Generierung eines dreidimensionalen Sphäroidmodells der Tumorzellinvasion

Nehmen Sie eine Kultur von menschlichen Hirntumorzellen.

Behandeln Sie mit einem Dissoziationsenzym, um Zellverbindungen zu stören und aggregierte Zellen zu trennen.

Wasche mit einem Puffer, um die Enzymaktivität zu stoppen, und füge dann ein Kulturmedium hinzu, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten.

Führe Methylcellulose ein, ein Suspensionsmittel.

Übertragen Sie die Suspension in eine Mikroplatte mit rundem Boden und inkubieren Sie.

Die viskose Methylcellulose hält die Zellen in der Schwebe und fördert Zell-Zell-Interaktionen für die Aggregation zu Sphäroiden.

Mische die Sphäroide mit einer Kollagenmatrix, die die physiologische extrazelluläre Umgebung nachahmt.

Übertragen Sie die Suspension in eine Mikroplatte und inkubieren Sie, damit die Matrix ein Gel bilden kann, das die Sphäroide einschließt.

Füge das Wachstumsmedium auf das Gel hinzu.

An der sphäroiden Peripherie verlieren Tumorzellen die Zell-Zell-Adhäsion und nehmen einen invasiven Phänotyp an.

Diese Zellen sezernieren Proteasen, um die Matrix abzubauen, Vorsprünge zu erweitern, um sich zu verankern, und bewegen sich vorwärts, indem sie in die Matrix eindringen.

Das Sphäroidmodell, das eine Tumorinvasion zeigt, ist bereit f