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Na Vivo Detecção e análise de SUMOylation de proteína Rb em células humanas
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JoVE 杂志 生物学
In Vivo Detection and Analysis of Rb Protein SUMOylation in Human Cells

Na Vivo Detecção e análise de SUMOylation de proteína Rb em células humanas

DOI:
10.3791/56096-v

•

09:40 min

•

November 02, 2017

•

, , ,
1Department of Ophthalmology,Eye and ENT Hospital of Fudan University, 2Shanghai Key Laboratory of Visual Impairment and Restoration,Fudan University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:54Cell Culture and Cell Cycle Synchronization
  • 03:18Immunoprecipitation of Endogenerous Rb Protein
  • 06:12Analysis of 6XHis-tagged Exogenous Rb SUMOylation in Human Cells
  • 08:20Results: Detection of Both Endogenous and Exogenous Rb SUMOylation
  • 09:08Conclusion

Summary

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Família proteínas pequenas relacionadas à ubiquitina modificador (SUMO) são conjugadas aos resíduos de lisina das proteínas alvo regular de vários processos celulares. Este artigo descreve um protocolo para a detecção da proteína do retinoblastoma (Rb) SUMOylation sob condições endógenas e exógenas em células humanas.

Tags

Rb Protein SUMOylationIn Vivo DetectionHuman CellsSUMO ConjugationCell SynchronizationG1 PhaseS PhaseG2/M PhaseHEK293 CellsCell Cycle AnalysisFlow CytometryRIPA Lysis

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