-4% של sevoflurane ו 0.05 מ"ג / קילוגרם של buprenorphine, בהתאמה.
- במהלך אקו לב, להבטיח קצב הלב תמיד מעל 300 קצב / דקה (באופן אידיאלי בין 300 ל 350).
- לפני שלב 8.9, בעדינות לנתח את העורקים החולדה, למקם בדיקה זרימה סביבו כדי למדוד את תפוקת הלב. השימוש בגשוש הזרימה של העורקים הוא הליך תקן הזהב לחולדות.
- להערכה המודינמית, cannulate וריד הצוואר או הירך לניהול נוזלים (32 מ"ל / קילוגרם / שעה).
- החלף את קטטר נפח הלחץ SPR-1035 על ידי SPR-847 או SPR-838, שגודלם מתאים יותר למידות חדר החולדה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
הישרדות לאחר הניתוח והישרדות מאוחרת
ההישרדות perioperative של הליך רצועה הוא 80% ואת התמותה במהלך החודש הראשון הוא בדרך כלל <20%. כאמור, ההצלחה של ניתוח ההשבתה תלויה מאוד עד כמה פולשני היה הניתוח הקודם. לאחר עקומת למידה, שיעור התמותה במהלך הליכי ההשבתה הוא סביב 25%. עבור תמותה זו חשבונות בעיקר מקרי מוות במהלך הליך הניתוח, כולל אבי העורקים או קרע אטריום שמאל (בחולדות, שיעור ההישרדות גבוה יותר בשני הניתוחים).
רצועות אבי העורקים ושיפוץ שריר הלב
ההצלחה של התכווצות אב העורקים אומתה על ידי לחץ סיסטולי קצה LV מוגבר (LVESP) ועל ידי מהירויות זרימה של אב העורקים דופלר >2.5 m/s, אשר תואם הדרגתי לחץ של 25 מ"מHg באמצעות משוואת ברנולי שונה (איור 5). בהשוואה לעכברי SHAM, תחבושת הנגרמת על ידי היפרטרופיה LV כפי שהוערך על ידי מסה LV מוגברת(טבלה 1 ואיור 5)ותפקוד דיאסטולי לקוי ניכר על ידי לחצי מילוי גבוהים יותר (יחס מהירות שיא מיטרלית של מילוי מוקדם (E) למהירות אנאלית מיטרלית דיאסטולית מוקדמת (E'), (E/e'), ולחץ דיאסטולי שמאלי (LVEDP) והרפיה (LVEDP) טבלה 1, איור 5 ואיור 6) בתוך 7 שבועות. שבר הפליטה עדיין נשמר בשלב זה של המחלה.
מבחינה היסטולוגית, שבעה שבועות של רצועות באבי העורקים גרמו להיפרטרופיה ופיברוזיס קרדיומיוציטים משמעותיים (איור 7).
ניתוק אבי העורקים ושיפוץ היפוך שריר הלב
בעכברים שנחשפו להסרה, הסרה מוצלחת של היצרות באב העורקים אומתה על ידי מהירויות הד דופלר (טבלה 1 ואיור 5). בסך הכל, debanding קידם ירידה משמעותית של לאחר העומס (ירידה LVESP) ו LV היפרטרופיה (מוערך על ידי מורפומטריה, אקו לב, והיסטולוגיה). יתר על כן, ראינו נורמליזציה של תפקוד דיאסטולי ומהירויות של כאבי העורקים (טבלה 1, איור 5, איור 6 ואיור 7).
טבלה 1: שינויים במורפופולציה של החדר השמאלי המוערכים על ידי אקו-קרדיוגרפיה ועל ידי המודינמיקה.
| שלבים קריטיים | עצה |
| פולשנות של ניתוח הפסים |
חשוב להימנע: ● חסימה ממושכת של אבי העורקים העולה במהלך הקשירה, אשר עלול להוביל בצקת ריאות והפעלה של מסלולים דלקתיים המסוגלים להשפיע על פנוטיפ וחומרת המחלה15 ● דימום של העורק המימי אשר, אם לא עקף בזמן, יכול להוביל לירידה בלחץ הדם ולקדם כמויות גבוהות יותר של פיברוזיס בעת פתיחתו מחדש של בית החזה (debanding); ● פגיעה בעכברים pleura וריאות; מיני השאיר כריתת חזה לרוחב עבור רצועות ו debanding (אותו מקום; מחקר נוכחי) לעומת בית החזה לרוחב שמאל עבור פסים עצם החזה לניתוח debanding11: ● הראשון הוא פחות פולשני ויש להם זמן התאוששות קצר, אשר משפר את ההצלחה של haemodynamic החזה הפתוח שבוצע שבועיים לאחר מכן. עם זאת, השימוש באותה תנוחה כדי לפתוח מחדש את החזה יכול להגדיל את מספר הסיבוכים עקב הידבקויות (סביב אטריום שמאל, עורק ריאתי, וכו '). להתגבר על בעיה זו על ידי בעל extracarefull במהלך הליך רצועה. |
| הפנמת תפר |
ניתן למנוע זאת באמצעות: ● שני תפרים פסים זה לצד זה16; ● משי במקום פוליפרופילן11; ● קליפי טיטניום או אורינגים סביב העורקים כדי לגרום להתכווצות שלה21; ● כפול לולאה קליפ thecnique15; ● אזיק מתנפח לבצע פסים על-פתכתים על-חושיים22. |
| פרמטרים פיזיולוגיים |
במהלך הניתוח חשוב לפקח: ● קצב הלב; ● חמצון בדם, שמירה על זה מעל 90% (במיוחד במהלך manupilation אבא); ● הרדמה, שמירה על המינון הנמוך ביותר האפשרי מבלי לגרום אי נוחות על החיה. |
טבלה 2: שלבים קריטיים של הפרוטוקול.
איור 1: כלים כירורגיים עדינים במיוחד המשמשים להליכי פסים והתפרקות. (A)2 מחזיקי מחטים ולהב אזמל; 2 קטטרים עבור אינטובציה עכברים ומספריים; אזמל, 2 מלקחיים מעוגלים, סיוע קשירה, מספריים מיקרוכירורגיים, 3 מלקחיים ישרים; (B)ו 26G-מחט קהה קהה 26G-מחט מעוגלת כדי להתאים את העכברים פתח בית החזה קטן כראוי. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: הליך פסים של העורקים. (A) הגישה בית החזה אל העורקים העולה שבוצעה בעזרת מערכת פיתול קיבוע מגנטי (3 מפשקים גלויים). (ב)העורקים העולה מנותח בבירור וגלוי לעין. המחט הקהה ותפר פוליפרופילן 6-0 ממוקמים בעמדה הנכונה כדי לבצע את פסים בצינור. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: הליך ההפחתה של העורקים. (A) העכבר ממוקם במערכת נסיגה מגנטית, המייצג כלי שימושי כדי לחזור בו השרירים והרקמות. העכבר צנרר לאוורור מכני. בדיקה רקטלית שולטת בטמפרטורה ואוקסימטר ממוקם על כף העכברים הימנית כדי לפקח על חמצון הדם במהלך הניתוח. פיברוזיס ורקמות חסידים מוסרים בקפידה סביב העורקים והתפר, כדי להיות מסוגל לחתוך את התפר (B) ו -( C). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: תכנון פרוטוקול ניסיוני לעכברים. שיפוץ שריר הלב (אדום) ושיפוץ הפוך (ירוק) מוצגים בתחתית יחד עם כל משימות ההערכה. ראוי לציין, ניתוח debanding יכול להוליד שתי קבוצות של בעלי חיים עם דרגות ברורות של שיפוץ הפוך. לפיכך, השגנו עכבר DEB עם שחזור שריר הלב מלא (DEB-COMP) ולא שלם (DEB-INCOM). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 5: הערכה אקוקרדיוגרפית של מבנה ותפקוד הלב. (A) מהירויות זרימת העורקים; (B)מסה LV; (C)מידות חדריות (קוטר LV, LVD) ועובי הקיר (קיר אחורי LV, LVPW וקיר LV, LVAW); (D) זרימה משדרת (שיא של גל דופלר דופק של מהירות זרימה מיטרלית מאוחרת, A, ושיא של גל דופלר פעמו של מהירות זרימה מיטרלית מוקדמת, E) ו - (E) מהירויות שריר הלב (מהירות רקמות מיטרלית מיטרלית דיאסטולית מאוחרת, A '; מהירות רקמות מיטרלית מיטרלית דיאסטולית מוקדמת, E' ומהירות רקמה מיטרלית מיטרלית סיסטולית, S'). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 6: לולאות נפח לחץ מייצגות עבור קבוצות SHAM, BA ו- DEB. הנתונים נרכשו ברציפות ב 1000 הרץ ולאחר מכן נותחו לא מקוון על ידי תוכנת PVAN. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 7: היפרטרופיה שריר הלב ופיברוזיס העריכו מבחינה היסטולוגית. (A) היפרטרופיה של חדר שמאלי מוערכת על ידי אזור אזורי של קרדיומיוציטים של המטוקסילין-אאוסין (HE)-מוכתמים (5 מיקרומטר) מ- SHAM (n = 17), BA (n = 14) וקבוצת DEB (n = 12). (B)פיברוזיס ביניים חדרי שמאלי ותמונות מייצגות של מקטעים מוכתמים בסיריוס אדום (5 מיקרומטר) מ- SHAM (n = 17), BA (n = 13) ו- DEB (n = 12). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
המודל המוצע בזאת מחקה את התהליך של שיפוץ LV ו- RR לאחר פסים ו debanding שלאבי העורקים, בהתאמה. לכן, הוא מייצג מודל ניסיוני מעולה כדי לקדם את הידע שלנו על המנגנונים המולקולריים המעורבים שיפוץ LV שלילי כדי לבדוק אסטרטגיות טיפוליות חדשניות מסוגל לגרום התאוששות שריר הלב של חולים אלה. פרוטוקול זה מפרט כיצד ליצור מודל של חיית מכרסמים של פסים אבי העורקים ו debanding עם טכניקה כירורגית זעיר פולשנית ושמרנית מאוד כדי להפחית את הטראומה הכירורגית.
הצעד הקריטי ביותר של הפרוטוקול קשור למידת התוקפנות הכירורגית במהלך תחבושות אבי העורקים. ההצלחה של ניתוח ההפחתה הבא באב העורקים תלויה מאוד בהליך פסים זעיר פולשני הנמנע מתוקפנות רקמות ופיברוזיס סביב העורקים, ולכן גישה פחות פולשנית היא חובה (טבלה 2). הפנמת התפירה קשורה פחות היפרטרופיה LV ותפקוד לב טוב יותר16 (טבלה 2) ועושה את הליך debanding בלתי אפשרי לבצע מבלי לגרום קרע באב העורקים. במחקר הנוכחי ניסינו להשתמש במשי, שכן הוא יוצר רקמה צלקתית יותר באתר הפסים, מה שמעורר מידה יציבה יותר של עומס לחץ. עם זאת, בידיים שלנו, הניתוח debanding היה תובעני יותר כאשר משי שימש שכן הוא חוט multifilament מה שהופך אותו הסרה מוחלטת מן אבי העורקים קשה יותר. עם זאת, אלה הן בעיות טכניות כי הם נרחב פרוטוקול ומפעיל תלויים, וריאציות אלה, סוג של תפר, אינו עולה בקנה אחד עם פרקטיקות טכניות טובות ותוצאות הרבייה. ניטור פרמטרים פיזיולוגיים במהלך פסים ובמיוחד במהלך ההשבתה הוא חובה להצלחת הטמעת הדגם (טבלה 2).
בשנת 1991, רוקמן ואח ', תיאר את התכווצות האב העורקים הרוחבית (TAC) בעכבר בפעם הראשונה4. מאז יצאה כמות ניכרת של ניירות המספקים גרסאות רבות של הליך זה עם וריאציות לגבי גיל/גודל החיה 17, רקע גנטי עכברים18, קוטר המחט / התכווצות19, החומר המשמש לפסים, המיקום של הרצועה,משך הפסים 19 ו debanding11. כל החלופות המתודולוגיות הללו תקפות כל עוד הן ממלאות את מטרות כל מחקר. עם זאת, עלינו להדגיש כי התקדמות המחלה לכיוון אי ספיקת לב היא מהירה יותר ולכן RR הוא שלם יותר בעת בחירה: 1) משך פסים ארוך יותר, 2) כבד / ישן יותר העכברים20 ו 3) קוטר מחט קטן יותר המשמש להתכווצות אבי העורקים (אחוז גבוה יותר של התכווצות אבי העורקים)16.
משך הפסים וההתפרקות משפיעים באופן משמעותי על שלב המחלה, ולכן על ההתאוששות במהלך RR. כמו כן, בחירת העיתוי הנכון עבור debanding היא חובה להסתגל לחומרת המחלה חזויה. התוצאות שנצפו במחקר שלנו הן בהתאם לחיה טרום קיום11,21 ומחקרים בבני אדם22, למעט היפרטרופיה cardiomyocytes, שם כמה מחקרים הראו נורמליזציה שלה10,21 ואחרים רגרסיה חלקית שלה23. יתר על כן, מחקרים הראו כי, רגרסיה פיברוזיס יכול להתרחש בטווח הארוך (70 חודשים עבור חולים אנושיים)24. התוצאות נראות תלויות בטכניקה המשמשת לטיפול בפיברוזיס25. לאחרונה, Treibel et al. הצליחו להבדיל בין תאים (מיוציטים, פיברובלסט, אנדותל, תאי דם אדומים) ותאי חוץ תאיים (ECM, פלזמת דם) בחולים עם היצרות אבי העורקים לאחר החלפת שסתום אבי העורקים (AVR) באמצעות תהודה מגנטית לב וכלי דם עם T1 מיפוי22. הם תיארו כי רגרסיה של מסה LV בעקבות AVR יכול להיות מונע על ידי 1) רגרסיה מטריצה לבד, שם נפח חוץ תאיים מפחית; 2) רגרסיה תאית לבד, שם נפח חוץ תאי עולה; 3) או על ידי רגרסיה פרופורציונלית בתאי הסלולר והמטריצה, שבהם הנפח החוץ תאי אינו משתנה22. מחברים אלה הגיעו למסקנה כי, בעקבות AVR, בעוד פיברוזיס מפוזרים ונסיגת היפרטרופיה תאית שריר הלב, פיברוזיס מוקד לא פותר. לכן, פיברוזיס ביניים מפוזרים, כפי שהוערך על ידי נפח מטריקס, הוא יעד טיפולי פוטנציאלי. במחקר שלנו, הפחתת פיברוזיס נראה להתרחש בתוך 2 שבועות של RR ולפני נורמליזציה היפרטרופיה cardiomyocytes. כמו כן, להקריב את בעלי החיים 2 שבועות לאחר debanding היה העיתוי המושלם כדי להשיג מגוון חדרית בקרב קבוצת DEB, כלומר בעלי חיים עם התמדה תפקוד דיאסטולי (DEB-INCOM) ואחרים עם היפוך מסה LV מלא ושיפור תפקוד דיאסטולי (DEB-COM). יתר על כן, ברגע 2 שבועות לאחר debanding, הראינו בעבר שינויים משמעותיים בחדר הימני בקבוצת פסים להתאושש חלקית לאחר debanding26, בעוד Bjornstad ואח 'דיווח על נורמליזציה של ביטוי גנים עובריים, המעיד על שיפוץ שריר הלב בתוך אותה מסגרת זמן11.
ההליך הכירורגי של רצועות / debanding יכול להתבצע גם בחולדות26, עם זאת, כמה הבדלים צריך להיות מודגש. בשל גודלו הגדול יותר, חולדות יש שכבות שריר יותר עכברים אשר מקטין הדמיה של העורקים ומעכב את מיקום הקשירה סביב העורקים. מצד שני, הסיכון לפגיעה ברקמות ובאיברים סמוכים, כגון אטריה או ריאות, ממוזער. כדי להתגבר על הנושא של הפנמת תפר השתמשנו קשירה פוליפרופילן גדול יותר בחולדות להחזיק חזק את העורקים (6.0 במקום 7.0 פוליפרופילן).
עקב מניפולציה של אב העורקים, ניתוחי פירוק עלולים להקטין את תפוקת הלב על ידי הטלת עומס נוסף על LV ובכך לפגוע במחזור הדם ובמערכת הנשימה. בהשוואה לעכברים, חולדות נראות עמידות יותר לתקופת הרדמה ממושכת יותר ולכן קל יותר לשמור על הפרמטרים הנשימתיים הפיזיולוגיים נשלטים במהלך ניתוח ההשמדה הארוך. בחולדות, התפתחות היפרטרופיה LV היא מהירה יותר מאשר עכברים, אבל זה לוקח יותר זמן כדי להתקדם לאי ספיקת לב. לכן, ניתוח debanding יכול להיעשות בין 5-9 שבועות לאחר הליך פסים מבלי להתפשר על שבר פליטה26.
המגבלה העיקרית של מודל בעלי החיים פסים / debanding הוא מיומנויות microsurgical תובעני וטכניקה של המפעיל, בדרך כלל דורש עקומת למידה ארוכה כדי לבצע את הניתוח debanding. מגבלה נוספת היא חוסר האפשרות לבצע המודינמיקה בחזה קרוב בעכבר וחולדה, אשר יהיה פיזיולוגי יותר. עם זאת, על ידי שימוש בשיטה זו היא חובה להכניס את הקטטר מן העורק הראשי הנכון LV אשר, במקרה מסוים זה לא ריאלי שכן ב פסים בעלי חיים עולה אב העורקים הוא מכווץ לפני ענפי העורק הראשי. יתר על כן, בעכבר, לא הצלחנו למדוד התכווצות ללא עומס (ESPVR) ופרמטרים דיאסטוליים (שיפוע של EDPVR) על ידי ביצוע תמרון חסימת ורידים, פרמטר חשוב לאפיון הולם של תפקוד שריר הלב. מצאנו את התמרון הזה קשה לבצע בעכברים עם התכווצות אבירה עולה בשל גודלם הקטן (20-25 גרם).
יישום עתידי של מודל בעלי חיים פסים / debanding כולל פיתוח של גישות טיפוליות חדשניות למחלות שריר הלב ואפיון של המסלולים העומדים ביסוד תהליך של שיפוץ LV ו RR.
לסיכום, מודל קליני רלוונטי זה מאפשר לאפיין באופן זמני ומכניסטי את ההתקדמות לכיוון HF, כמו גם, ההתאוששות שלה שכן היא מאפשרת איסוף של דגימות שריר הלב בשלבים שונים של שיפוץ שריר הלב ו- RR. יתר על כן, זה מוכיח להיות מודל ניסיוני שימושי לבדיקת אסטרטגיות טיפוליות שמטרתן התאוששות הלב הכושל.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
למחברים אין ניגוד אינטרסים.
Acknowledgments
המחברים מודים קרן פורטוגזית למדע וטכנולוגיה (FCT), האיחוד האירופי, Quadro de Referência Estratégico Nacional (QREN), פונדו אירופהו דה Desenvolvimento האזורי (FEDER) ו Programa אופרציונאל פקטורים דה Competitividade (להתחרות) למימון יוניק (UID / IC / 00051/2013) יחידת מחקר. פרויקט זה נתמך על ידי FEDER באמצעות COMPETE 2020 – Programa Operacional Competitividade E Internacionalização (POCI), הפרויקט DOCNET (NORTE-01-0145-FEDER-000003), הנתמך על ידי התוכנית התפעולית האזורית של נורטה פורטוגל (NORTE 2020), במסגרת הסכם השותפות של פורטוגל 2020, באמצעות הקרן האירופית לפיתוח אזורי (ERDF), הפרויקט NETDIAMOND (POCI-01-0145-FEDER-016385), הנתמך על ידי קרנות מבניות והשקעות אירופיות, התוכנית התפעולית האזורית של ליסבון 2020. דניאלה מירנדה-סילבה ופטרישה רודריגז ממומנות על ידי Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) על ידי מענקי מלגות (SFRH/BD/87556/2012 ו- SFRH/BD/96026/2013 בהתאמה).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Absorption Spears | F.S.T | 18105-03 | To absorb fluids during the surgery |
| Blades | F.S.T | 10011-00 | To perform the skin incision |
| Buprenorphine | Buprelieve | Analgesia drug | |
| Catutery | F.S.T | 18010-00 | To prevent exsanguination |
| Catutery tips | F.S.T | 18010-01 | To prevent exsanguination |
| cotton swab | Johnson's | To absorb fluids during the surgery | |
| Depilatory cream | Veet | To delipate the animal | |
| Disposable operating room table cover | MEDKINE | DYND4030SB | To cover the surgical area |
| Echo probe | Siemens | Sequoia 15L8W | Ultrasound signal aquisition |
| Echocardiograph | Siemens | Acuson Sequoia C512 | Ultrasound signal aquisition |
| End-tidal CO2 monitor | Kent Scientific | CapnoStat | To control expiration gas saturation |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11255-20 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11272-30 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11151-10 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11152-10 | To dissect the tissues and aorta |
| Gas system | Penlon Sigma Delta | To anesthesia and mechanical ventilation | |
| Hemostats | F.S.T | 13010-12 | To hold the suture before tight the aorta |
| Hemostats | F.S.T | 13011-12 | To hold the suture before tight the aorta |
| Ligation aids | F.S.T | 18062-12 | To place a suture around the aorta |
| Magnetic retractor | F.S.T | 18200-20 | To help keep the animal in a proper position |
| Needle holder | F.S.T | 12503-15 | To suture the animal |
| Needle 26G | B-BRAUN | 4665457 | To serve as a molde of aortic constriction diameter |
| Oxygen | Air Liquide | To anesthesia and mechanical ventilation | |
| Polipropilene suture | Vycril | W8304/W8597 | To suture the animal and to do the constriction |
| Povidone-iodine solution | Betadine® | Skin antiseptic | |
| PowerLab | Millar instruments | ML880 PowerLab 16/30 | PV loop Signal Aquisition |
| Pulse oximeter | Kent Scientific | MouseStat | To control heart rate and blood saturation |
| PVAN software | Millar Instruments | To analyse the haemodynamic data | |
| PV loop cathether | Millar instruments | SPR-1035. 1.4 F | PV loop Signal Aquisition |
| Retractor | F.S.T | 17000-01 | To provide a better overview of the aorta |
| Scalpet handle | F.S.T | 10003-12 | To perform the skin incision |
| Scissors | F.S.T | 15070-08 | To cut the suture in debanding surgery |
| Scissors | F.S.T | 14084-09 | To cut other material during the surgery e.g. suture, papper |
| Sevoflurane | Baxter | 533-CA2L9117 | |
| Temperature control module | Kent Scientific | RightTemp | To control animal corporal temperature |
| Ventilator | Kent Scientific | PhysioSuite | To ventilate the animal |
| Water-bath | Thermo Scientific™ | TSGP02 | To maintain water temperature adequate to heat the P-V loop catethers |
References
- Arany, Z., et al. Transverse aortic constriction leads to accelerated heart failure in mice lacking PPAR-gamma coactivator 1alpha. Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 103 (26), 10086-10091 (2006).
- Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. Journal of Visualized Experiment. (127), e56231 (2017).
- Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. Journal of Visualized Experiment. (121), e55293 (2017).
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proceedings of the National Academy of Science. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- Koide, M., et al. Premorbid determinants of left ventricular dysfunction in a novel model of gradually induced pressure overload in the adult canine. Circulation. 95 (6), 1601-1610 (1997).
- Rodrigues, P. G., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. Myocardial reverse remodeling: how far can we rewind. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 310 (11), 1402-1422 (2016).
- Weidemann, F., et al. Impact of myocardial fibrosis in patients with symptomatic severe aortic stenosis. Circulation. 120 (7), 577-584 (2009).
- Bing, R., et al. Imaging and Impact of Myocardial Fibrosis in Aortic Stenosis. JACC Cardiovascular Imaging. 12 (2), 283-296 (2019).
- Conceicao, G., Heinonen, I., Lourenco, A. P., Duncker, D. J., Falcao-Pires, I. Animal models of heart failure with preserved ejection fraction. Netherlands Heart Journal. 24 (4), 275-286 (2016).
- Weinheimer, C. J., et al. Load-Dependent Changes in Left Ventricular Structure and Function in a Pathophysiologically Relevant Murine Model of Reversible Heart Failure. Circulation Heart Failure. 11 (5), 004351 (2018).
- Bjornstad, J. L., et al. A mouse model of reverse cardiac remodelling following banding-debanding of the ascending aorta. Acta Physiologica (Oxford). 205 (1), 92-102 (2012).
- Yarbrough, W. M., Mukherjee, R., Ikonomidis, J. S., Zile, M. R., Spinale, F. G. Myocardial remodeling with aortic stenosis and after aortic valve replacement: mechanisms and future prognostic implications. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 143 (3), 656-664 (2012).
- deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H.
- Hamdani, N., et al. Myocardial titin hypophosphorylation importantly contributes to heart failure with preserved ejection fraction in a rat metabolic risk model. Circulation: Heart Failure. 6 (6), 1239-1249 (2013).
- Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. Journal of Visualized Experiment. (112), e54101 (2016).
- Lygate, C. A., et al. Serial high resolution 3D-MRI after aortic banding in mice: band internalization is a source of variability in the hypertrophic response. Basic Research in Cardiology. 101 (1), 8-16 (2006).
- Platt, M. J., Huber, J. S., Romanova, N., Brunt, K. R., Simpson, J. A. Pathophysiological Mapping of Experimental Heart Failure: Left and Right Ventricular Remodeling in Transverse Aortic Constriction Is Temporally, Kinetically and Structurally Distinct. Frontiers in Physiology. 9, 472 (2018).
- Garcia-Menendez, L., Karamanlidis, G., Kolwicz, S., Tian, R. Substrain specific response to cardiac pressure overload in C57BL/6 mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 305 (3), 397-402 (2013).
- Melleby, A. O., et al. A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice. Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).
- Li, Y. H., et al. Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice. The Journal of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 58 (10), 895-899 (2003).
- Ruppert, M., et al. Myocardial reverse remodeling after pressure unloading is associated with maintained cardiac mechanoenergetics in a rat model of left ventricular hypertrophy. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 311 (3), 592-603 (2016).
- Treibel, T. A., et al. Reverse Myocardial Remodeling Following Valve Replacement in Patients With Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 860-871 (2018).
- Dadson, K., et al. Cellular, structural and functional cardiac remodelling following pressure overload and unloading. International Journal of Cardiology. 216, 32-42 (2016).
- Krayenbuehl, H. P., et al. Left ventricular myocardial structure in aortic valve disease before, intermediate, and late after aortic valve replacement. Circulation. 79 (4), 744-755 (1989).
- McCann, G. P., Singh, A. Revisiting Reverse Remodeling After Aortic Valve Replacement for Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 872-874 (2018).
- Miranda-Silva, D., et al. Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload. Science Reports. 9 (1), 2956 (2019).
