Cavernosus Nervenstimulation und Aufzeichnung der Intrakavernose Druck in eine Ratte

Die übergeordneten Ziele dieser Methode sind die Beschreibung einer vereinfachten Operationstechnik der Kanülierung des Penis zur intrakavernösen Druckaufzeichnung und der Dissektion und Isolierung des Nervus cavernosus zur Elektrostimulation. Dieses experimentelle Protokoll kann verwendet werden, um die Pathophysiologie der erektilen Dysfunktion zu untersuchen und neue Therapien zu testen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie reproduzierbar, schnell und zuverlässig ist.

Es hat die wichtigsten Fallstricke, die in diesem Tutorial beschrieben wurden, behoben und beseitigt. Obwohl diese Methode Einblicke in die erektile Dysfunktion geben kann, ist die Isolierung des Nervenelektrodenkomplexes mit biokompatiblem Silikonkleber auf die Elektrostimulation jedes peripheren Nervs anwendbar und ermöglicht physiologische Tests anderer Organe. Um diesen Eingriff zu beginnen, rasieren Sie nach der Betäubung des Tieres die untere Hälfte des Bauches und des Perineums.

Schrubben Sie das Tier abwechselnd dreimal mit 70% Alkohol und Povidon-Jod. Legen Sie die Ratte danach in Rückenlage auf eine beheizte Operationsunterlage. Tragen Sie Salbe auf die Augen auf und halten Sie die Ratte über einen Nasenkegel mit 2,5% Isofluran betäubt.

Führen Sie dann den gesamten chirurgischen Eingriff unter einem Operationsmikroskop auf einem Tuch durch. Machen Sie anschließend einen einen Zentimeter langen Hautschnitt von fünf Millilitern lateral der Mittellinie, beginnend auf Höhe der Penisbasis und nach unten. Trennen Sie die Faszien seitlich des Hodensacks vorsichtig mit einem Wattestäbchen.

Nach dem Präparieren der Faszie ziehen Sie mit einem Paar Retraktoren die Hautränder und den Hoden zurück und lokalisieren den Sitzbeinhöcker durch Abtasten mit einem Wattestäbchen. Präparieren Sie das Fettgewebe medial, bis der Musculus ischiocavernosus sichtbar ist. Verwende eine Pinzette, um den Muskel in Längsrichtung zu trennen und die Tunica albuginea freizulegen.

Die Tunica albuginea erscheint als strahlend weiße Struktur. Führen Sie nach der Kalibrierung der Systemeinstellungen einen Schlauch durch die Haut des Perineums und stellen Sie sicher, dass er parallel zu den Peniscrus verläuft. Lassen Sie dann die Linie an Ort und Stelle und halten Sie den Schnitt mit Kochsalzlösung feucht.

Machen Sie bei diesem Verfahren einen zwei Zentimeter tieferen Bauchschnitt in der unteren Mittellinie durch die Haut. Legen Sie einen passenden Schnitt durch die Faszie entlang der Linea alba an, um die Blase und die Prostata freizulegen. Verwenden Sie die Retraktoren, um eine gute Belichtung zu erzielen.

Trennen Sie dann mit Wattestäbchen die Prostata vom Fettgewebe. Stellen Sie die Retraktoren ein und schließen Sie die Dissektion ab, bis Sie eine klare Visualisierung des MPG und CN erhalten, die auf der dorsalen lateralen Seite der Prostata verlaufen. Nachdem Sie das MPG und das CN lokalisiert haben, schneiden Sie vorsichtig die Faszie über dem Nerv zwei bis fünf Millimeter distal des MPG an.

Spreizen Sie als Nächstes das Gewebe auf jeder Seite des Nervs und darunter, um einen vier Millimeter langen Abschnitt freizugeben, und schieben Sie dann eine Naht unter den Nerv. Heben Sie den Nerv mit Hilfe der Naht leicht an, um die Platzierung der Haken der bipolaren Elektrode um den Nerv herum zu erleichtern. Lassen Sie einen Assistenten den Zweikomponenten-Silikonkleber fünf Sekunden lang mit der Spitze einer Insulinnadel mischen.

Trocknen Sie den Nerv und tragen Sie den Kleber auf den Bereich um die Haken und den Nerv auf. Halten Sie den Nerv hoch, indem Sie etwa eine Minute lang leicht an der Elektrode ziehen, damit der Kleber trocknen kann. Entfernen Sie anschließend die Retraktoren, mit Ausnahme der Retraktoren auf der rechten Seite, um ein Ziehen oder Verdrehen der Elektrode zu vermeiden.

Befeuchten Sie anschließend die freiliegenden Organe mit Kochsalzlösung und legen Sie in Kochsalzlösung getränkte Gaze über den Schnitt. Stellen Sie in diesem Verfahren die Visualisierung der Tunica albuginea mithilfe von Retraktoren wieder her. Achten Sie darauf, die Retraktoren nicht am Musculus ischiocavernosus zu befestigen, da dies die Crus verzerrt

Befestigen Sie als Nächstes die Nadel an einem PE50-Schlauch und spülen Sie den Schlauch mit heparinisierter Kochsalzlösung, bevor Sie ihn in die Tunica albuginea einführen. Halten Sie die Tunica albuginea gestreckt und halten Sie den darüber liegenden Muskel distal bis zum Ansatzpunkt mit Ihrer dominanten Hand. Halten Sie dann die Nadel in Ihrer nicht dominanten Hand und führen Sie sie in den Schwellkörper ein.

Spülen Sie die Leitung, um die korrekte Platzierung in den Kavernösenkörpern ohne Leck zu bestätigen. Das Einführen der Nadel in den kavernösen Körper zur Druckaufzeichnung stellt einen kritischen Schritt dar. Beim Einbringen der Nadel in die Crus ist es wichtig, dass die Crus gedehnt und die Nadel parallel zu ihrem Verlauf entfaltet wird.

Spülen Sie den Schlauch und drücken Sie auf die Crus, um die Leitung zu testen. Stellen Sie sicher, dass keine Lecks vorhanden sind. Befestigen Sie danach den Schlauch mit Klebeband am Tisch, um ein versehentliches Ziehen an der Leitung zu verhindern.

Entfernen Sie dann die Retraktoren. Stellen Sie die Parameter an einem Stimulator ein und wenden Sie die Stimulation 50 Sekunden lang an, mit einer Pause von mindestens einer Minute zwischen den Stimulationen. Diese Abbildung zeigt eine verminderte erste Reaktion mit einer Stimulation von 50 Millimeter Quecksilber, gefolgt von der zweiten und dritten Stimulation von 66 Millimeter Quecksilber.

Die anschließenden Messungen wurden dann auf dem normalen Niveau bei 73 Millimeter Quecksilbersäule aufgezeichnet. Und hier zeigt sich die Stabilität der Ergebnisse unter Verwendung dieses Protokolls mit 10 aufeinanderfolgenden Stimulationen zwischen 75 und 78 Millimeter Quecksilbersäule. Diese Abbildung zeigt die effektiven Anästhesiedosen bei intrakavernösem Druck.

Es wurde eine verminderte und schwankendere Reaktion auf eine Erhöhung des Isoflurans im Vergleich zu einer stabilen Reaktion auf 2% bei den ersten beiden und den letzten drei Stimulationen beobachtet. Die blaue Spur oben zeigt den konstanten arteriellen Hauptdruck. Diese Abbildung zeigt die Wirkung des Anästhesietyps auf den intrakavernösen Druck.

Die ersten Stimulationen, die unter Isofluran-Anästhesie durchgeführt wurden, zeigten einen Druckanstieg von 80 Millimeter Quecksilber. Nach der Verabreichung von Fentanyl Midazolam kam es zu einem Anstieg der Reaktion auf 110 Millimeter Quecksilber. Diese Abbildung zeigt den Effekt der Sauerstoffverabreichung durch den Nasenkonus.

Das Absetzen der Sauerstoffverabreichung durch den Nasenkonus führte zu einer signifikanten Verringerung des kavernösen Druckanstiegs bei Stimulation des Nervus cavernosus. Es wurde kein Einfluss auf den arteriellen Hauptdruck festgestellt. Einmal gemeistert und bei richtiger Durchführung kann dieser Vorgang in 30 Minuten abgeschlossen werden.

Bei der Durchführung der Stimulation ist zu bedenken, dass sowohl die Art und der Grad der Anästhesie als auch die Sauerstoffversorgung einen großen Einfluss auf den intrakavernösen Druck haben. Im Anschluss an dieses Verfahren können verschiedene Wirkstoffe getestet werden, um Fragen zur Pathophysiologie der erektilen Dysfunktion und zur Einführung neuer Behandlungen zu beantworten. Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gründliches Verständnis dafür haben, wie die Kanülennervstimulation durchgeführt wird, einschließlich der Isolierung des Nervenelektrokomplexes mit Dichtungskleber und der Aufzeichnung des intrakavernösen Drucks nach minimalinvasiver Dissektion und Kanülierung der kavernösen Teile.