Gewinnung von primären Eierstockkrebszellen aus festen Proben: Eine Methode zur Kultivierung von epithelialen Eierstockkrebszellen aus Eierstocktumorproben

Epithelzellen, die sich auf der äußeren Oberfläche des Eierstocks befinden, können sich bösartig in Krebszellen verwandeln, die zu Eierstocktumoren heranwachsen können.

Um diese epithelialen Eierstockkrebszellen oder EOCs zu isolieren, beginnen Sie damit, eine Eierstocktumorprobe zu entnehmen und sie in kleine Stücke zu zerkleinern. Die zerkleinerten Stücke werden in ein Röhrchen überführt, das einen Verdauungspuffer enthält, der mit dem gewünschten Proteaseenzym ergänzt ist.

Diese Proteasen bauen die extrazellulären Matrixproteine im Gewebe ab und setzen EOC-Zellen, Erythrozyten und einige dissoziierte Fibroblasten in Suspension frei.

Filtrieren Sie den Zellschlamm durch ein Sieb, um die suspendierten Einzelzellen von undissoziierten Gewebestücken zu trennen. Zentrifugieren Sie die Suspension, um die EOC-Zellen, Erythrozyten und Fibroblasten zu pelletieren. Entsorgen Sie den enzymhaltigen Überstand.

Resuspendieren Sie das Zellpellet in ein epitheliales Wachstumsmedium und überführen Sie es in eine Kulturschale. Inkubieren Sie die Kultur, damit sich die EOC-Zellen und Fibroblasten an den Boden der Schale anheften können, während die Erythrozyten im Medium schwimmen.

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