改进脂褐素模型和高极化人视网膜色素上皮培养物中外段吞噬能力的定量

虽然脂褐素随着年龄的增长普遍积累在RPE中，但辨别其毒性一直很困难。在这里，我们开发了协议，使我们能够在高度极化和成熟的RPE培养物中发展脂褐素样积累，以帮助识别脂褐素对RPE生理学的影响。研究人类脂褐素的毒性被脂褐素随着RPE死亡而减少的事实所混淆。

脂褐素毒性的动物模型具有截然不同的结果。我们精心创建了脂褐素样物质积累的体外模型，以促进脂褐素毒性的研究。我们的模型成功的关键是保持高度分化的培养物，同时通过体内触发脂褐素的相同过程诱导脂褐素发生，即感光器外段的吞噬作用。

我们的体外方案是独一无二的，因为脂褐素样材料在RPE培养物中积累，这些培养物高度分化以忠实地模拟体内RPE。在这些情况下，我们发现RPE培养物对脂褐素积累和脂褐素的毒性作用具有高度抗性。此外，在我们的RPE培养物中脂褐素样积累诱导的表型测定过程中，我们创造了一种称为总消耗容量的新型吞噬作用测定。

该测定使我们能够确定RPE吞噬外段的全部能力，同时避免经典脉冲追逐吞噬测定带来的一些混淆解释。我们很高兴能够利用这种脂褐素样物质积累模型来更好地了解RPE应激源可能使正常惰性脂褐素在RPE细胞死亡中发挥更病理作用。