Visualisierung cyanobakterieller extrazellulärer Vesikel mittels Transmissionselektronenmikroskopie

Legen Sie ein mit Polyvinyl, formalem Kunstharz beschichtetes Transmissionselektronenmikroskopie- oder TEM-Gitter auf eine saubere Kunststofffolie.

Geben Sie eine Suspension aus konzentrierten und gereinigten extrazellulären Vesikeln oder EVs, nanosierten, membrangebundenen Partikeln, auf das Gitter.

Diese EVs werden von Cyanobakterien sezerniert und tragen Makromoleküle in ihren Membranen.

Inkubieren Sie das Gitter, damit die Elektrofahrzeuge an seiner harzbeschichteten Oberfläche adsorbieren können.

Berühren Sie den Gitterrand mit einem sauberen Filterpapier, um die überschüssige Suspension aufzusaugen.

Schweben Sie das Gitter auf Uranylacetat, um die anhaftenden Vesikel zu färben.

Uranylacetat umgibt die Vesikel und erzeugt einen dunklen Umriss, der den Kontrast während der Bildgebung erhöht.

Entfernen Sie das Gitter und verwenden Sie Filterpapier, um den überschüssigen Fleck aufzusaugen.

Waschen Sie den Rost mit Reinstwasser, um alle Fleckenreste zu entfernen. Wiederholen Sie den Waschgang und lassen Sie ihn dann an der Luft trocknen.

Visualisieren Sie abschließend die Elektrofahrzeuge mithilfe von TEM, um ihre Morphologie, Größe und Reinheit zu beurteilen.

Tragen Sie vorsichtig fünf Mik