Arboviren Infektionen als Screening-Tools für die Identifizierung von viralen Immunmodulatoren und Host antiviralen Faktoren

Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der viralen Immunologie zu beantworten, z. B. welche Wirtsfaktoren die Arbovirus-Replikation einschränken und welche viruskodierten Immunevasionsproteine wiederum diese Wirtsrestriktionsmechanismen überwinden. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie es ermöglicht, vereinfachte Lumineszenz- und Fluoreszenz-Raum-Assays zu verwenden, um zelluläre Bedingungen zu definieren, die es Arboviren ermöglichen, sich bei einer ansonsten abtreibenden Infektion in Schmetterlingsinsektenzellen zu replizieren. Da es eine minimale Hintergrundreplikation von Arboviren in Lepidopterenzellen gibt, wird es für sie relativ einfach, Bedingungen zu erkennen, die eine Arbovirus-Replikation ermöglichen.

Bewahren Sie zunächst LD652-Zellen in 10 Zentimeter großen, mit Gewebekulturen behandelten Schalen auf und passieren Sie die Zellen, wenn sie eine Konfluenz von 80 % erreichen. Pipettieren Sie das Medium wiederholt auf die Zellmonoschicht, um die Zellen zu lösen, und verdünnen Sie die Probe dann in Wachstumsmedien auf eine ungefähre Dichte von 100 Tausend Zellen pro Milliliter. Übertragen Sie danach einen Milliliter der verdünnten Kultur in jede Vertiefung einer 24-Well-Platte.