实验性黑色素瘤转移小鼠模型:研究黑色素瘤细胞肺转移潜能的平台

0 次观看3:52 分钟 • April 30th, 2023

— 实验性转移模型有助于评估肿瘤细胞在经血管内注射后,从血管中迁移至特定部位并增殖的能力。首先,使用适当的培养基将黑色素瘤细胞制备成所需浓度的单细胞悬液。将该悬液装入注射器中。

接下来,将小鼠固定在固定装置中,确保其尾巴可被触及。将小鼠旋转90度以观察其侧尾静脉。使用加热灯提高环境温度,使尾静脉扩张。随后,将针头朝向尾巴远端插入,并将制备好的黑色素瘤细胞悬液注入扩张的静脉中。

注射的转移性肿瘤细胞通过循环系统迁移。最终,其中一些细胞从循环系统中逸出,进入肺等远端器官。这些肿瘤细胞适应新的微环境,增殖并形成实验性转移灶。

在以下实验方案中,我们将演示将B16-BL6黑色素瘤细胞通过尾静脉注射到小鼠模型中,以研究其转移潜能。

— 准备好所有 B16-BL6 细胞悬液后,选择一只小鼠。抓住其尾巴,将动物尾部朝前引导进入固定器。当小鼠躯干进入固定器主腔且尾巴位于装置外时,继续将动物拉向固定器末端。

接下来,插入固定器推杆并继续推动推杆,直至小鼠被牢固固定。动物固定到位后,将小鼠旋转90度,使一侧的侧尾静脉朝上。然后,使用酒精棉片用力擦拭小鼠尾部静脉最清晰可见的一侧。

注射前,首先用注射器吸取300微升浓度为每毫升50万个细胞的悬液。随后,将注射器倒置,轻弹其侧壁并推动推杆,以排出其中的气泡。待气泡完全排出后,挤出部分细胞悬液,使注射器内最终体积为250微升。

用非惯用手拉直小鼠尾巴。固定时,用食指托起尾巴近端,拇指按压远端。用惯用手将针头以微小的向下角度朝尾巴远端刺入尾静脉,然后继续推进针头,并调整针头方向,使其与尾静脉的角度保持一致。

将针头插入尾静脉约1厘米后,在固定注射器的同时开始推动推杆。用纱布按压穿刺部位以止血。待细胞悬液完全注射完毕后,将针头从静脉中取出并丢弃。随后,从固定器上取下推杆,将小鼠放入接收笼中。