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Beginnen Sie mit einem herausgeschnittenen Hirngewebe der Maus, das Thromben oder Blutgerinnsel in den zerebralen Blutgefäßen enthält.
Die Thromben werden mit einer Nahinfrarot-Fluoreszenz- oder NIRF-Sonde markiert, die während der Thrombusreifung kovalent an Fibrinstränge bindet.
Legen Sie das Hirngewebe in einen Nahinfrarot-Imager und positionieren Sie die Basis des Gehirns oder die Bauchseite nach oben, um den Thrombus in den großen Hirnarterien abzubilden.
Wenden Sie Nahinfrarotlicht an das Hirngewebe an, das die NIRF-Sonde im markierten Thrombus anregt.
Bei der Anregung emittiert die Sonde Licht mit einer längeren Wellenlänge.
Dies führt dazu, dass der Thrombus fluoresziert und vor einem dunklen Hintergrund hell erscheint, wodurch die Interferenz durch das umgebende Gewebe minimiert wird.
Als nächstes drehen Sie das Hirngewebe um und bilden die dorsale Seite des Gehirns ab, um den Thrombus in den kleinen kortikalen Blutgefäßen sichtbar zu machen.
Dies gewährleistet eine vollständige Visualisierung des Thrombus im Hirngewebe mit hohem Kontrast.
Um den Thrombus durch Ex-vivo-Nahinfrarot-Bildgebung sichtbar zu machen, legen Sie das herausgeschnittene Hirngewebe mit der Basis nach oben in den Imager. Erhalten Sie Bilder der fluoreszenzmarkierten Thromboembolien in den Arterien des Circle of Willis. Positionieren Sie dann das Gewebe mit dem Scheitel nach oben und bilden Sie die kortikalen Thromboembolien ab.
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