Name: 一个型号的不安流致动脉粥样硬化小鼠颈动脉部分结扎术和颈动脉内皮细胞的RNA分离的简单方法 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-22T17:30:00.000+00:00
Duration: 11 min
Description: 学习小鼠颈动脉部分结扎术以诱导扰流并加速动脉粥样硬化形成，结合超声验证手术效果，并从颈动脉内膜分离高纯度内皮细胞RNA用于基因表达研究。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本工作获得了美国国立卫生研究院（NIH）基金资助，项目编号为HL87012（HJ）、HL75209（HJ）、UO1HL80711（DH、DG、HJ），以及韩国科技部和教育部世界一流大学项目（HJ）的支持。

1. 左颈动脉部分结扎
 <ol>
 <li>使用约 8 周龄的小鼠。建议小鼠体重至少为 18 克。</li>
 <li>将器械在玻璃珠灭菌器中灭菌 30 秒，然后冷却。</li>
 <li>通过腹腔（i.p.）注射 Ketamine（80 mg/kg）和 Xylazine（10 mg/kg）诱导麻醉，或使用经 IACUC 批准的其他麻醉方法。进行腹腔注射时，应将小鼠左下腹象限作为注射部位。</li>
 <li>将小鼠置于加热舱内，直至完全麻醉。通过脚趾夹捏反应确认麻醉深度。</li>
 <li>将小鼠仰卧位（腹部朝上）固定于手术台上。用胶带将前肢掌面朝上、后肢足底朝下固定于手术台。</li>
 <li>在下颌与胸骨之间的颈部区域涂抹适量脱毛剂（例如 Nair），轻轻按摩直至所有毛发被去除。</li>
 <li>清除脱毛剂残留，并在脱毛区域涂抹足量的碘伏（Betadine）。</li>
 <li>准备若干段 1 英寸长的 6-0 丝线缝合线用于结扎。每只小鼠需要两段缝合线。</li>
 <li>使用锋利的小剪刀在颈部正中做 4–6 mm 的垂直切口。需同时切开皮肤及皮下筋膜。</li>
 <li>将左侧腮腺从正中线向左推开，在气管右侧开始钝性分离。此时应能清晰辨认搏动的左侧颈总动脉。</li>
 <li>沿颈总动脉向尾侧分离，直至找到其分叉处。</li>
 <li>钝性分离分叉区域，暴露左侧颈总动脉发出的以下四条远端分支：颈外动脉、颈内动脉、枕动脉和甲状腺上动脉。这些血管（尤其是甲状腺上动脉）较为脆弱，分离时需格外小心。</li>
 <li>使用 6-0 丝线在甲状腺上动脉起始部上方结扎颈外动脉。操作时，用一把镊子从动脉下方穿过，借助另一把镊子夹取一段预先剪好的缝合线，轻柔地将缝线引过动脉下方。打结时应牢固，避免周围组织被缠入结中。若结扎位置位于甲状腺上动脉分支起点下方，则最终将导致完全性结扎，形成一种显著不同的模型。</li>
 <li>使用相同技术，以单个结扎线同时结扎颈内动脉和枕动脉。</li>
 <li>确认缝线位置正确，并检查甲状腺上动脉是否通畅。</li>
 <li>对合皮肤切口，使用少量 Tissue-Mend 封闭皮肤。</li>
 <li>将小鼠置于加热舱中直至苏醒。恢复时间通常为 30 至 60 分钟。</li>
 <li>若所用麻醉方法无法提供持久镇痛（例如吸入式异氟烷），或动物在术后 24 小时内出现痛苦表现，应立即给予单剂量的布托啡诺（Buprenorphine，0.1 mg/kg）。根据我们的经验，当手术由经验丰富的操作者完成时，麻醉所用的 Ketamine 剂量已能提供足够的镇痛效果，无需额外使用镇痛药。</li>
</ol>
2. 颈动脉超声检查
 <ol>
 <li>为验证部分结扎是否诱导了紊乱血流，应在结扎术后一天检测颈动脉血流</li>
 <li>使用异氟烷诱导麻醉——必要时可使用麻醉诱导箱</li>
 <li>将麻醉后的小鼠仰卧位放置于成像平台</li>
 <li>用胶带将小鼠四肢固定在成像平台的ECG传感器上</li>
 <li>在颈部广泛涂抹Nair脱毛（此步骤仅在结扎手术时未进行脱毛的情况下需要）</li>
 <li>插入直肠温度计以记录体温</li>
 <li>在颈部涂抹超声耦合剂</li>
 <li>首先使用B模式成像</li>
 <li>成像平面应为90度（探头上的旋钮应指向小鼠鼻部）</li>
 <li>将探头缓慢下放至小鼠颈部，直至获得图像</li>
 <li>左右移动成像平台，直至识别到气管（中线结构）</li>
 <li>识别左侧颈总动脉</li>
 <li>倾斜成像平台，使成像平面与颈动脉之间形成一定角度。角度越大，多普勒信号越强</li>
 <li>将脉冲波多普勒取样容积置于左侧颈总动脉中央</li>
 <li>根据需要使用角度校正</li>
 <li>在右侧颈总动脉重复上述测量</li>
 <li>成功的部分颈动脉结扎将导致左侧颈总动脉血流较右侧显著减少（约减少80–90%），并在舒张期出现血流方向逆转，朝向主动脉入口</li>
 <li>获得满意图像后，关闭麻醉气体，擦去小鼠身上的超声耦合剂，并解除胶带固定，将小鼠放入预热的恢复舱中</li>
</ol>
3. 颈动脉内膜RNA的分离
 <ol>
 <li>通过 CO 处死小鼠2 根据机构IACUC方案进行吸入处理</li>
 <li>用胶带将足部固定在纸巾上。</li>
 <li>从腹部到胸部顶端切开小鼠的皮肤。</li>
 <li>用一把锋利的剪刀在肋骨下方切开腹壁。</li>
 <li>用镊子提起胸骨，剪断膈肌，然后剪除外侧肋骨以暴露心脏。</li>
 <li>用剪刀剪断下腔静脉。</li>
 <li>通过左心室以含10 Units/mL肝素的生理盐水进行压力灌注（120 mmHg），持续2至3分钟，直至肺和肝脏变为苍白。</li>
 <li>切开颈部皮肤，去除所有脂肪、肌肉和结缔组织，直至暴露颈动脉。</li>
 <li>将小鼠置于解剖显微镜下。</li>
 <li>在左侧颈总动脉结扎部位下方穿刺一个小孔，用于第二次灌注。</li>
 <li>通过左心室用含有10 Units/mL肝素的生理盐水再次进行压力灌注约1分钟，确保左颈总动脉得到充分灌注。</li>
 <li>使用精细尖头镊子和小型弹簧剪，仔细清除颈动脉周围附着的外膜组织。在清理过程中注意不要挤压或牵拉颈动脉。</li>
 <li>在主动脉弓与颈动脉分叉上方的结扎点之间切断左侧颈总动脉。</li>
 <li>在右锁骨下动脉分支点与颈动脉分叉之间切断右侧颈总动脉。</li>
 <li>将颈动脉转移至含有冰冻HBSS的35 mm培养皿中。如有需要，小心去除残留的外膜周围组织。</li>
 <li>使用29G针头的胰岛素注射器（3/10 ml注射器），抽取胰岛素 150 μl 每根颈动脉使用 QIAsol 裂解缓冲液（Qiagen）</li>
 <li>小心地将针头尖端插入颈动脉的一端。</li>
 <li>用镊子夹住颈动脉和针头尖端的同时，迅速（约1秒）冲洗QIAsol裂解缓冲液（150 μl) 转移至1.5 ml离心管中（内膜洗脱液）。 </li>
 <li>用HBSS冲洗颈动脉残留物（中膜+外膜）一次，放入1.5 ml离心管中，液氮速冻。 </li>
 <li>然后使用 miRNeasy mini 试剂盒（QIAGEN）按照制造商说明书，从内膜洗脱液及冷冻保存的剩余组织中分离内膜或中膜+外膜的 RNA。</li>
 </ol>
4. 代表性结果：
我们对小鼠左侧颈总动脉进行了部分结扎，并在手术后一天进行超声检查。如图1所示，成功实施部分结扎后，在舒张期左侧颈总动脉内的血流速度降低并出现反向血流（紊乱血流）。载脂蛋白E基因敲除（KO）小鼠在接受高脂饮食的同时进行部分结扎，两周内即可在左侧颈总动脉（LCA）诱导出显著的动脉粥样硬化病变，而对侧右侧颈总动脉则无明显病变（图2）。从颈动脉内膜收集的RNA中含有内皮细胞标志基因（如PECAM-1），而不含中膜平滑肌细胞标志基因（如a-SMA）（图3）。
<img src="/files/ftp_upload/1861/1861fig1.jpg" alt="显示血管结扎、测量和血流方向的主动脉弓示意图；解剖学研究。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图1"> 图1： 颈动脉解剖结构与结扎示意图： 左侧颈总动脉（LCA）的三个分支[颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA）和枕动脉（OA）]被结扎，而甲状腺上动脉（STA）保持开放。
<img src="/files/ftp_upload/1861/1861fig2.jpg" alt="多普勒血流图显示结扎前后LCA和RCA随时间变化的流速改变。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图2"> 图2： 超声图像显示了血流速度分布，揭示部分结扎在舒张期引起LCA血流逆转（箭头所示）。结扎后RCA血流保持不变。
<img src="/files/ftp_upload/1861/1861fig3.jpg" alt="ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展；1-3周时LCA和RCA的组织学切片。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图3"> 图3： 部分结扎结合高脂饮食可快速诱导ApoE基因敲除小鼠LCA发生动脉粥样硬化。 对ApoE基因敲除小鼠进行部分结扎并喂饲高脂饮食1至3周。对LCA的冷冻切片进行Oil-Red-O染色。
<img src="/files/ftp_upload/1861/1861fig4.jpg" alt="显示PECAM-1和α-SMA表达的PCR结果；柱状图比较内膜与中膜+外膜（m+a）的表达水平。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图4"> 图4. 内膜RNA提取方法。 从假手术处理的C57BL/6小鼠右冠状动脉（RCA）和左冠状动脉（LCA）中分别获取内膜RNA及中膜+外膜（m+a）RNA。以18S作为内参，通过半定量RT-PCR (A) 和qPCR (B, C) 检测PECAM-1和α-SMA的表达。柱状图表示均值±标准误（SEM），n=3。

<ol><li>Korshunov, V. A., Berk, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-induced+vascular+remodeling+in+the+mouse%3A+a+model+for+carotid+intima-media+thickening%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).</li>
<li>Sullivan, C. J., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-dependent+remodeling+in+the+carotid+artery+of+fibroblast+growth+factor-2+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22 (7), 1100-1105 (2002).</li>
<li>Nam, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow%2C+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).</li>
</ol>

在此操作过程中，准确识别颈总动脉的所有分支（包括颈外动脉、颈内动脉、枕动脉和甲状腺上动脉）至关重要。同时，必须使用超声验证血流模式，如图所示。根据我们的经验，基于对500多只小鼠的超声研究，部分结扎手术的成功率超过90%。在进行颈动脉内膜RNA制备时，需特别注意首次灌注步骤后颈动脉的外观。如果此时发现左侧颈总动脉存在血流阻塞的迹象，建议不要将这些样本用于后续分析。

<table><tbody><tr><td>生理盐水（0.9% 氯化钠）</td><td>Baxter Internationl Inc.</td><td>2B1323</td><td></td></tr><tr><td>胰岛素注射器（3/10 ml，29G）</td><td>Tyco Healthcare, Covidien</td><td>8881600145</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Cellgro</td><td>21-023</td><td></td></tr><tr><td>miRNeasy mini 试剂盒（含 QIAzol）</td><td>Qiagen</td><td>217004</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 770 高分辨率微型成像系统</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>a.Visualsonics 770 系统 b.成像台 c.Vevo 集成导轨系统 d.小鼠用 RMV 扫描探头</td><td>或类似系统</td></tr><tr><td>6-0 丝线缝合线，无菌</td><td>Covidien</td><td>s-1172 c2</td><td></td></tr><tr><td>小型剪刀</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5675</td><td>或类似产品</td></tr><tr><td>解剖镊</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5005</td><td>或类似产品</td></tr><tr><td>Tissue Mend II</td><td>Webster Veterinary</td><td>07-856-7946</td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠颈动脉部分结扎诱导血流紊乱性动脉粥样硬化模型及颈动脉内皮细胞rna简易提取方法

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

尽管已知血流紊乱与动脉粥样硬化之间存在密切关联，但将二者直接联系的实验证据一直缺乏。我们近期采用了一种改良的小鼠颈总动脉部分结扎方法[1,2]，证明该操作可在小鼠颈总动脉中急性诱导出低流速和振荡性血流状态，这两种特征正是紊乱血流的关键表现。利用这一模型，我们首次提供了直接证据，表明紊乱血流确实可导致载脂蛋白E基因敲除（Apolipoprotein E knockout）小鼠迅速而显著地发生动脉粥样硬化[3]。我们还建立了一种从小鼠颈动脉内膜高效分离高纯度血管内皮细胞RNA的方法[3]。通过该小鼠模型及方法，我们发现，在高脂血症小鼠模型中，部分结扎可在一周内引起内皮功能障碍，随后在两周内迅速形成明显的动脉粥样斑块；至四周时，已呈现出复杂的病变特征，例如斑块内新生血管形成。这一快速in vivo该模型和内皮细胞RNA制备方法可用于确定血流依赖性调控血管生物学及疾病背后的分子机制。此外，该方法还可用于测试针对内皮功能障碍和动脉粥样硬化的各种治疗干预措施，并显著缩短研究周期。

本文描述了一种部分颈动脉结扎手术，该手术可在小鼠颈总动脉中引起血流紊乱，并在两周内导致动脉粥样硬化形成，四周围内出现斑块内新生血管。我们还介绍了一种从颈动脉内膜分离RNA的新方法，可获得高纯度的内皮细胞RNA。

小鼠颈动脉部分结扎诱导血流紊乱性动脉粥样硬化模型及颈动脉内皮细胞RNA简易提取方法

尽管已知血流紊乱与动脉粥样硬化发生之间存在密切关联，但将二者直接联系的证据一直缺乏。我们近期采用了一种改良的……

本视频演示了一种部分颈动脉结扎手术，即在麻醉小鼠中结扎外颈动脉、内颈动脉和枕动脉，以诱导血流紊乱并继发快速的动脉粥样硬化形成。手术成功通过超声成像验证，随后从小鼠安乐死后获取结扎侧与对照侧颈动脉，并提取高纯度的内皮细胞RNA。大家好，我叫Doug Na，来自佐治亚理工学院和埃默里大学生物医学工程系及心脏病学部的hon Jo实验室。大家好，我叫Amir Revan，来自JO实验室。我将演示如何通过超声验证结扎效果。我叫CHI，也来自jaw实验室。今天我将演示细胞内RNA的制备。我们将向您展示一种部分颈动脉结扎、超声检测、结扎验证以及获取高质量RNA的方法。在我们的实验室中，该方法用于研究剪切应力对动脉粥样硬化的影响。那么我们开始吧。在开始此操作之前，通过脚趾夹捏法确认八周龄小鼠由氯胺酮和赛拉嗪诱导的麻醉深度。将小鼠仰卧位固定于手术台上，用胶带将四肢掌面朝上固定在台面上。然后将后肢足底朝下用胶带固定。在小鼠颈部下方垫一块纱布作为缓冲。接着，在动物颈部从下颌至胸骨之间的区域涂抹足量的脱毛剂。轻轻按摩该区域，直至所有毛发被去除。使用棉签清除脱毛剂。然后使用一把小型锋利剪刀，涂抹足量的聚维酮碘溶液。在动物颈部中央做一个4至6毫米的纵向切口，切开皮肤及下方的筋膜。用解剖镊轻轻将左侧颈动脉从动物正中线移向左侧。用解剖镊进行钝性分离组织。观察搏动的颈总动脉。沿颈总动脉走行。定位其分叉处。仔细解剖分叉处，以暴露以下结构：左颈总动脉的四个远端分支，即颈外动脉、颈内动脉、枕动脉和甲状腺上动脉。这些血管，尤其是甲状腺上动脉，可能非常脆弱。用一把镊子从上甲状腺上方的颈外动脉下方穿过，并从另一把镊子上夹取一段约2.5厘米长的6-0丝线。轻柔地拉动缝线，使其穿过动脉下方。牢固结扎颈外动脉，注意避免结扎周围任何组织。采用相同技术，用一个结扎线结扎颈内动脉和枕动脉。通过肉眼观察确认缝线位置以及甲状腺上动脉的通畅性后，将腮腺复位，对合皮肤，并使用组织夹闭合皮肤。手术完成后，将小鼠置于加温舱内，直至其恢复意识。通常需要30至60分钟。之后可将小鼠转移至常规饲养区域。在笼底放置一些食物，因为小鼠在第一天可能会因抬爪取食而感到不适。术后第二天应给予单次剂量的丁丙诺啡以缓解疼痛。结扎术后一天。将异氟烷麻醉的动物仰卧位放置于成像台上，准备进行超声检查。将动物的四肢用胶带固定在心电图传感器上。在动物颈部涂抹超声耦合剂。整个操作过程中应持续监测动物的体温。打开计算机和成像软件。选择合适的用户和超声探头。将超声设备设置为蜂鸣模式。然后将探头的旋钮朝向小鼠的鼻部，将探头下移至小鼠颈部，直至获得图像。左右移动探头支架，直到能够识别气管。随后找到左侧颈总动脉，并倾斜成像支架，使成像平面与颈动脉之间形成一定角度。将超声从B模式切换至脉冲波多普勒模式，同时保持探头位于左侧颈总动脉的中部。使用角度校正旋钮调整角度，使角度校正线与颈总动脉平行。通过按下图像冻结按钮获取图像。将记录颈总动脉内血液的流速剖面。预期在舒张期流速剖面会出现反转。为进行比较，需在右侧颈总动脉重复上述步骤。右侧颈总动脉的血流速度将更高，且无反向血流。获得满意的图像后，关闭麻醉装置，并擦去小鼠身上的超声耦合剂。解除固定小鼠的胶带束缚。将动物放入预热的恢复箱中。吸入异氟烷麻醉后的恢复通常在五分钟内发生。使用剪刀将经二氧化碳安乐死的小鼠固定在纸巾上。从腹部到胸腔顶部剪开小鼠的皮肤。然后使用锋利的剪刀，在镊子的辅助下，从肋骨下方剪开腹壁。提起胸骨并剪断膈肌。剪除肋骨以暴露心脏。接着使用蝶形灌注装置，从左心室灌注含有每毫升10单位肝素的生理盐水，持续2至3分钟，直至肺和肝脏变为苍白。生理盐水灌注后，切开颈部皮肤，去除所有脂肪、肌肉和结缔组织，直至暴露颈总动脉。现在将小鼠置于解剖显微镜下，使用29号针头在左侧颈总动脉结扎部位下方刺一个小孔，用于第二次灌注。通过左心室再次进行加压灌注，持续约一分钟，确保第二次灌注后左侧颈总动脉得到充分灌注。使用尖头镊子和小型弹簧剪，仔细去除颈总动脉周围残留的外膜组织。在此清洁步骤中，注意不要挤压或拉伸颈动脉分叉上方结扎点与主动脉弓之间的部分。在右侧锁骨下动脉分支点与颈动脉分叉之间剪断左侧颈动脉，然后剪断右侧颈动脉。将颈动脉转移至含有冰冷 HBSS 的 35 毫米培养皿中。仔细清除残留的外膜周围组织。将带有 29 号针头的胰岛素注射器插入颈动脉一端，并用镊子夹住颈动脉及针尖部分。快速且小心地操作。用150 µL Cazo裂解缓冲液冲洗每侧颈动脉，将收集的缓冲液置于标记为intima eit的1.5 mL离心管中。最后，用HBSS冲洗每侧颈动脉一次。然后将其放入已标记为“培养基加外膜”的1.5毫升微量离心管中，并迅速在液氮中速冻。随后可使用gin's从冷冻样品中提取RNA。Micro RZ mini试剂盒。如图所示，在对小鼠左侧颈总动脉进行部分结扎后一天，对其进行超声检查。成功的部分结扎可降低左侧颈总动脉的血流速度，并在舒张期引起血流反向。在高脂饮食条件下，对APOE基因敲除小鼠进行部分结扎后两周内，可在左侧颈总动脉诱导出显著的动脉粥样硬化病变，而对侧右侧颈总动脉则无此现象。动脉粥样硬化病变通过油红O染色显示脂质沉积，细胞核则用苏木精复染显示。从颈动脉内膜收集的 RNA 含有内皮细胞标志基因，例如 pcam1，以及中膜平滑肌细胞标志基因。从其余动脉组织（标记为 m+a，即中膜加外膜）收集的 RNA 中则不存在 alpha SMA 等基因，但存在平滑肌细胞标志基因，而内皮细胞标志基因缺失。我们刚刚向您展示了如何进行部分颈动脉结扎操作。使用超声检查来验证结扎效果，同时该方法也可用于内膜RNA的分离。在进行此操作时，准确识别颈总动脉的分支至关重要，并需确保仅保留甲状腺上动脉的分支模式，而其他分支则被严密结扎。在操作过程中，使用超声验证结扎结果非常重要。在简单的制备过程中，应注意使灌流的导管仅与动脉管腔接触，避免接触动脉的其他任何部分。就此结束，感谢观看，祝您的实验顺利成功。

a-model-disturbed-flow-induced-atherosclerosis-mouse-carotid-artery

Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

一个型号的不安流致动脉粥样硬化小鼠颈动脉部分结扎术和颈动脉内皮细胞的RNA分离的简单方法

本文介绍的缩窄套管旨在诱导小鼠颈总动脉发生动脉粥样硬化。由于其内腔呈锥形结构，植入后的套管可产生明确的低、高及振荡剪切应力区域，从而触发具有不同炎症表型的动脉粥样硬化病变的形成。...

小鼠颈动脉套管植入以诱导剪切应力介导的动脉粥样硬化

本文描述了一种小鼠颈动脉支架植入模型。与其他类似方法相比，该手术操作极为快速、简便且易于实施，能够方便地研究血管壁对不同药物洗脱支架的反应以及再狭窄的分子机制。...

用于研究再狭窄的颈动脉支架植入小鼠模型

我们介绍一种手术技术，该技术可在小鼠股动脉中制造钢丝损伤，以诱导内膜增生，从而建立一个用于测试经血管周围递送治疗性化合物以抑制再狭窄的模型系统。...

股动脉导丝损伤联合血管周围药物递送贴片植入的小鼠模型

本研究描述了一种在小鼠中诱导加速动脉粥样硬化的侵入性操作方法。与使用电损伤或冷冻损伤的其他方法相比，机械性损伤更接近人类血管重建治疗后发生再狭窄的病理状况，因此非常适合用于研究相关分子机制。...

小鼠加速动脉粥样硬化诱导：“导丝损伤”模型

了解动脉去内皮损伤后重新内皮化过程的细胞和分子机制，对于预防动脉血栓形成和再狭窄至关重要。本文介绍了一种可重复的肾下腹主动脉去内皮损伤造模方案。该方法旨在利用小鼠模型研究调控内皮再生的潜在机制。...

通过小鼠肾下腹主动脉夹闭实现可重复的动脉去内膜损伤

我们介绍一种方法，用于从暴露于稳定或扰动血流条件的小鼠颈动脉管腔中分离内皮细胞和细胞核，以进行单细胞组学实验。...

从小鼠颈动脉管腔中分离内皮细胞用于单细胞多组学实验

本方案描述了一种在小鼠中诱导压力超负荷性心肌肥厚的新型主动脉缩窄技术。该方法采用内径固定的橡胶环进行缩窄。这一新技术有望在未来实验中提供更小的变异性和更可重复的数据。...

O形环主动脉缩窄术与传统横行主动脉缩窄术在建立压力超负荷诱导心肌肥厚模型中的比较

本文介绍了一种两步细胞消化方案，用于制备小鼠颈动脉的单细胞悬液。...

小鼠颈动脉单细胞悬液制备用于单细胞测序

本方案介绍了一种通过单次手术操作在小鼠模型中诱导颈动脉瘤的标准外科方法。...

一种颈动脉瘤形成的鼠类模型

本研究旨在开发一种在小鼠动脉中实现止血的有效方法。...

小鼠动脉止血的简便有效操作步骤

学习小鼠颈动脉部分结扎术以诱导扰流并加速动脉粥样硬化形成，结合超声验证手术效果，并从颈动脉内膜分离高纯度内皮细胞RNA用于基因表达研究。

小鼠颈动脉部分结扎诱导血流紊乱性动脉粥样硬化模型及颈动脉内皮细胞RNA简易提取方法

探索更多视频