0 Aufrufe • 4:51 Min. • July 8th, 2025
Die Aortenklappe des Herzens ist eine dreiteilige Struktur, die aus den interstitiellen Zellen der inneren Klappe (VICs) besteht, die in der dichten extrazellulären Matrix verteilt sind, und den darüber liegenden Endothelzellen der Klappe oder VECs.
Um VICs zu isolieren, bereiten Sie zunächst eine euthanasierte Maus in Rückenlage vor. Legen Sie durch den Schnitt in der Mittellinie des Bauches und der Brust das Herz frei. Machen Sie einen kleinen Schnitt zwischen dem linken Vorhof und dem Ventrikel, gefolgt von einer Kochsalzperfusion, um das Blut abzulassen. Durchtrennen Sie die aufsteigende Aorta auf Höhe des Aortenbogens und entnehmen Sie das Herz.
Transezieren und verwerfen Sie die distalen zwei Drittel der Ventrikel, bevor Sie den restlichen Teil des Herzens in Längsrichtung präparieren, um die "U-förmigen" Aortenklappensegel freizulegen. Die Packungsbeilage herausschneiden und mit gekühltem Puffer abspülen, um Blut zu entfernen.
Behandeln Sie anschließend die Segel mit niedrig konzentrierter Kollagenaselösung und inkubieren Sie. In geringen Konzentrationen baut die Kollagenase - ein proteolytisches Enzym - die extrazelluläre Matrix nur teilweise ab und löst Oberflächen-VECs au
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