利用磁共振成像，容积电脑断层扫描及超音波的裸鼠乳腺癌骨转移大鼠模型血管生成的多模态成像

该实验使用互补成像技术对乳腺癌大鼠模型中的血管生成进行无创评估。骨转移首先将人乳腺癌细胞注射到上腹浅动脉中，以诱导裸鼠后腿的部位特异性溶骨性骨转移。25 至 30 天后，准备动物进行成像分析，并通过磁共振成像、计算机断层扫描和超声扫描获取数据。

接下来，使用来自这些成像模式的互补形态和功能数据来描述溶骨性病变中血管形成的不同方面。获得的结果包括大血管结构、局部血容量、灌注和通透性，以及骨转移中血管形成的实时成像。这些方法可以帮助回答有关血管生成在骨转移发病机制中的作用的关键问题，这对恶性骨病变的影像学和治疗有影响。

对于此处描述的动物模型，无需使用 N-D-A-M-B 2 3 1 骨特异性亚细胞系，因为肿瘤摄取率超过 90%从 RPMI 1640 中人乳腺癌细胞的对数培养开始。培养基补充有 10% 胎牛血清。用胰蛋白酶收获亚汇合肿瘤细胞后，使用 neubauer 室计数细胞并将它们悬浮在 RPMI 1640 中，所有实验均由负责的政府动物伦理委员会批准麻醉 6 至 8 周龄大鼠，如外科手术所附文本中给出。

使用放大倍数为 16 倍的合适双目手术显微镜。首先以 2 到 3 厘米的长度切割不dual 区域的皮肤和皮下组织。现在解剖所有从股动脉分支出来的动脉，将夹子夹在 S CA 起点近端的股动脉上，以及 DGA、PA 和 S SA 上，以暂时阻塞局部血流。

然后在其远端部分结扎 SEA，以允许该血管张开而不会出血。切开结扎近端的 SEA，并将 1% pipen 溶液施用到 SEA 上。现在，用剪刀剪下大约一半的 s e 直径，然后用镊子握住容器的切割端，将针插入管腔。

如果可能，将针头固定在外部装置中，以减少可能导致血管壁穿孔的不规则运动。然后将注射器连接到针头上。从股远端动脉上取下夹子，并将其放在大隐动脉上。

继续将 O 0.2 毫升 MDA MD 2 31 乳腺癌细胞缓慢注射到上腹浅动脉中。请注意，通过剪辑，单元格被定向到 DGA 和 pa。取下针头并结扎上浅上腹动脉以防止出血，然后再取下动脉夹。

闭合伤口并终止吸入麻醉后，允许动物的肿瘤生长 25 至 30 天。使用专用的实验 MR 扫描仪或带有适当动物线圈的人类 MR 系统，例如这种自制线圈，用于射频激励和检测。用氧气和 ISO 氟麻醉大鼠后，在尾静脉中放置导管并将其固定在尾部。

使用胶带连接含有造影剂的注射器。然后将大鼠置于 MR 系统中，保持吸入麻醉。从形态学 MR 序列开始，以定位骨转移。

接下来，确定直径最大的骨转移切片，并在大约 30 秒后开始 D-C-E-M-R-I 序列。在 10 秒的时间内开始注射造影剂。选择合适的 CT 系统，人体扫描仪或实验扫描仪。

在这里，我们使用配备平板的体积计算机断层扫描机的原型。用氧气和异氟麻醉大鼠后，在尾静脉中放置导管，并用胶带将其固定在尾巴上。然后连接含有造影剂的注射器。

现在将大鼠在吸入和麻醉下放在扫描仪上。设置 VCT 的扫描参数。为此，有几种实验和临床超声系统可用。

用氧气和异氟麻醉大鼠后，在尾静脉中放置导管，并用胶带将其固定在尾巴上。然后连接含有微泡造影剂的注射器。使用三脚架将超声换能器固定在相应的后腿上，并在换能器和后腿之间涂抹超声凝胶。

接下来，执行 B 模式成像传输。为了确定骨转移的最大直径并将换能器固定在该位置，请在 B 模式图像上添加多普勒信号以获取有关组织灌注的信息。请记住，只有破坏皮质骨的病变才能被超声波触及。

对于动态对比增强超声，将超声设备设置为节奏，对比脉冲排序模式，注入微泡并记录 90 秒长度的循环。处理来自 M-R-I-V-C-T 和超声的形态学信息，以表征软组织肿瘤和骨转移的骨骼破坏。然后使用 DICOM 查看器确定骨转移的位置和体积进行血管造影。

使用 eRx DICOM 查看器，考虑 VCT 数据以获得骨转移中血管的分支模式。使用动脉期信息重建 2D 或 3D 图像，使用或不使用减法技术。为了量化 D-C-M-R-I-D-C-E-V-C-T 和 DCE 超声的血管形成功能参数，使用特定于每种模式的软件工具。

对于 D-C-E-M-R，我使用 Dyna Lab 来确定与血容量相关的血管参数以及与骨转移中灌注和血管通透性相关的交换速率常数。要定量 D-C-E-V-C-T 数据，请对数据进行描述性分析以计算曲线下面积或峰增强等参数。还可以通过分析电影循环，使用定量分析软件量化来自实时 DCE 超声的信息 根据实施的推注注射模型位置，骨转移上的感兴趣区域决定了描述性因素，例如曲线下面积或来自彩色编码图的定量参数。

将 M-D-A-M-B 2 31 细胞动脉内注射到 SEA 中，用于在裸鼠的相应后腿中产生部位特异性骨转移。该图显示了股动脉的分支模式，包括上腹浅动脉降支、腘动脉和大隐动脉。动脉夹放置在 sa、PA 和近端 fa，以及 SEA 的结扎。

然后在结扎的近端切开 SEA，添加 papine 后，使用镊子放松血管壁的肌肉。切开 SEA，并使用针头的外部固定装置将针头插入 SEA。人乳腺癌肿瘤细胞通过 SEA 注射并直接进入 DGA 和 pa。

由于仅限于股骨的夹式溶骨病变，胫骨和腓骨可以在注射后约 25 至 30 天开始通过 M-R-I-V-C-T 和超声进行无创成像，并随访数周。所有三种成像方式都可以在同一只大鼠中依次使用。MRI 显示骨转移性软组织的形态，最初局限于骨髓腔，随后在发育过程中超过皮质骨。

在这些轴向切片中，T 两个加权 MR 图像显示骨转移的软组织部分，D-C-E-M-R-I 彩色图显示病变骨结构内的振幅 A 和交换速率常数值，特别是，转移的溶骨变化通过补充 MRI 结果的 VCT 以高分辨率评估， 溶骨性病变位于髓内肿瘤生长附近。VCT 血管造影显示骨转移的大血管结构改变，D-C-E-V-C-T 显示由于转移性病变中皮质骨局部破坏而导致的微循环的相应方面。超声适用于通过使用 B 模式和多普勒技术评估软组织肿瘤的形态和功能特征。

应用微泡后，DCE 超声允许对骨转移中的血管形成进行实时成像。看完这个视频后，您应该对如何接种肿瘤细胞进行部位特异性乳腺癌、骨转移，以对这些病变中血管生成的形态和功能方面进行成像。非侵入性。