Vorbereitung der segmentierte Mikrotubuli auf Anträge von der Demontage Microtubule Ends Driven Studieren

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments ist es, die Bewegungen von Proteinmolekülen und proteinbeschichteten Kügelchen mit den Enden depolymerisierender Mikrotubuli zu untersuchen. Dies wird durch die Montage einer wiederverwendbaren Durchflusskammer mit einem sauber dimensionierten Abdeckglas erreicht. Als nächstes werden Mikrotubuli-Samen vorbereitet, die auf dem Deckglas befestigt sind, und zur Keimbildung von Mikrotubuli verwendet, die dann vorübergehend mit photozerstörbaren Kappen stabilisiert werden.

Dann werden GFP-markierte Proteine oder proteinbeschichtete Kügelchen in die Durchflusskammer eingeführt und binden an segmentierte Mikrotubuli. Die Depolymerisation der Mikrowanne wird dann durch Entfernen der Kappen durch Photoablation ausgelöst. Die Bilder werden mit CH analysiert, um festzustellen, ob die markierten Proteine ein Tip-Tracking-Verhalten aufweisen, d. h. eine Bewegung mit den Enden depolymerisierender Mikrotubuli