Journal
/
生物学
/
טיהור של מכלולי Native לחקר מבני בשיטת תג טנדם זיקה
JoVE 杂志
生物学
需要订阅 JoVE 才能查看此.  登录或开始免费试用。
JoVE 杂志 生物学
Purification of Native Complexes for Structural Study Using a Tandem Affinity Tag Method
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

טיהור של מכלולי Native לחקר מבני בשיטת תג טנדם זיקה

DOI:
10.3791/54389-v

•

10:36 min

•

July 27, 2016

•

,
1Department of Biochemistry,Brandeis University, 2Winship Cancer Institute,Emory University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:38Harvesting S. cerevisiae Cells
  • 01:44Lyse Cells and Lysate Clarification
  • 04:43Resin Equilibration and Binding and On Column TEV Cleavage
  • 06:47Packing and Eluting from Calmodulin Resin
  • 08:20Results: TAP Purification of U1 snRNP Complex in S. cerevisiae
  • 09:55Conclusion

Summary

自动翻译

自动翻译

The Tandem Affinity Purification (TAP) method has been used extensively to isolate native complexes from cellular extract, primarily eukaryotic, for proteomics. Here, we present a TAP method protocol optimized for purification of native complexes for structural studies.

Tags

Native Macromolecular ComplexPurificationTandem Affinity TagStructural StudyS. CerevisiaeCell LysisLiquid NitrogenCoffee GrinderCentrifugationBuffer ConditionsProtein Complex

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

טיהור ויזואליזציה של שפעת מכלולים Ribonucleoprotein ויראלי

בידוד טיהור תסיסנית נוירונים היקפיים על ידי מיון ביד מגנטי

ניתוח מערכות חלבון גדול על ידי ספקטרומטריית מסה מבנית

ג'ל כחול Native polyacrylamide אלקטרופורזה (BN-PAGE) עבור ניתוח של מתחמי multiprotein מ lysates נייד

חלבון טיהור אורתוגונלית בהנחיית תג זיקה קטנים Bispecific

זיהוי שותפים חלבון אינטראקציה באמצעות טיהור טנדם זיקה

זיהוי של קומפלקסי חלבונים ב<em> חיידקי Escherichia</em> באמצעות טיהור זיקת פפטיד סדרתית בשילוב עם טנדם המוני ספקטרומטריית

טיהור תפוקה גבוהה של חלבונים רקומביננטי זיקה מתויגת-

GST-טיהור: שני שלבי זיקה טיהור פרוטוקול מניב חלבונים מטוהרים באורך מלא

שיטה ללא טיהור חלבונים של קביעת זיקה מחייבת ידי thermophoresis Microscale

Read Article