链脲佐菌素治疗:1 型糖尿病斑马鱼模型

- 1 型糖尿病是一种人类疾病，免疫系统会破坏胰岛素，从而在胰腺中产生 β 细胞。链脲佐菌素可在斑马鱼中诱导 1 型糖尿病。首先，在 2-苯氧乙醇的鱼水中溶液中麻醉鱼。取鱼，放在培养皿上，腹侧朝上。根据每克鱼的重量 0.35 毫克计算链脲佐菌素的剂量，并在盐水溶液中稀释。

通过在斑马鱼腹侧的骨盆带下方腹膜内注射链脲佐菌素。链脲佐菌素在结构上类似于 N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖是一种结合胰腺 β 细胞上的 GLUT2 受体的配体，导致胰岛素分泌。因此，链脲佐菌素与胰腺 β 细胞上存在的 GLUT2 受体结合，胰腺 β 细胞将其运输到细胞内。

进入 β 细胞后，链脲佐菌素会触发免疫反应，导致自身抗原的释放。自身抗原导致免疫系统将 β 细胞识别为外来细胞并破坏它们，从而导致胰岛素水平降低。在第 3 天和第 5 天重复服用链脲佐菌素，然后每周给药，每 7 天服用一次，以维持免疫反应。

在以下示例中，我们将生成 1 型糖尿病的斑马鱼模型。要生成患有糖尿病的斑马鱼，请准备一个装有普通鱼水的回收罐和一个装有 1 至 1,000 稀释 2-苯氧乙醇的鱼水麻醉罐。在通风橱下，通过将 6 毫克 STZ 添加到 2 毫升 0.09% 氯化钠中，制备 0.3% 链脲佐菌素或 STZ 溶液，并立即将溶液置于冰上。

在单独的试管中，分装足够的盐水用于对照鱼。用 STZ 或对照溶液填充配备 27 和 1/2 号针头的半 CC 注射器，确保没有气泡滞留。将一条鱼放入麻醉水中，等待游泳动作停止，大约一到两分钟，以麻醉它。

麻醉后，将鱼短暂地放在纸巾上以吸收多余的水分。然后，将鱼放入称重船中称重。接下来，将鱼放在坚硬的表面上。然后将针头穿过斜面插入腹侧腹膜的后部，并将每克 STZ 或同等体积的对照溶液注入鱼的腹膜腔。

注射后，将鱼放入回收水箱中并监测其是否正常游泳。注入足够的鱼进行实验后，将它们转移到正常的活鱼缸中并保持在 22 至 24 摄氏度的温度下。降低的温度对于有效诱导高血糖至关重要。为了诱导长时间的极高血糖状态，请遵循在诱导阶段频繁注射的时间表，然后每周维持注射，如图所示。