Summary
本プロトコルは、低用量のイソフルランを用いたラットから安定した安静状態機能的磁気共鳴画像法(rs−fMRI)データを得るための方法を、低用量デクスメデトミジンと組み合わせて説明する。
Abstract
安静状態の機能的磁気共鳴画像法(rs-fMRI)は、休息、非タスク状態で脳機能を研究するためにますます一般的な方法となっています。本プロトコルは、rs-fMRIデータを得るための前臨床生存法を記述する。低用量イソフルランとα 2 アドレナリン受容体アゴニストデキスメデトミジンの連続注入を組み合わせることで、脳ネットワーク機能を維持しながら安定した高品質のデータ取得のための堅牢なオプションを提供します。さらに、この手順は、ラットの自然呼吸およびほぼ正常な生理学を可能にする。追加のイメージングシーケンスは、この方法を使用して最大5時間の麻酔安定性を有する実験プロトコルを作成する安静状態取得と組み合わせることができます。このプロトコルは、装置の設定、麻酔の4つの異なる段階におけるラット生理学のモニタリング、静止状態スキャンの取得、データの品質評価、動物の回復、および後処理データ分析の簡単な議論を記述する。このプロトコルは、休息中に発生する結果として生じる脳ネットワークの変化を明らかにするために、臨床前げっ歯類モデルの多種多様にわたって使用することができます。
Introduction
安静状態機能磁気共鳴画像法(rs-fMRI)は、脳が安静で特定のタスクに従事していない場合の血中酸素レベル依存性(BOLD)シグナルの尺度である。これらの信号は、脳領域間の相関関係を測定して、ニューラルネットワーク内の機能的な接続性を決定するために使用することができます。rs-fMRIは、その非侵襲性と患者の必要な労力の少ない(タスクベースのfMRIと比較して)のために臨床研究で広く使用され、多様な患者集団に最適である1。
技術の進歩により、rs-fMRIはげっ歯類モデルで使用できるように適応し、疾患状態の基礎となるメカニズムを明らかにしました(レビューについては、参照2 を参照)。疾患またはノックアウトモデルを含む前臨床動物モデルは、ヒトでは適用されない広範な実験的操作を可能にし、また研究は、実験をさらに強化するために事後分析サンプルを利用することもできる2。それにもかかわらず、動きを制限することとストレスを軽減することの両方の困難のために、げっ歯類のMRI獲得は伝統的に麻酔下で行われる。麻酔薬は、それらの薬物動態、薬力学、および分子標的に応じて、脳血流、脳代謝に影響を及ぼし、神経血管結合経路に影響を与える可能性がある。
神経血管結合と脳ネットワーク機能3、4、5、6、7、8を維持する麻酔プロトコルを開発するための多くの努力がありました。我々は以前に、α 2アドレナリン受容体アゴニストデクスメデトミジン9の低用量と一緒にイソフルランの低用量を適用する麻酔療法を報告した。この麻酔法の下でラットは、確立された投影経路(腹側および腹腔視床核、一次および二次体性体性感覚皮質)と一致する領域におけるウィスカー刺激に対する堅牢なBOLD応答を示した。デフォルトモードネットワーク10、11およびsalienceネットワーク12を含む大規模な休止状態の脳ネットワークも一貫して検出されている。さらに、この麻酔プロトコルは、同じ動物に繰り返しイメージングを可能にし、これは疾患の進行と実験操作の効果を縦方向に監視するために重要である。
本研究では、実験のセットアップ、動物の調製、および生理学的モニタリング手順を詳述する。特に、各段階における特定の麻酔段階とスキャンの取得について述べています。データ品質は、各休止状態スキャンに従って評価されます。また、スキャン後の分析の概要も説明します。ラットでrs-fMRIを使用する可能性を明らかにすることに興味を持っている研究所は、このプロトコルが有用であることがわかります。
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Protocol
すべての実験は9.4 T MRIスキャナーで行われ、ダートマス大学の制度的動物ケアと使用委員会によって承認されました。ビデオや下の図で使用されている動物を記録し、表示するために追加の承認を得ました。
1. スキャン前の準備
- 皮下注入ライン
- そのパッケージから23G針を部分的に取り除き、針点が無菌のままになるようにします。
- 針のハブをしっかりと保持し、カミソリの刃を使用して、ハブと出会う針シャフトをスコアリングします。
- スコアリングの真下のシャフトの周りに針ホルダーをクランプし、ハブからシャフトをそっと壊します。
- 薬物ポンプからマグネットボア内の動物まで伸びるのに十分なライン長さで、以前に殺菌されたPE50ラインに針シャフト(鈍い端)の1/3を挿入します。
- デキセメデトミジンとアティパメゾールの希釈
- 透明で無菌のガラス瓶に9.5mLの無菌生理食塩水を混合した0.5mg/mLストック0.5 mLを使用して、希釈デックスメデトミジン塩酸塩の溶液を調製します(希釈濃度= 0.025 mg/mL)。
- 透明で無菌のガラス瓶に9.9mLの無菌生理食塩水を混合した5mg/mLストックの0.1 mLを使用して、希釈されたアティパメゾールの溶液を調製します(希釈濃度= 0.05 mg/mL)。
- スキャンパラメータ
- 表 1に示すパラメーターを使用して、スキャン シーケンスを準備します。
2. 第1相麻酔:動物の誘導と準備
- セットアップ
- 酸素およびエアミキサー、加熱パッド、アクティブ清掃システムなど、すべての機器がオンで、正常に動作していることを確認します( 図1を参照)。
- 加熱システムの温度設定ポイントを37.5 °Cに設定します。
- 動物誘導
- 誘導室に動物(90日齢、雄のスプレイグ・ドーリーラット)を入れ、30%酸素濃縮空気中の2.5%イゾフルランで麻酔を誘発する。
注:動物の年齢と男女の広い範囲を使用することができます。 - 動物が麻酔されたら、チャンバーから取り出し、動物の重量を量り、準備スペースの加熱パッドの鼻コーン(2.5%イオブルラン)に置きます。
- 誘導室に動物(90日齢、雄のスプレイグ・ドーリーラット)を入れ、30%酸素濃縮空気中の2.5%イゾフルランで麻酔を誘発する。
- 動物の準備
- 乾燥を防ぐために、眼用潤滑軟膏を各目に塗布してください。
- つま先ピンチ応答の欠如によって麻酔の深さを確認します。
- バリカンを使用して、動物の背中の下腰部領域(すなわち、尾の真上)の2インチ2インチ正方形の領域を剃ります。
- 腹腔内注射(例えば、300gラットは0.18mLを受け取る)を25G針を用いて腹部の右下象限に0.015mg/kgのデキセメデトミジン溶液を投与する。
- 準備スペースから動物のクレードルへのイオブルランの流れを切り替える。
- 動物の揺りかごに動物を移動します。ラットの前歯をしっかりと噛み付くバーに入れます。鼻の上に鼻コーンを押して、しっかりとフィットするようにします。
注:鼻コーンが下顎を覆っていない場合は、パラフィンフィルムを使用して顎を静かに閉じ、鼻コーンの周りを密閉します。 - 呼吸パッドをリブケージの下のラットの腹部の下に置き、呼吸波形が呼吸の中心となる深いトラフを示すまで再配置する( 図2の呼吸波形を参照)。
- 生理学のモニタリングソフトウェアを使用して、動物の呼吸を監視します。呼吸が40回/分未満の場合、麻酔の次の段階に移行します (bpm; デクスメデトミジン注射後約5分).
3. 第2相麻酔:動物のセットアップ
- 耳の棒を外耳道に入れ、動物の揺りかごの中でラットの頭部を安定させる。一度配置したら、一口バーを前方に引っ張り、頭が動かないことを確認します。必要に応じて、ノーズコーンとパラフィンフィルムを再調整します( 図3aを参照)。
- 温度プローブを、あらかじめ潤滑された使い捨てプローブカバーに挿入します。温度プローブを約1/2インチの位置に静かに挿入し、医療テープで尾部のベースにテープで貼ります。
- パルスオキシメータクリップを後足の中足領域に置き、光源が足の底(手のひら)に点灯していることを確認します。
メモ:クリップの回転は信号に影響を与える可能性があります。したがって、足とクリップを直立に保つホルダーを作成すると、安定性が向上します。また、ラットが常温になるまで、酸素飽和度が低い(<95%)ことに注意してください。 - ラットの体重を使用して、デキスメデトミジンの0.015 mg/kg/hを排出する注入速度を計算します(300グラムのラットは0.18 mL/hを受け取ります)。
- 薬剤ポンプを設定して、計算された注入速度を排出します。
- 3 mL シリンジに滅菌、希釈デキスメデトミジン溶液を充填し、滅菌注入ラインのオープンエンドに針の先端を挿入します(薬物ポンプから動物のクレードルまで、以前に取り付けられた皮下注射針で伸びる)。ラインを充填し、薬物ポンプの注射器ホルダーに注射器を固定します。
- プランジャーに触れるまでプッシャーブロックを前方に移動し、薬物を針で排出し、注入ラインが完全に満たされていることを確認します。
- アルコール拭き取りを使用して、剃った部分をきれいにして、迷子の髪を取り除きます。
- 尻尾のベースの上に約 2 本の指幅の皮膚をつまみます。注入線の針の1/3をテントの皮膚に挿入します。
- 3インチの広い医療テープで針を皮膚に固定します。第1の上に2枚目の広い医療テープを置き、ラットを横切り、動物の揺りかごの両側に取り付けた( 図4参照)。
注:強磁性針がスキャン中の動きを防ぐために十分に固定されている重要です。 - 皮下デクスメデトミジンの注入を開始します。.
- ラットの鼻の橋の上にガーゼを置き、コイルのレベルサーフェスを作成します。MRI信号を妨げない紙テープを使用して、コイルをラットの頭に固定し、脳の上に中央に配置します(図3b,cを参照)。
- 動物のクレードル内のすべてのラインとケーブルをラボテープで固定し、すべての生理学的信号が安定しているかどうかを確認します( 図2を参照)。
- 動物の上にペーパータオルを置き、実験室のテープで動物の揺りかごに固定します。空気加熱システムを使用する場合は、プラスチックシートをクレードル全体に巻き付け、暖かい空気を含めます。
- 動物を穴に移動し、磁石を調整します。
4. 第3相麻酔:解剖学的スキャン獲得
- イオブルランを1.5%に減らし、呼吸を約45〜50bpmに着実に増加させます。解剖学的スキャンの間、このレベルに留まる。
- FLASH ローカライザースキャンを使用して、脳が磁石アイソセンターに合っていることを確認します (図 5a)。動物の位置を変更し、必要に応じて繰り返します。
- 高分解能の RARE ローカライザースキャンを実行し、このスキャン出力を使用して、脳を中心とした 15 個の矢状スライスを整列させます (左から右、図 5b)。
- 中央の矢状スライスを使用して、中心軸スライスを、暗いスポットとして表示される前部コミュシュアのデシテーションに合わせます(図5c)。後で休止状態スキャンで使用するスライス オフセットに注意してください。
- フラッシュとRAREの両方の軸プロトコルを使用して23のスライスを取得し、スキャン後の分析中に共通空間への登録を支援します。
- プレスシーケンスを使用して脳全体を横切ってシム。
5. フェーズ 4: 休止状態のスキャン取得
- 解剖学的スキャンを完了した後、イソフルランを0.5%から0.75%に減らし、動物の呼吸が毎分60〜65呼吸になるように調整します。安定性を確保するために、休止状態のスキャンを開始する前に、少なくとも10分間このレベルに留まる。
- 生理学が安定している場合(呼吸範囲は、あえぎや凹凸のない60-75 bpm、コア体温は37.5±1.0°C、酸素飽和度は95%以上)、解剖軸シリーズと同じスライスオフセットを使用して15スライスEPIスキャンを取得します。
- 各休止状態スキャンが完了したら、独立したコンポーネント分析 (ICA) を使用して品質を確認し、データを空間コンポーネントと時間コンポーネントに分解します。
- 少なくとも3つの高品質な休止状態スキャンを取得します。
6. スキャン後の回復
- スキャンが完了したら、イゾフルランを2%に増やし、皮下デクスメデトミジンの注入を停止します。
- マグネットボアから動物のクレードルを取り出し、動物をアンラップし、耳棒、温度プローブ、パルスオキシメータクリップ、およびデキスメデトミジン針を取り除きます。
- 25G針の1mLシリンジを使用して、希釈したアティパメゾール溶液を0.015mg/kgをラットの後ろ脚筋に注入します(すなわち、300gラットは0.09mLを受け取ります)。
- ラットを暖房パッドの上のホームケージに戻し、動物が歩行するまで監視します。
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Representative Results
各休止状態スキャンに続いて、独立したコンポーネント分析(ICA; 補助ファイルに含まれるスクリプトの例)を使用して安定性が評価されます。 図 6 は、休止状態スキャンからのコンポーネント出力の例を示しています。 図6a は、安定性の高いスキャンからの信号成分を示す。空間的には、コンポーネントの地域性が高いことに注意してください。空間成分の下の時間コース内では、信号は安定しており、予測できない、真の脳活動を示す。下部の電力スペクトルは主に低周波数を示しています。 図6b は、ノイズを表す 図6a と同じスキャンからのコンポーネントを示しています。空間成分の非地域性、高周波時間経過、およびパワースペクトルにおける高周波ピークに注意してください。最後に、 図6c は、不安定な麻酔を伴うスキャンからの成分を示す。時間の経過は可変的で不規則です。これが起こると、麻酔プロトコル、一般的にノーズコーンのシールと廃棄物ガスの清掃に改善が必要です。
図1:準備スペースとMRI動物のクレードル。 真空は、誘導室と動物のクレードルのノーズコーンの両方からの廃棄物ガスを清掃します。加熱パッドは、フェーズ1および回復の両方の間に動物の温度を維持するのに役立ちます。b) MRI動物のゆりかご。上部は、フェーズ 2 の動物の設定のコンポーネントを示します。下には、ラットが完全にセットアップされ、スキャンの準備ができていることを示しています。 この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図2: 生理学的スキャン出力 酸素飽和度(PulseOx、96%)、心拍数(325 BPM[毎分拍数])、呼吸数(61呼吸/分)、およびコア体温(T1、37.5°C)は、スキャンセッションを通じて常に監視されます。 この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図3:ノーズコーンとコイルの配置() 動物の鼻と下顎の周りに密封された鼻コーンのビューを閉じる。(b) 脳に対する表面コイルの位置合わせのオーバーヘッドビュー。(c)コイルの側面図は、動物の目の中点との位置合わせ。この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図4:皮下デクスメデトミジン注入ラインと針の配置(a)動物の背中の下部腰部への注射。(b)動物の皮膚に針を固定するテープ。(c)強磁性針の動きを防ぐため、動物の揺りかごを横切るテープ。この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図5:解剖学的スキャンアライメント. () ローカライザースキャンは、十字線で示される磁石アイソセンターに動物の脳を整列させます。(b) 射手切れは脳を横切って左から右に整列する。(c)白い矢印で示される前部コミュレーションのデシテーションに合わせ。 この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図6:独立成分分析を用いた品質評価(a)安定麻酔中のシグナル成分(b) 安定麻酔中のノイズ成分(c) 不安定な麻酔この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
| スキャン | 順序 | オリエンテーション | FOV (mm x mm) | 行列 | スライス | スライス厚さ(mm) | TE (ミリ秒) | TR (ミリ秒) | 平均 | エコー間隔 (ミリ秒) | レアファクター | 繰り返し | スキャン時間 |
| ローカライザー | フラッシュ | すべての平面 | 50 | 256 | 1/dir | 1 | 2.5 | 100 | 1 | 1 | 12.8 s | ||
| ローカライザー | 珍 | すべての平面 | 35 | 192 | 1/dir | 0.75 | 28 | 2500 | 1 | 7 | 8 | 1 | 1分 |
| アナト | 珍 | 矢 状 | 35 | 192 | 15 | 1 | 28 | 2500 | 1 | 7 | 8 | 1 | 1分 |
| アナト | フラッシュ | 軸 | 35 | 192 | 23 | 1 | 5 | 250 | 2 | 1 | 1分36s | ||
| アナト | 珍 | 軸 | 35 | 192 | 23 | 1 | 28 | 2500 | 4 | 7 | 8 | 1 | 4分 |
| シム | 押す | すべての平面 | 16.223 | 2500 | 1 | 1 | 2.5 s | ||||||
| 休息状態 | エピ | 軸 | 35 | 64 | 15 | 1 | 15 | 1200 | 1 | 300 | 各6分 |
表1:スキャンパラメータの参照表 プロトコルで概説されているシーケンスのパラメータ。フラッシュ = 高速低角度ショット、レア = 緩和強化による急速な獲得、PRESS = ポイント再解決分光法、EPI = エコー平面イメージング。
補足ファイル: ICA品質評価のスクリプト例 このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。
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Discussion
動物の安定性は、物理的にも生理的にも、高品質の安静状態データを得るための鍵である。このプロトコルは、麻酔の4つの異なる段階を経ることによって安定性を達成する。動物は麻酔の次の段階に移動する前に設定された生理学的閾値を満たしていることが不可欠です;この方法は生理学的な自己調節機構に依存するので、個々の動物は麻酔段階でわずかに異なる時間を必要とするかもしれない。各段階でより多くの時間を取ることは、ラットの生理学に十分な時間を与えることなく、初期段階を急ぐよりも効率的であるという私たちの経験です。安定性を可能にする主要な部品は、ノーズコーンのフィット感と適切な廃ガス清掃です。
適切に密閉された鼻コーンと清掃は、動物が定期的に間隔を空けた呼吸と安定した酸素飽和レベルで安定したままであることを可能にする。あえぎ、不規則な間隔、息の保持、または酸素飽和レベルの低下が発生した場合、ノーズコーンシールと清掃を改善するために働く必要があります。鼻コーンは密接に収まるはずですが、鼻の橋に押し込むべきではありません。カスタムノーズコーンは、製造する必要があります。当社のメーカーのオリジナルのノーズコーンは、小さすぎるエアアウトテイクバルブを持っていたので、ハヤブサチューブは、動物に近いより大きな密閉真空ラインを取り付けました。これにより、期限切れのCO2 と安定した酸素飽和度のクリアランスが向上しました。プロトコルで述べたように、パラフィンフィルムは鼻コーンの下顎と縁に巻き付けることができますが、あまりにもしっかりと包まれると呼吸が制限され、不安定につながる可能性があります。さらに、耳の棒や咬傷バーの不適切な配置は、画像処理のために必要な頭部の安定性に影響を与えるだけでなく、呼吸にも影響を与える可能性があります。動物からの点滅または聞こえるノイズを続けると、不適切な耳棒の配置が示される可能性があります。前歯は、一口バーにしっかりと座って、しっかりとフィットを確保するために、イヤーバーの配置後に前方に引っ張られるべきです。ラットの舌は、口の中に座りすぎて適切な呼吸を制限する場合、前方に引っ張る必要があります。
各システムはユニークであるため、最適な清掃を実現するには真空レベルの微調整が必要です。実用的なガイドとして、鼻コーンの内側に開く真空ラインの上に指を置くか、または鼻コーン全体を手のひらで密閉することによって、少量の吸引を感じることができるはずです。麻酔入力の一致流量(ここでは0.8 L/分を使用)が良い出発点です。動物の酸素飽和度は、スキャン全体で95%以上に保つ必要があります。酸素飽和度が減少傾向を示している場合、これはCO2 がノーズコーンに蓄積しており、清掃を増やす必要があることを示している可能性があります。もう一つの可能性は、足のパルスオキシメータークリップの圧力を調整する必要がある、血流を改善するために緩めるか、強く、安定した信号を確保するために締め付ける必要があります。動物の呼吸が、概説された閾値よりも高い場合、これは清掃が高すぎると、あまりにも多くのイヨフルランを除去していることを示している可能性があります。まれな状況では、皮下デクスメデトミジンの用量を0.02mg / kg/ hrに増やす必要があるかもしれませんが、0.015 mg/kgはラットの年齢と男女の広い範囲にわたってうまく機能しており、薬理学的研究4でサポートされていることがわかりました。
fMRI活性化に必要なスキャン持続時間は、マーフィーららによって既に示したように、効果サイズ、空間信号対雑音比(SNR)および時間SNRの関数である。小さな表面コイル(2cm)と高磁場(9.4 T)を使用することで、SNRとBOLD感度が大幅に向上します。イメージングの設定により、1回の6分スキャンで、堅牢な休止状態機能接続ネットワークを検出するのに十分であることがわかりました。それにもかかわらず、我々は通常、スキャンを3〜4回繰り返し、個々の動物のための機能的な脳ネットワークを導出するために結果を平均する。あるいは、1回より長い時間(10分以上)で単一の時間をスキャンして、機能的な接続ネットワーク14を導き出すことができる。
このプロトコルを使用して高品質のrs-fMRIを収集した後、以前に公開された15、16のようにデータを前処理します。両方のイヤバーと一口バーを使用すると、fMRI時間コースのモーションアーチファクトは最小限であり、モーション補正の使用は、私たちのデータに顕著な影響を与えていない。個々の休息状態EPIスキャンは、頭蓋骨を剥ぎ取られ、共通の空間に登録する必要があります(我々は単一の代表的なラット脳を使用する)16,17.各EPIから開始ボリュームを取り外して、マグネットが定常状態のときに含まれるボリュームがすべて取得されるようにします(5つのタイムポイントを削除します)。個別スキャンを取り下げます(信号およびノイズコンポーネントの例については、代表的な結果を参照)。スライスタイミング補正、線形および二次トレンド除去、バンドパスフィルタリング(0.005-0.1 Hz)、空間スムージング(0.6 mm FWHM[最大半分の幅])を適用します。さらに、線形回帰を通じて、白い物質と心室から平均信号時間の経過を取り除きます。これらの標準的な前処理ステップの後、さらにグループレベルの分析は、シードベースの機能的接続性11、15、18、19、20、21、22、独立した成分分析10、20、22、およびモジュール性分析12、19を含む実行することができる。
現在のプロトコルには2つの主な利点があります:1)自発的な脳活動を可能にします。2)それはほぼ正常な生理学で動物を保ちます。代替麻酔法(例えばプロポフォール21、αクロラロース15、およびパンクロニウム臭化物を別の麻酔薬21,23と組み合わせて)も、休止状態データを取得するために使用されている。しかし、このプロトコルに記載されているように、低用量のデキスメデトミジンと低用量のイソフルランの組み合わせを使用すると、脳ネットワーク機能を最小限に破壊する一方で、質の安静状態機能接続データ9、10、18、24を得るために必要な生理学的安定性を提供することが示されている。さらに、このプロトコルを使用する場合、体性感覚刺激9および機械的ウィスカー偏向11からのBOLD応答は、90分の期間または後に見ることができ、一貫した覚醒レベルを示唆する。興味深いことに, 分離でデキスメデトミジンを使用すると、てんかん活動を引き出すことができます;;しかし、この活動は、補足されたイオブルラン8で廃止された。現在のプロトコルに別の利点は、人工換気の必要性を排除することです。機械的換気は、動物全体の部分的な二酸化炭素と酸素飽和の狭い範囲につながる可能性がありますが、縦方向の研究では、挿管を必要とせずに生理学的パラメータを維持することは、合併症や望ましくない副作用を減らすことがあります。
休息状態fMRIへの関心は過去10年間でかなり高まっており、げっ歯類から高品質の前臨床休息状態スキャンを取得する必要があります。この生存プロトコルは、安静状態の取得中にほぼ正常な生理学で最大5時間の安定した麻酔を達成する。プロトコルが非常に安定しているので、追加の配列(構造、刺激、薬理学的MRIなど)を簡単に追加して、所望の実験計画を達成することができる。このプロトコルで利用されるデキスメデトミジンと低用量イゾフルランの組み合わせは、その安静状態でげっ歯類の脳を研究することに興味を持っている研究者のための前臨床試験の多種多様を可能にします.
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Disclosures
著者らは開示するものは何もない。
Acknowledgments
この研究は、国立衛生研究所(NIH)の国立薬物乱用研究所(NIDA)からの資金提供によって支えられました[DJW、 EDKSとEMBはグラントR21DA044501によってアラン・I・グリーンに授与され、DJWはグラントT32DA037202によってアラン・J・バドニーに支えられ、国立アルコール乱用・アルコール依存症研究所(NIAAA)[グラントF31AA028413]エミリー・D・K.サリバンに支えられました。ダートマスのレイモンド・ソベル精神医学教授として、アラン・I・グリーンの寄付基金を通じて追加の支援が行われました。
ハンビン・ルーは、国立薬物乱用研究所の壁内研究プログラム(NIH)の支援を受けています。
著者たちは故アラン・I・グリーンを認め、感謝したいと考えております。共生障害の分野に対する彼の揺るぎない献身は、著者間のコラボレーションを確立するのに役立ちました。私たちは、彼の指導と指導に感謝します。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 9.4T MRI | Varian/Bruker | Varian upgraded with Bruker console running Paravision 6.0.1 software | |
| Air-Oxygen Mixer | Sechrist | Model 3500CP-G | |
| Analysis of Functional NeuroImages (AFNI) | NIMH/NIH | Version AFNI_18.3.03 | Freely available at: https://afni.nimh.nih.gov/ |
| Animal Cradle | RAPID Biomedical | LHRXGS-00563 | rat holder with bite bar, nose cone and ear bars |
| Animal Physiology Monitoring & Gating System | SAII | Model 1025 | MR-compatible system including oxygen saturation, temperature, respiration and fiber optic pulse oximetry add-on |
| Antisedan (atipamezole hydrochloride) | Patterson Veterinary | 07-867-7097 | Zoetis, Manufacturer Item #10000449 |
| Ceramic MRI-Safe Scissors | MRIequip.com | MT-6003 | |
| Clippers | Patterson Veterinary | 07-882-1032 | Wahl touch-up trimmer combo kit, Manufacturer Item #09990-1201 |
| Dexmedesed (dexmedetomidine hydrochloride) | Patterson Veterinary | 07-893-1801 | Dechra Veterinary Products, Manufacturer Item#17033-005-10 |
| Digital Rectal Thermometer Covers | Medline | MDS9608 | |
| FMRIB Software Library | FMRIB | MELODIC Version 3.15 | Freely available at: https://fsl.fmrib.ox.ac.uk/fsl/fslwiki |
| Heating Pad | Cara Inc. | Model 50 | |
| Hemostat forceps, straight | Kent Scientific | INS750451-2 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 07-893-1389 | Patterson Private Label, Manufacturer Item #14043-0704-06 |
| Isoflurane Vaporizer | VetEquip Inc. | 911103 | |
| Lab Tape, 3/4" | VWR International | 89097-990 | |
| Needles, 23 gauge | BD | 305145 | plastic hub removed |
| Parafilm Laboratory Film | Patterson Veterinary | 07-893-0260 | Medline Industries Inc., Manufacturer Item #HSFHS234526A |
| Planar Surface Coil | Bruker | T12609 | 2cm |
| Polyethylene Tubing | Braintree Scientific | PE50 50FT | 0.023" (inner diameter), 0.038" (outer diameter) |
| Puralube Ophthalmic Ointment | Patterson Veterinary | 07-888-2572 | Dechra Veterinary Products, Manufacturer Item #211-38 |
| Sprague Dawley Rats | Charles River | 400 SAS SD | |
| Sterile 0.9% Saline Solution | Patterson Veterinary | 07-892-4348 | Aspen Vet, Manufacturer Item #14208186 |
| Sterile Alcohol Prep Pads | Medline | MDS090735 | |
| Surgical Tape, 1" (3M Durapore) | Medline | MMM15381Z | 3M Healthcare, "wide medical tape" |
| Surgical White Paper Tape, 1/2" (3M Micropore) | Medline | MMM15300 | 3M Healthcare |
| Syringes, 1 mL w/ 25 gauge needle | BD | 309626 | |
| Syringes, 3 mL | BD | 309657 | |
| Vented induction and scavenging system | VetEquip Inc. | 942102 | 2 liter induction chamber with active scavenging |
| 411724 | omega flowmeter | ||
| 931600 | scavenging cube, "vacuum" | ||
| 921616 | nose cone, non-rebreathing |
References
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