Name: AC-DC Elektropenetrographie zur Untersuchung des Sondierungs- und Verschluckungsverhaltens von Culex tarsalis Mücken an menschlichen Händen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Lernen Sie die AC-DC-Elektropenetrographie zur Analyse des Sondierungs- und Verschluckungsverhaltens von Culex tarsalis Mücken an menschlichen Händen. Diese Methode liefert neue Erkenntnisse über Vektorverhalten und Krankheitserregerübertragung.

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Wir danken Prof. Astri Wayadande von der Oklahoma State University für ihre Pionierarbeit beim Verdrahtungsverfahren für Mücken, und Dr. Elaine Backus von der USDA-ARS in Parlier, CA, und Mr. Andrew Dowell von EPG Technologies Inc. in Gainesville, FL, für ihre Unterstützung bei der Fehlerbehebung der EPG-Geräte. Wir danken auch Dr. Dustin Swanson und Mr. William Yarnell vom USDA-ARS Insectary in Manhattan, KS, für die Bereitstellung von Moskitos, und Miss Miriam Ruhinda von der Kansas State University in Manhattan, KS für ihre Unterstützung beim Filmen der Verfahrensvideos. Diese Arbeit wurde durch den Zugang zum Integrated Molecular Entomology Core (IEMC) an der Kansas State University ermöglicht. Diese Forschung wurde durch das USDA Research, Education, and Economics Workforce Development Agreement (#58-3022-0-002) und das Hatch Multistate Project (NE1943) unterstützt. Dieses Manuskript ist Beitrag Nr. 24-194-J von der Kansas Agricultural Experiment Station, Kansas State University, Manhattan, KS, USA.

Non-invasive Electropenetrography to Study Mosquito Probing Behaviors

<ol><li>Becker, N., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBecker%2C+N+%22Medical+importance+of+mosquitoes+in+Mosquitoes+and+their+control%22">Medical importance of mosquitoes in Mosquitoes and their control</a>. , 2nd ed, Springer. Los Angeles, CA. 25-42 (2010).</li>
<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Vector-borne+diseases%22">Vector-borne diseases</a>. , (2024).</li>
<li>Woodstream Corporation, Inc. The economic cost of mosquito-borne diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22AMosquito+Magnet%22">AMosquito Magnet</a>. , (2022).</li>
<li>Bartlow, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forecasting+zoonotic+infectious+disease+response+to+climate+change%3A+Mosquito+vectors+and+a+changing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Forecasting zoonotic infectious disease response to climate change: Mosquito vectors and a changing environment.</a> Vet Sci. 6 (2), 40(2019).</li>
<li>Naslund, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+mosquito-borne+viruses+linked+to+Aedes+aegypti+and+Aedes+albopictus%3A+Global+status+and+preventive+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Vector+Borne+Zoonotic+Dis%22%5BJournal%5D)">Emerging mosquito-borne viruses linked to Aedes aegypti and Aedes albopictus: Global status and preventive strategies.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 21 (10), 731-746 (2021).</li>
<li>Shaw, W. R., Catteruccia, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vector+biology+meets+disease+control%3A+Using+basic+research+to+fight+vector-borne+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Vector biology meets disease control: Using basic research to fight vector-borne diseases.</a> Nat Microbiol. 4 (1), 20-34 (2019).</li>
<li>Wilson, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+vector+control+for+the+control+and+elimination+of+vector-borne+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">The importance of vector control for the control and elimination of vector-borne diseases.</a> PLoS Negl Trop Dis. 14 (1), e0007831(2020).</li>
<li>Dusfour, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses%3A+Advances+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">Management of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses: Advances and challenges.</a> PLoS Negl Trop Dis. 13 (10), e0007615(2019).</li>
<li>Choumet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+non+infectious+and+infectious+Anopheles+gambiae+blood+feedings+in+na%C3%AFve+and+saliva-immunized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Visualizing non infectious and infectious Anopheles gambiae blood feedings in naïve and saliva-immunized mice.</a> PLoS ONE. 7 (12), e50464(2012).</li>
<li>Backus, E. A., Cervantes, F. A., Guedes, R. N. C., Li, A. Y., Wayadande, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography+for+in-depth+studies+of+feeding+and+oviposition+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Entomol+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography for in-depth studies of feeding and oviposition behaviors.</a> Ann Entomol Soc Am. 112 (3), 236-248 (2019).</li>
<li>Hol, F. J., Lambrechts, L., Prakash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BiteOscope%2C+an+open+platform+to+study+mosquito+biting+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">BiteOscope, an open platform to study mosquito biting behavior.</a> Elife. 9, e56829(2020).</li>
<li>Backus, E. A., Guedes, R. N., Reif, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography%3A+Fundamentals%2C+controversies%2C+and+perspectives+for+arthropod+pest+management%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography: Fundamentals, controversies, and perspectives for arthropod pest management.</a> Pest Manag Sci. 77 (3), 1132-1149 (2021).</li>
<li>Gordon, R. M., Lumsden, W. H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+behavior+of+the+mouthparts+of+mosquitoes+when+taking+up+blood+from+living+tissue%3B+together+with+some+observations+on+the+ingestion+of+microfilariae%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Trop+Med+Parasitol%22%5BJournal%5D)">A study of the behavior of the mouthparts of mosquitoes when taking up blood from living tissue; together with some observations on the ingestion of microfilariae.</a> Ann Trop Med Parasitol. 33, 259-278 (1939).</li>
<li>Janson, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+automated+biomaterial+platform+to+study+mosquito+feeding+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Development of an automated biomaterial platform to study mosquito feeding behavior.</a> Front Bioeng Biotechnol. 11, 1103748(2023).</li>
<li>Henriques-Santos, B. M., Xiong, C., Pietrantonio, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+feeding+behaviors+of+females+of+the+mosquito+Aedes+aegypti+using+a+modified+flyPAD+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of feeding behaviors of females of the mosquito Aedes aegypti using a modified flyPAD system.</a> Sci Rep. 13, 20188(2023).</li>
<li>Kashin, P., Wakeley, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+insect+%27Bitometer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An insect 'Bitometer.</a> Nature. 208 (5009), 462-464 (1965).</li>
<li>Kashin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electronic+recording+of+the+mosquito+bite%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Electronic recording of the mosquito bite.</a> J Insect Physiol. 12, 281-286 (1966).</li>
<li>Kashin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+orally+effective+insect+repellent%5BTitle%5D)+AND+%22IIT+Research+Institute%22%5BJournal%5D)">Development of an orally effective insect repellent.</a> IIT Research Institute. , (1967).</li>
<li>Kashin, P., Arneson, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+automated+repellency+assay+system.+II.+a+new+electronic+%26%2334%3BBitometer-timer.%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">An automated repellency assay system. II. a new electronic &#34;Bitometer-timer.&#34.</a> J Econ Entomol. 62 (1), 200-205 (1969).</li>
<li>Shieh, J. -N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Salivation+and+engorgement+parameters+of+sucking+insect+vectors%3A+Implications+in+pathogen+transmission%22">Salivation and engorgement parameters of sucking insect vectors: Implications in pathogen transmission</a>. , Oregon State University. (1994).</li>
<li>Kimsey, R. B. Measuring and recording arthropod blood feeding. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKimsey%2C+RB+%22History%2C+Development%2C+and+Applications+of+AC+Electronic+Insect+Feeding+Monitors%22">History, Development, and Applications of AC Electronic Insect Feeding Monitors</a>. , Entomological Society of America. 122-128 (1994).</li>
<li>Backus, E. A., Devaney, M. J., Bennett, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+signal+processing+circuits+among+seven+AC+electronic+monitoring+systems+for+their+effects+on+the+emf+and+R+components+of+aphid+%28Homoptera%3A+Aphididae%29+waveforms%5BTitle%5D)+AND+%22Principles+and+Applications+of+Electronic+Monitoring+and+Other+Techniques+in+the+Study+of+Homopteran+Feeding+Behavior%22%5BJournal%5D)">Comparison of signal processing circuits among seven AC electronic monitoring systems for their effects on the emf and R components of aphid (Homoptera: Aphididae) waveforms.</a> Principles and Applications of Electronic Monitoring and Other Techniques in the Study of Homopteran Feeding Behavior. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America: Lanham, MD. 102-143 (2000).</li>
<li>Backus, E. A., Bennett, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+AC-DC+correlation+monitor%3A+New+EPG+design+with+flexible+input+resistors+to+detect+both+R+and+emf+components+for+any+piercing-sucking+hemipteran%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">The AC-DC correlation monitor: New EPG design with flexible input resistors to detect both R and emf components for any piercing-sucking hemipteran.</a> J Insect Physiol. 55 (10), 869-884 (2009).</li>
<li>Backus, E. A., Cline, A. R., Ellerseick, M. R., Serrano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lygus+hesperus+%28Hemiptera%3A+Miridae%29+feeding+on+cotton%3A+New+methods+and+parameters+for+analysis+of+nonsequential+electrical+penetration+graph+data%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Lygus hesperus (Hemiptera: Miridae) feeding on cotton: New methods and parameters for analysis of nonsequential electrical penetration graph data.</a> Annals of the Entomological Society of America. 100, 296-310 (2007).</li>
<li>Ebert, T. A., Backus, E. A., Cid, M., Fereres, A., Rogers, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+SAS+program+for+behavioral+analysis+of+electrical+penetration+graph+data%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Electron+Agr%22%5BJournal%5D)">A new SAS program for behavioral analysis of electrical penetration graph data.</a> Comput Electron Agr. 116, 80-87 (2015).</li>
<li>Wayadande, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waveforms+from+stylet+probing+of+the+mosquito+Aedes+aegypti+%28Diptera%3A+Culicidae%29+measured+by+AC-DC+electropenetrography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Waveforms from stylet probing of the mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) measured by AC-DC electropenetrography.</a> J Med Entomol. 57 (2), 353-368 (2020).</li>
<li>Cooper, A. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+electropenetrography+waveform+library+for+the+probing+and+ingestion+behaviors+of+Culex+tarsalis+on+human+hands%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">An electropenetrography waveform library for the probing and ingestion behaviors of Culex tarsalis on human hands.</a> Insect Sci. 31 (4), 1165-1186 (2024).</li>
<li>Reif, K. E., Backus, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography+unmasks+fine+temporal+details+of+feeding+behaviors+for+two+tick+species+on+unsedated+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography unmasks fine temporal details of feeding behaviors for two tick species on unsedated hosts.</a> Sci Rep. 11 (1), 2040(2021).</li>
<li>Vaughan, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electropenetrography+as+a+tool+to+quantify+probing+and+injection+behaviors+of+mosquitoes+%28Aedes+aegypti%29+in+mice+under+biocontainment+housing%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Electropenetrography as a tool to quantify probing and injection behaviors of mosquitoes (Aedes aegypti) in mice under biocontainment housing.</a> Comp Med. 73 (6), 25(2023).</li>
<li>Backus, E. A., Shugart, H. Electropenetrography (EPG) Online Workshop. Hosted by L. Diepenbrock at the University of Florida. Institute of Food and Agricultural Sciences Extension. , 
 <a target="_blank" href="https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022">https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022</a> (2022).</li>
<li>Dataq Instruments Inc. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WinDaq+recording+and+playback+software%22">WinDaq recording and playback software</a>. , (2024).</li>
<li>Backus, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Our+own+jabberwocky%3A+clarifying+the+terminology+of+certain+piercing-sucking+behaviors+of+homopterans%5BTitle%5D)+AND+%22Principles+and+applications+of+electronic+monitoring+and+other+techniques+in+the+study+of+homopteran+feeding%22%5BJournal%5D)">Our own jabberwocky: clarifying the terminology of certain piercing-sucking behaviors of homopterans.</a> Principles and applications of electronic monitoring and other techniques in the study of homopteran feeding. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America: Lanham, MD. 102-143 (2000).</li>
<li>Tjallingii, W. F. Comparison of AC and DC systems for electronic monitoring of stylet penetration activities by homopterans. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTjallingii%2C+WF+%22Principles+and+Applications+of+Electronic+Monitoring+and+Other+Techniques+in+the+Study+of+Homopteran+Feeding+Behavior%22">Principles and Applications of Electronic Monitoring and Other Techniques in the Study of Homopteran Feeding Behavior</a>. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America. 41-69 (2000).</li>
<li>Mizrahi, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMizrahi%2C+J+%22Advances+in+Applied+Electromyography%22">Advances in Applied Electromyography</a>. , IntechOpen. Rijeka, Croatia. (2011).</li>
</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen. Die Erwähnung von Handelsnamen oder kommerziellen Produkten in dieser Veröffentlichung dient ausschließlich dem Zweck, spezifische Informationen bereitzustellen, und impliziert keine Empfehlung oder Billigung durch das US-Landwirtschaftsministerium. Die Schlussfolgerungen in diesem Bericht sind die der Autoren und geben nicht unbedingt die Ansichten des USDA wieder.

Bei der Verwendung des AC/DC-EPG ist es entscheidend, ein grundlegendes Verständnis des Hardware- und Softwarebetriebs30 zu haben und die hierin beschriebenen Protokolle sorgfältig zu befolgen, um eine Beschädigung des Geräts zu vermeiden. Vermeiden Sie es vor allem, den Kopfverstärker zu berühren, wenn er eingeschaltet ist, es sei denn, er ist am Faradayschen Käfig geerdet. Es wird empfohlen, so weit wie möglich im Faradayschen Käfig aufzunehmen30. Die Käfigtüren müssen nicht unbedingt geschlossen werden, um interpretierbare Wellenformen zu erhalten, es sei denn, die Aufnahme erfolgt in einer Umgebung mit übermäßigem elektrischem Umgebungsrauschen. Nichts Motorisiertes kann im Faradayschen Käfig sein. Es ist wichtig zu beachten, dass der Faradaysche Käfig selbst ausschließlich über den Kopfverstärker elektrisch geerdet werden muss, damit er ordnungsgemäß funktioniert. Dies wird erreicht, indem der Kopfverstärker an einen Laborständer aus Metall angeschlossen wird, wobei die Farbe an einem Fuß des Ständers abgeschliffen wird, um einen leitenden Weg für die vom Faradayschen Käfig erfasste Elektrizität zu ermöglichen, die zum Laborständer, in das Metallgehäuse des Kopfverstärkers und über das Kabel zum Schaltkasten fließt. durch das Netzteil in eine ordnungsgemäß geerdete Steckdose und durch den Baugrund30 in die Erde. Ein Multimeter kann verwendet werden, um die Qualität der Verbindung zwischen den Komponenten im Inneren des Käfigs zu überprüfen, indem der spezifische Widerstand (der die Umkehrung der Leitfähigkeit ist) zwischen verschiedenen Punkten gemessen wird. Ein drahtloses AM-Radio kann auch im Faradayschen Käfig platziert werden, um zu überprüfen, ob der Schall beim Schließen der Türen deutlich reduziert (oder idealerweise eliminiert) wird, um zu bestätigen, dass der Faradaysche Käfig elektrische Signale in der Luft ausreichend erfasst (E. Backus per. Comm.).
Die richtige und standardisierte Vorbereitung des Silberklebers und die Befestigung der Aufzeichnungselektroden an Insekten sind entscheidend, um brauchbare Aufzeichnungen zu erhalten. Die Kutikula eines Insekts ist ein Isolator und wirkt als Kondensator, wenn der Silberkleber nicht ausreichend in die Poren der Nagelhaut eindringt, um einen Weg zu schaffen, auf dem Elektrizität vom Inneren des Insekts zum Golddraht auf der Oberfläche des Pronotums30 gelangt. Bereiten Sie den Silberkleber vor jeder EPG-Sitzung gleichzeitig vor, arbeiten Sie mit frischem Silberkleber aus der Röhre und ersetzen Sie ihn während des Verdrahtungsvorgangs häufig durch kräftig verwirbelten Silberkleber. Stellen Sie sicher, dass die goldene Schlaufe am Brustkorb anliegt, so dass die gesamte Schlaufe in Kontakt mit der Nagelhaut ist und nicht zur Seite gekippt oder durch eine dicke Schicht Silberkleber und Schuppen getrennt ist, um eine starke elektrische Verbindung herzustellen und ein Ablösen und Entweichen der Mücke vom Draht zu verhindern.
Die hier beschriebenen Protokolle müssen bei der Arbeit mit verschiedenen Mückenarten optimiert werden. Die optimalen EPG-Einstellungen (Ri-Pegel, Spannung, Stromtyp und Hardware-Verstärkung) für die Aufzeichnung auf einem bestimmten Arthropoden müssen experimentell bestimmt werden12,30. Sobald der Versatz jedoch angepasst ist, muss er nicht mehr nachjustiert werden, wenn mit ähnlichen Mücken gearbeitet wird. Optimale Einstellungen wurden für AC-DC EPG mit Ae. aegypti26 und Cx. tarsalis27 ermittelt. Wellenformbibliotheken (definiert in Tabelle 2) für zusätzliche Spezies werden die Einführung von EPG für Stechmücken erleichtern. Es ist auch notwendig, die Anästhesie für die interessierende Mücke zu optimieren, da das Blutsaugverhalten je nach Mückenart und Anästhesiewahl unterschiedlich beeinflusst werden kann. Zum Beispiel benötigen Cx. tarsalis eine Erholungsphase von 4 Stunden nach 15 Minuten Anästhesie mit CO2, während für Ae. aegypti eine Erholungsphase von 15 Minuten nach einer 15-minütigen Anästhesie mit Eis ausreichend ist. Culex tarsalis sind jedoch bei Kälteeinwirkung nur schwer zu besiegen, so dass trotz der langen Erholungsphase überwiegend CO2 verwendet wird.
Obwohl der AC-DC EPG-Monitor nach der Durchsicht von Online-Ressourcen30,31 oder einer Schulung mit einem erfahrenen Benutzer einfach zu bedienen ist, ist eine gewisse Fehlerbehebung erforderlich. Anfänglich wiesen die EPG-Aufzeichnungen des Autors von Mückensonden eine unerwartete 11-Hz-Zeichenwelle im Vorsignal auf, die von Wayadande und Kollegen nicht beobachtet oder berichtet worden war26. Rücksprache mit E. Backus deutete darauf hin, dass der Faradaysche Käfig wahrscheinlich das Problem war, da es störende Erdschleifen gab. Ein neuer Faradayscher Käfig, der aus einem hochleitfähigen Kupferschirm bestand, der mit einem Aluminiumrahmen verbunden war, der mit einer großen Aluminiumbodenplatte verschraubt war, die von Gummifüßen getragen wurde, um ihn von der untenstehenden Tabelle zu isolieren (Abbildung 1B), löste das 11-Hz-Rauschsignal (Abbildung 3C, C'). Darüber hinaus erschienen gelegentlich beim ersten Einschalten des EPG-Netzteils die Vor- und Nachgleichrichtersignale als dicke, unscharfe Linien anstelle von geraden, glatten, dünnen Linien. Dies wurde in der Regel behoben, indem das Instrument ausgeschaltet und alle Kabelverbindungen überprüft wurden. Wenn dies fehlschlug, half es normalerweise, das Instrument für 1-3 Minuten vom Stromnetz zu trennen. Sehr selten werden die Vor- und Nachsignale während des Betriebs dick und unscharf, was dadurch behoben wurde, dass das Instrument ausgeschaltet und an eine andere Steckdose angeschlossen wurde oder ein Spannungsregler und ein Power Conditioner verwendet wurden, um das EPG anzuschließen, bevor es an die Steckdose angeschlossen wurde. Im Idealfall würde eine dedizierte Leitung für den EPG-Monitor das Leitungsrauschen von Kühlschränken und anderen Geräten eliminieren, die an denselben Stromkreis wie der EPG30 angeschlossen sind.
Derzeit gibt es zwei Haupteinschränkungen bei der Verwendung von EPG zur Untersuchung von Mücken. Erstens wurden nur wenige Korrelationsstudien durchgeführt, um zu überprüfen, welches Sondierungsverhalten den Wellenformen entspricht. Es gibt zwar starke Hypothesen darüber, was während jeder Wellenformfamilie (Tabelle 1) und einiger der Wellenformtypen (M1 und M2) passiert, aber nur wenige dieser Hypothesen wurden experimentell bestätigt, mit der Ausnahme, dass die Blutaufnahme mit der Wellenformfamilie Mkorreliert ist 26,27. Am wichtigsten ist, dass Wellenformen identifiziert werden müssen, die dem Speichelfluss entsprechen, da viele Krankheitserreger im Speichel übertragen werden. Die Korrelation von EPG-Wellenformen mit biologischen Aktivitäten in Mücken ist erforderlich, um signifikante Unterschiede in der Wellenformdauer und -anzahl zwischen den Behandlungsgruppen sinnvoll interpretieren zu können. Zweitens können die Sondierungs- und Erfassungsraten während des EPG viel niedriger sein als erwartet27. Das individuelle Anbinden von Mücken an kurze Drähte und das direkte Platzieren auf dem Wirt könnte die Wirtssuche über große Entfernungen und das soziale Fressverhalten verhindern, was sich auf das Sondierungs- und Verschluckungsverhalten auswirken kann. Richtig verdrahtete Insekten können normal laufen und fliegen. Dennoch ziehen Mücken oft an den Drähten und verheddern sich manchmal oder halten sich in unnatürlichen Winkeln, was darauf hindeutet, dass die Verdrahtung ihr Verhalten bis zu einem gewissen Grad beeinflusst. Die Autoren testeten viele Strategien, um die Sondierungsraten während des EPG zu erhöhen, und das Fasten der Mücken über Nacht, die Verwendung älterer Personen, die Exposition gegenüber menschlichem Atem unmittelbar vor dem Aufsetzen auf die Hand und das Auftragen von menschlichem Speichel auf die Hand waren am effektivsten, sowie die Verwendung von Wirten, die ständig feine Anpassungen an der Position ihrer Hand vornahmen, um sicherzustellen, dass sich die Mücke in der idealen Position zum Sondieren befand27.
Trotz dieser Einschränkungen hat AC-DC EPG zahlreiche Vorteile gegenüber anderen Ansätzen zur Untersuchung des Sondierungs- und Verschluckungsverhaltens. Systeme wie das BiteOScope11, das flyPAD15 und die Automated Biomaterial Platform14, die zur Quantifizierung des Sondierungs- und Verschluckungsverhaltens und der Speichelsekretion während der Blutfütterung entwickelt wurden, verwenden transparente künstliche Substrate und flüssige Diäten, denen normale Wirtsgewebssysteme und Wirtshinweise fehlen. Während diese synthetischen Plattformen für viele experimentelle Zwecke nützlich sind, ist ein klarer Vorteil von AC-DC EPG die Möglichkeit, diese Verhaltensweisen und Variablen von Interesse innerhalb natürlicher Wirtssysteme zu untersuchen. Ferner bietet die benutzerdefinierte Anpassungsfähigkeit des AC-DC-EPG-Systems einen zusätzlichen Vorteil gegenüber anderen EPG-Instrumenten22, 33 und EPG-ähnlichen elektronischen Überwachungsgeräten16, 21, die keine einstellbaren Ri-Pegel, Stromarten und Spannungspegel aufweisen, die erforderlich sind, um Wellenformen mit der maximalen Informationsmenge zu erhalten und nachteilige Auswirkungen auf ein breites Spektrum der Wirte und Arthropoden zu minimieren22. 23. Urheberrecht Elektromyographie-Techniken (EMG) werden auch verwendet, um die Bluternährung zu untersuchen. Der elektrische Schaltkreis umfasst jedoch in der Regel nur den Gliederfüßer und es werden nur Muskelpotentiale aufgezeichnet, die der Aufzeichnungselektrode am nächsten liegen, so dass die Wellenformen keine Informationen über detaillierte Aktivitäten an der Wirt-Insekten-Grenzfläche liefern, wie z. B. Zellrupturen, Stilettpositionen und -aktivitäten sowie Strömungspotentiale durch die Mundwerkzeuge28,34. Intravitalmikroskopische Techniken können verwendet werden, um detaillierte Mundwerkzeugbewegungen und -aktivitäten in lebenden Wirtsgeweben direkt sichtbar zu machen, aber diese Techniken beinhalten invasive Verfahren an lebenden Tiermodellen9. Nur der AC-DC EPG-Monitor kann in Echtzeit sehr detaillierte Informationen über Sondierungs-, Verschluckungs- und Speichelverhalten liefern, die in lebenden undurchsichtigen Wirtsgeweben auftreten, ohne dass invasive Verfahren erforderlich sind, und ist für den Einsatz bei einer Vielzahl von Arthropoden anpassbar10,12.
Dies ist die erste detaillierte Schritt-für-Schritt-Anleitung für die Verkabelung von Mücken, den Bau eines Insektensaugers und die Durchführung von EPG an menschlichen Wirten. Es wird erwartet, dass diese Protokolle die Einführung von AC-DC EPG bei Stechmücken erleichtern werden, die sich von menschlichen Wirten ernähren. Beispiele für zukünftige Forschungsbemühungen unter Verwendung von AC-DC EPG könnten Studien zu grundlegenden Mechanismen der Bluternährung und der Schädigung des Wirtsgewebes10 umfassen, einschließlich der Identifizierung stereotyper Sequenzen von Sondierungsverhaltensweisen vor der Blutaufnahme, der Untersuchung des Blutflusses durch Mundwerkzeuge und des Vergleichs der Plastizität der Nahrungsaufnahme innerhalb und zwischen Arthropodenarten/Entwicklungsstadien26. EPG kann auch verwendet werden, um die Wirkung von Insektiziden, Antifeedants und Repellentien zu quantifizieren12. Die hier vorgestellten Verfahren zur Verwendung von AC-DC EPG zur Untersuchung von Stechmücken an menschlichen Händen werden diese Studien beschleunigen und neue Einblicke in die Biologie der Blutfresser von Mücken ermöglichen.

Mücken verursachen weltweit Leid und wirtschaftliche Verluste aufgrund ihrer Rolle als Krankheitsüberträger und lästige Schädlinge1. Anopheles-Mücken übertragen Malaria, die jährlich weltweit schätzungsweise 219 Millionen Fälle, mehr als 400.000 Todesfälle verursacht2 und 12 Milliarden US-Dollar an direkten Kosten3. Aedes-Mücken sind die bemerkenswertesten Überträger von Bedeutung für die öffentliche Gesundheit, da sie fast weltweit vorkommen und Erreger von Chikungunya, Dengue-Fieber, lymphatischer Filariose, Rifttalfieber, Gelbfieber und Zika übertragen, die Menschenleben fordern, die Gesundheitssysteme überfordern und zu chronischem Leiden, lebenslanger Morbidität und Behinderung führen4,5. Darüber hinaus übertragen Culex-Mücken Erreger der Pferdeenzephalitis, der Japanischen Enzephalitis, der lymphatischen Filariose, der St.-Louis-Enzephalitis und des West-Nil-Fiebers, die sich sowohl auf die Gesundheit von Mensch als auch Tier auswirken3,4.
Die Vektorkontrolle mit insektizidbasierten Ansätzen ist die weltweit führende Methode zur Kontrolle vektorübertragener Krankheiten6,7. Die Anzahl der Insektizide, die zur Mückenbekämpfung zur Verfügung stehen, ist jedoch begrenzt. Darüber hinaus entwickelt sich die Insektizidresistenz bei vielen Arten, insbesondere bei Aedes-Mücken, was sich auf unsere Fähigkeit auswirkt, durch Vektoren übertragene Krankheiten zu bekämpfen, und den Bedarf an neuen Bekämpfungsstrategien erhöht6,8. Ein besseres Verständnis der Biologie der Mücke, der Interaktionen zwischen Mücke, Wirt und Krankheitserreger und der Prozesse, die die Übertragung von Krankheitserregern regulieren, kann die Entwicklung neuer Werkzeuge zur Vektorkontrolle erleichtern6.
Sondierungs- und Aufnahmeverhalten in Wirtsgeweben können die Übertragung von Krankheitserregern und die Krankheitspathologie beeinflussen9,10,11,12. Zum Beispiel wurden mehr Mikrofilarien aufgenommen, wenn Aedes aegypti direkt aus den Kapillaren fütterte, anstatt Blut außerhalb der geplatzten Gefäße zu sammeln13. Daher kann die Grundlagen- und angewandte Forschung zu diesem Thema dazu beitragen, Strategien zur Mückenbekämpfung und andere Gegenmaßnahmen zur Übertragung von Krankheitserregern zu entwickeln, zu verfeinern und zu bewerten. Es bestehen jedoch erhebliche Wissenslücken in den Details von kryptischen Blutfütterungsverhaltensweisen, die unter der Hautoberfläche des Wirts stattfinden, da diese Verhaltensweisen oft invasive Verfahren an lebenden Tiermodellen erfordern oder transparente künstliche Substrate oder flüssige Nahrungen verwenden9,11,14,15. Nicht-invasive Elektropenetrographie-Techniken (EPG; auch elektrischer Penetrationsgraph genannt) wurden verwendet, um das Fressverhalten von pflanzenfressenden Insekten im Zusammenhang mit der Übertragung von Pflanzenpathogenen, der Resistenz von Wirtspflanzen und den Wirkungsweisen von Insektiziden zu untersuchen, da sie es Forschern ermöglichen, Bewegungen und Verhaltensweisen von Mundwerkzeugen, die im Wirtsgewebe auftreten, indirekt zu beobachten, aufzuzeichnen und zu quantifizieren10,12.
Seit den 1950er Jahren werden elektronische Penetrationsüberwachungstechniken auf blutsaugende Arthropoden, einschließlich Mücken, angewendet16,17,18,19,20. EPG wurde jedoch nie allgemein für blutsaugende Arthropoden übernommen, da die biologischen Aktivitäten, die den Wellenformen entsprechen, nie verifiziert werden konnten21. Darüber hinaus führten das Design und die Elektronik früher Instrumente zu einer Überbetonung einiger elektrischer Signale, zu hohen Rausch-Signal-Verhältnissen, geringer Auflösung und Verzerrung der Wellenformen sowie zu Irritationen bei Wirbeltierwirten12,22. Ein neueres Instrument, der AC-DC EPG Monitor23, verfügt über variable Einstellungen und eine verbesserte Signalverarbeitung, wodurch er besser geeignet ist, blutsaugende Arthropoden aufzuzeichnen und die biologische Herkunft der Wellenformen in experimentellen Korrelationsstudien zu entschlüsseln10,12.
Für EPG wird ein elektrisches Signal über eine Substratspannungssonde (d.h. Referenzelektrode) an den Host angelegt. Der Gliederfüßer wird an einer Aufzeichnungselektrode befestigt und auf dem Wirt platziert. Wenn der Gliederfüßer seine Mundwerkzeuge (d. h. Stilette) in den Wirt einführt, wird das elektrische Signal zur Signalverarbeitung an den AC-DC EPG-Monitor weitergeleitet. Die elektrischen Signale werden dann auf einem Computer als "Wellenformen" angezeigt, die bestimmten Verhaltensweisen wie Mundwerkzeugbewegungen, Verschlucken, Speichelfluss und Aufnehmen/Impfen von Krankheitserregern entsprechen10,12. Sequenzielle und nicht-sequentielle Antwortvariablen, die sich auf die Dauer und Anzahl der Wellenformen beziehen24,25 auf verschiedenen hierarchischen Ebenen (Familien, Typen und Subtypen) können dann basierend auf der Häufigkeit und Dauer der Wellenformen berechnet werden, um Einblicke in das Fressverhalten zu erhalten, das innerhalb und zwischen den Arten und als Reaktion auf biotische und abiotische Faktoren auftritt, wie z. B. Wirte, Krankheitserreger, Pestizide und Umweltbedingungen10,12.
Bisher wurde der AC-DC EPG-Monitor verwendet, um das Sondierungs- und Verschluckungsverhalten von Ae. aegypti26 und Culex tarsalis27 Stechmücken zu charakterisieren, die sich von menschlichen Händen ernähren, und von Dermacentor variabilis und Amblyomma americanum-Zecken, die sich von Rinderkälbern ernähren28. Darüber hinaus wurde kürzlich ein Mausmodell für EPG29 entwickelt, um Erregerstudien mit diesem Instrument zu erleichtern. Menschliche Hände sind ideal für die anfängliche Charakterisierung von Mückenwellenformen, da menschliche Wirte berichten können, wann sie die Mückensondierung sowie andere Verhaltensweisen spüren, was die Korrelation von Wellenformen mit Verhaltensweisen erleichtert (Tabelle 1). Darüber hinaus könnte ein besseres Verständnis der Plastizität des Fressverhaltens bei Stechmücken in verschiedenen menschlichen Populationen zur Entwicklung spezialisierterer Managementmaßnahmen für Stechmücken und die von ihnen übertragenen Krankheitserreger beitragen.
Tabelle 1: Beschreibung der Wellenformenfamilien, die zur Klassifizierung von elektrischen Signalen verwendet werden, die von Culex tarsalis an menschlichen Händen unter Verwendung von AC-DC EPG aufgezeichnet wurden. Die Sondierungsphase und die biologischen Aktivitäten, die jeder Wellenformfamilie entsprechen. Weitere Informationen finden Sie unter Cooper et al.27. Abkürzung: AC = Wechselstrom, DC = Gleichstrom, EPG = Elektropenetrograph. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/Table1_31July2024.xlsx" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>
Um die Verwendung von EPG zur Untersuchung der Mückenbiologie und der Wirt-Vektor-Interaktionen zu erleichtern, wird hier eine Methodik zur Quantifizierung des Fressverhaltens von Cx. tarsalis-Mücken an menschlichen Händen mit dem AC-DC EPG-Monitor vorgestellt. Diese Protokolle bauen auf den grundlegenden AC-DC EPG-Verfahren auf, die in den Online-Ressourcen30 beschrieben sind, und setzen voraus, dass die Benutzer über grundlegende Kenntnisse von AC-DC EPG und der zugehörigen Software verfügen31. Die skizzierten Verfahren können für andere Mücken- und Wirtsarten modifiziert werden und bieten eine Grundlage, um die hypothesengetriebene Erforschung des Fressverhaltens von Mücken zu erleichtern.
Tabelle 2: Definitionen der gängigen AC-DC EPG-Terminologie. Die Definitionen basieren auf den Definitionen in den Online-Ressourcen30,31 und in der wissenschaftlichen Literatur32. Abkürzung: AC = Wechselstrom, DC = Gleichstrom, EPG = Elektropenetrograph. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/66877_Table 2.xlsx" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>

<table><tbody><tr><td>Instrumentierung</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>AC-DC 4-Kanal-Elektropenetrograph</td><td>EPG Technologies, Inc.</td><td></td><td>Enthält für EPG das Netzteil, die Steuerbox, die Schaltschnittstellenbox, vier Kopfstufenverstärker, vier Substratspannungsson</td>Amazon.com</tr><tr><td></td><td></td> den und die zugehörigen<td>Kabel Luftkissen</td>, auf <td>denen der menschliche Host während des EPG seine Hand/seinen Arm ablegen</td></tr> kann <tr><td>DI-710 Datenerfassungshardware (AD-Platine)</td><td>DATAQ Instruments Inc.</td><td></td><td>zur Digitalisierung der analogen EPG-Signale, damit sie auf einem Computer visualisiert werden können</td></tr><tr><td>Dimmbare LED-Lupenlampe, große 5-fache Freisprechlupe mit Licht und Ständer zum Lesen Hobbys Basteln Nähwerkbank</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Verhaltensbeobachtung während des EPG; nur während des EPGs unplugged verwenden, da sonst Geräusche auftreten können</td></tr><tr><td>Dino-Lite Edge Digitalmikroskop (250-fache Vergrößerung)</td><td>Dino-Lite</td><td>AF4915ZT</td><td>zur Verhaltensbeobachtung während des EPGs</td></tr><tr><td>Dino-Lite Flex-Arm</td><td>Desktop-Stativ Dino-Lite</td><td>MS22B</td><td>zum Halten und Manipulieren der Kamera</td></tr><tr><td>Eisco Steel Retort Base Stand und Rod Set</td><td>Fisher</td><td>Scientific S41740</td><td>zum Halten des Kopftischverstärkers & Erdung des Faradayschen Käfigs (muss aus Metall sein)</td></tr><tr><td>EPG Online Workshop</td><td>UF IFAS Erweiterung</td><td>https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022</td><td>AKA, "Online-Ressourcen" zum Erlernen von EPG (Geräteeinrichtung, Datenerfassung und -analyse, Faradaysche Konstruktion, Silberleimvorbereitung, Konstruktion von Insektenstummeln usw.)</td></tr><tr><td>Furman P-1800 AR Power Regulator/Power Conditioner</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Reduzierung von Leitungsrauschen</td></tr><tr><td>Small Bubble Cushioning Wrap</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Verwendung als Barriere zwischen dem Host und dem Faradayschen</td></tr><tr><td>Käfig Troemner Talboys Labjaws Regular Clamp Holder</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-217-121</td><td>zum Halten des Kopfstufenverstärkers & zur Erdung des Faradayschen Käfigs (muss aus Metall bestehen und darf nicht mit Kunststoff überzogen sein)</td></tr><tr><td>Windows Computer</td><td>Best Buy</td><td></td><td>für EPG & statistische</td></tr> <tr><td>AnalysenSoftware</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Backus 2.0 Data Analysis SAS Programm&nbsp;</td><td>UF IFAS Extension</td><td>https://crec.ifas.ufl.edu/extension/epg/data-analysis/</td> <td>für die statistische Analyse von Signaldaten</td></tr><tr><td>Ebert 1.0 File Manipulator and Error Checker SAS Programme</td><td>UF IFAS Extension</td><td>https://crec.ifas.ufl.edu/extension/epg/data-analysis/</td> <td>für die Vorbereitung von Dateien für die statistische Analyse von Signaldaten</td></tr><tr><td>SAS Version 9.4</td><td>SAS Institute Inc.</td><td></td><td>für die statistische Analyse von Signaldaten</td></tr><tr><td>WinDaq Lite&nbsp;</td><td>DATAQ Instruments Inc.</td><td></td><td>zum Aufzeichnen und Überprüfen von EPG-Daten. Enthält die WinDaq Hardware Manager Software (AKA, "Hardware Management Software") und die WinDaq Waveform Browser Software (AKA, "Waveform Reviewing Software"). Nur für die Verwendung auf Windows-Computern.&nbsp;</td></tr><tr><td>Faraday Cage</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aluminium-Siebrahmen</td><td>Home Depot</td><td>MSCF5167</td><td>für die Wände des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Aluminiumblech, 0,125 (1/8) dick 3003-H14</td><td>Metals Depot</td><td>S318</td><td>für die Basis der Faradayschen</td></tr><tr><td>Käfig-Eckstreben, 1" &nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>339547</td><td>für die Wände des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Flachkopf-Kreuzschlitzschrauben, #6-32 x 1"</td> <td>Home Depot</td><td>459999</td><td>für den Bau von Faradayschen</td></tr><tr><td>Unterlegscheiben, #6&nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>638977</td><td>für den Bau von Faradayschen Käfigen</td></tr><tr><td>Das Digitalmultimeter Fluke 15B+ für elektrische Anwendungen misst AC/DC-Spannungs- und -Strommessungen bis zu 1000 V und 10 A sowie Widerstands-, Durchgangs-, Dioden- und Kapazitätsfunktionen</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>für die Prüfung des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Tragbares Radio AM FM, Goodes Transistorradio mit Lautsprecher, Kopfhöreranschluss, batteriebetriebenes 2AA-Radio für den Empfang über große Entfernungen, Taschenradio für den Innen-, Außen- und Notfallgebrauch</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Testen des Faraday-Käfigs</td></tr><tr><td>Reiner Kupferschirm, 16 x 16 Mesh mit 0,11 Drahtdurchmesser, 36" x 12'Metro</td> <td>Screenworks</td><td></td><td>für die Wände des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Rundkopf-Combo-Maschinenschrauben, #6-32 x 3/4"</td> <td>Home Depot</td><td>528466</td><td>für Faradayscher Käfigbau</td></tr><tr><td>Schleifpapier, 1/2" x 1", 150 Körnung</td><td>Home Depot</td><td>19036-20-CC</td><td>zum Entfernen der Farbe von der Unterseite des Laborständers</td></tr><tr><td>Siebrahmenecken, 5/16" &nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>WCORN516</td><td>für die Wände des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Siebverzahnung, 0,14"</td><td>Home Depot</td><td>3034719</td><td>für die Wände des Faradayschen Käfigs</td></tr><tr><td>Insektenstummel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Messing Rosetten</td> Home <td>Depot</td><td>801294</td><td>für die Herstellung von Insektenstummeln&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Kupferdraht, 20 AWG</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>für die Konstruktion von Insektenstümpfen&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Harris wasserlösliche Grippe&nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>355398</td><td>zum Löten, Beschichten des Insektenstichs und zum Herstellen einer starken Verbindung</td></tr><tr><td>Spitzzange</td><td>Home Depot</td><td></td><td>zum Biegen von Draht beim Bau von Insektenstummeln</td></tr><tr><td>Pro's Kit 900-015 Helping Hands Löthilfe</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Halten von Rosettenstiften während des Lötens</td></tr><tr><td>Lötzinn (mit Kolophoniumkern)</td><td>Home Depot</td><td>296497</td><td>zum Konstruieren von Insektenstümpfen&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Drahtschneider Abisolierwerkzeug</td><td>Home Depot</td><td></td><td>zum Abisolieren und Schneiden von Kupferdraht beim Bau von Insektenstummeln</td></tr><tr><td>YIHUA 928D-III Lötkolben, 110W High Power, volldigitaler Display-Lötkolben</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Konstruieren von Insektenstummeln; kommt mit einem Ständer, Schwamm und Stahlwolle zum Reinigen</td></tr><tr><td>Insektensauger</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Accuris ASPIRE Laborsauger</td><td>Accuris instruments</td><td>V0020</td><td>für die Absaugung des Insektensaugers; enthält den tragbaren Vakuumregler, den Edelstahladapter mit feiner Spitze (40 mm) und den Pipettenspitzenadapter</td></tr><tr><td>Chemglass Life Sciences Pasteur-Pipetten, 5 3/4" lange</td><td>Fisher</td><td>Scientific NC0230004</td><td>für den Einsatz als Insektensauger bei der Verkabelung von Mücken</td></tr><tr><td>Kommerzielles elektrisches farbiges Vinyl-Isolierband</td><td>Home Depot</td><td></td><td>zum Befestigen der modifizierten Pasteur-Pipette an der Vakuumleitung</td></tr><tr><td>Moskitonetz-Gebrauchsgewebe, 10 x 10 cm quadratisch</td><td>Joann Fabrics</td><td>16651622</td>, <td>um zu verhindern, dass Mücken in die Vakuumpumpe abgesaugt werden</td></tr><tr><td>Saint Gobain Performance Plastics Tube Tygon 1/4 x 7/16</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-206-8914</td><td>für den schnellen und einfachen Wechsel zwischen verschiedenen modifizierten Pasteurpipetten</td></tr><tr><td>Thermo Scientific Nalgene HDPE-Schnellkupplungen (3/8 bis 7/16 Zoll) Ausweis)</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-315B</td><td>für den schnellen und einfachen Wechsel zwischen verschiedenen modifizierten Pasteur-Pipetten</td></tr><tr><td>Silver Glue&nbsp; </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elmer's Glue-All Multi Purpose White Glue</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>für die Vorbereitung von Silberleim</td></tr><tr><td>Silver Flake 99,9% rein, &nbsp; 4-8 & micro; m</td><td>ThermoFisher</td><td>786.09</td><td>für die Silberleimvorbereitung</td></tr><tr><td>Silberflocken 99,95% rein, 8-10 & Mikro; m</td><td>Inframat Advanced Materials</td><td>47MR-12F</td><td>für die Herstellung von Silberkleber</td></tr><tr><td>Insektenanästhesie</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 Bubbler Kit, 1000 mL, #9 Gummistopfen</td><td>FlyStuff</td><td>59-181</td><td>zur Verhinderung von Insektenaustrocknung bei der Verwendung des Flypad</td></tr><tr><td>Flypad&nbsp; Rahmen, Standardgröße</td><td>FlyStuff</td><td>59-118</td><td>verhindert das Herunterfallen von Mücken Flystation</td></tr><tr><td>Brush</td><td>FlyStuff</td><td>59-205</td><td>zur Reduzierung der statischen Aufladung bei Arbeiten auf einem</td></tr><tr><td>Flypad Flystuff&nbsp; Flypad&nbsp; </td><td>FlyStuff</td><td>59-114</td><td>AKA "Anästhesiekissen" zur Betäubung von Mücken</td></tr><tr><td>Trichter (4 Zoll Durchmesser)</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Begasen von Mückenbechern vor dem Transfer auf das Flypad</td></tr><tr><td>Plexiglas oder ein flacher Kunststoffdeckel (zugeschnitten)</td><td>Home Depot</td><td>MC-27</td><td>zum Abdecken des Flypads, wenn die Mücken aufzuwachen beginnen</td></tr><tr><td>Absperrbare Schlauchschellen für Kunststoffschläuche Einzelne Position und einstellbare Öffnung (Sorte 1/8" bis 1/2")</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Umleiten von Gas zwischen Flypad und Trichter</td></tr><tr><td>Einstufiger CO2Regler</td><td>FlyStuff</td><td>59-142</td><td>zur Regulierung des Gasflusses aus dem CO2Tank</td></tr><tr><td>" T&rdquo; Passend für 1/8" ID Schlauch</td><td>FlyStuff</td><td>59-123</td><td>zum Anschluss des Flypads und des Trichters an den CO2 Tank</td></tr><tr><td>Schlauch, durchsichtig&nbsp;</td><td>FlyStuff</td><td>59-124C</td><td>zum Verbinden des Trichters und des Flypads mit dem Atemregler am CO2 Tank</td></tr><tr><td>Insect Wiring</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Black Cardstock, (65Lb, 176 g/m2) 8,5" x 11"</td> <td>Michael's Stores Inc.</td><td>327826</td><td>, um Golddraht leichter sichtbar zu machen</td></tr><tr><td>Schwarzes Bastelpapier Quadrat 3,5" x 4,0"</td> <td>Heftklammern</td><td>956221</td><td>, um Golddraht leichter sichtbar zu machen</td></tr><tr><td>Wattebäusche</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Fasten Mücken</td></tr><tr><td>Bastelschaum #12 Block (3,1 cm x 17,2 cm x 30,2 cm)</td><td>Joann Fabric and Craft Store</td><td>1941079</td><td>zum Halten von drahtgebundenen Mücken</td></tr><tr><td>Deflecto Ribbon Spender, durchsichtige</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Aufbewahrung von Golddraht</td></tr><tr><td>Federleichte Entomologie-Pinzette</td><td>Fisher Scientific</td><td>S72110</td><td>zur Insektenmanipulation</td></tr><tr><td>Feine Pinzette (FST by Dumont: #5 91150-20, Inox-Electronic)</td><td>Fine Science Tools</td><td>91150-20</td><td>zur Herstellung einer Goldschlaufe beim Verdrahten von Mücken</td></tr><tr><td>Feine Spitze Pinsel</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Manipulation von Mücken während der Verkabelung und des EPG; Muss bei Verwendung für EPG einen Kunststoff- oder Holzgriff haben</td></tr><tr><td>Standard-Transferpipetten mit feiner Spitze, schmal, 5,8 mL</td><td>Thomas Scientific</td><td>7761D21</td><td>für die Herstellung von Silberleim</td></tr><tr><td>Golddraht, 99,99 % rein, 0,025 mm Dicke</td><td>Goodfellow</td><td>AU005121</td><td>für die Verkabelung von Mücken</td></tr><tr><td>Minutien Pins, Spitze 0,2 mm, 1 cm</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9681411</td><td>zum Auftragen von Klebstoff auf die Mücken</td></tr><tr><td>Pappbecher&nbsp;</td><td>Starre Papierröhre</td><td></td><td>für nüchternde Mücken&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Schraubstock</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-996-811</td><td>zum Halten des winzigen Stifts während der Insektenverkabelung</td></tr><tr><td>Aufbewahrungsbox aus Kunststoff mit Deckel (7 Zoll x 9 Zoll x 14 Zoll)</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Transport von kabelgebundenen Mücken</td></tr><tr><td>Plexiglas oder ein flacher Kunststoffdeckel (auf Maß zugeschnitten)</td><td>Home Depot</td><td>MC-27</td><td>zum Abdecken des Fliegenpolsters, wenn die Mücken aufzuwachen beginnen</td></tr><tr><td>Selbstschließende Pinzette</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-906</td><td>zum Halten und Manipulieren von Golddraht</td></tr><tr><td>Compressed Gas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 Gastank</td><td>Matheson Gas</td><td></td><td>zur Betäubung von Mücken mit einem Flypad</td></tr><tr><td>Common Lab Items</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Biohazard Einweg-Autoklavenbeutel, 8 1/2" x 11"</td> <td>Fisher Scientific</td><td>03-410-591</td><td>zur Entsorgung von blutgefütterten Mücken</td></tr><tr><td>Bunsenbrenner oder Propanbrenner</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zur Modifikation von Pasteur-Pipetten</td></tr><tr><td>Farbiges Laborband</td><td>Daigger Supplies</td><td>EF9763R</td><td>zum Etikettieren, Vorbereiten von Silberkleber und Abdeckzange</td></tr><tr><td>Einweg-Pipettenspitzen, 1000 & Mikro; L</td><td>Fisher Wissenschaftlich&nbsp;</td><td></td><td>zum Aliquotieren von Wasser bei der Herstellung von Silberkleber</td></tr><tr><td>Seziermikroskop</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>für die Verkabelung von Mücken</td></tr><tr><td>Präpariersonde</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9109673</td><td>zum Rühren und Auftragen von Silberkleber</td></tr><tr><td>Erlenmeyerkolben, 1000 mL</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td></td><td>zur Verhinderung der Austrocknung von Insekten bei der Verwendung des Flypads</td></tr><tr><td>Ethanol, 70%&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>04-355-122</td><td>zur Bergung entflohener Mücken</td></tr><tr><td>Petrischalen aus Glas</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-747B</td><td>zur Betäubung von Mücken mit Eis</td></tr><tr><td>Handschuhe Fisher</td><td>Scientific</td><td></td><td>für den persönlichen Schutz</td></tr><tr><td>Kimwipes KimTech Science Marke Wischtücher für empfindliche Aufgaben</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666</td><td>zum Zerkleinern von Mücken</td></tr><tr><td>Laborkittel</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>für den persönlichen Schutz</td></tr><tr><td>LiBa-Sprühflaschen, wiederbefüllbare leere Sprühflaschen (waschalkoholsicher)</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Bergen entflohener Mücken</td></tr><tr><td>Magnetrührstab, 2 cm lang</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>zum Mischen von Silberkleber</td></tr><tr><td>Mechanische Einkanalpipette, 1000 & micro; L</td><td>Fisher Wissenschaftlich&nbsp;</td><td>13-690-032</td><td>zum Aliquotieren von Wasser bei der Herstellung von</td></tr><tr><td>Mikrozentrifugenröhrchen mit Silberkleber, 1,5 mL</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>780420</td><td>zur Aufbewahrung von Silberkleber</td></tr><tr><td>Parafilm M&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-998-944</td><td>zum Abdichten von Tuben aus Silberkleber</td></tr><tr><td>Plastikfolie</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Abdecken des Schaumstoffblocks</td></tr><tr><td>Pyrex 20 mL Becherglas</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>07-250-051</td><td>zum Vermischen von Silberkleber</td></tr><tr><td>Semi-Micro</td><td>Balance Fisher Scientific&nbsp;</td><td>10-919-370</td><td>zum Wiegen von Kleber und Silberflocken</td></tr><tr><td>Sharpie-Stift, feine Spitze</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>zum Beschriften</td></tr><tr><td>Einschneidige Rasierklinge</td><td>Elektronenmikroskopie Sciences</td><td>71980</td><td>zum Reinigen von Insektenstummeln</td></tr><tr><td>Standard Einweg-Transferpipetten</td><td>Fisher Scientific</td><td>133-711-7mL</td><td>zum Umfüllen von Silberkleber in ein Vorratsrohr&nbsp;</td></tr><tr><td>Rührplatte</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td></td><td>zum Mischen von Silberkleber</td></tr><tr><td>Timer/Stoppuhr</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>für die Zeitmessung, wie lange der Wirt jedem Insekt ausgesetzt ist</td></tr><tr><td>Ultrareines (18 M&Omega;) Wasser</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td></td><td>zur Vorbereitung von Silberleim</td></tr><tr><td>Gebrauchsschere</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-945</td><td>zum Schneiden von Golddraht</td></tr><tr><td>Vortex-Mischer</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>zum Mischen von Silberkleber</td></tr><tr><td>Study Organisms</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Culex tarsalis Mücken</td><td>USDA ARS Center for Grain and Animal Health Research in Manhattan, KS</td><td></td><td>zur Verwendung als Studienteilnehmer</td></tr></tbody></table>

ac-dc elektropenetrographie zur untersuchung des sondierungs- und verschluckungsverhaltens von culex tarsalis mücken an menschlichen händen

AC-DC Electropenetrography for the Study of Probing and Ingestion Behaviors of Culex tarsalis Mosquitoes on Human Hands

Mücken übertragen Krankheitserreger, die sich negativ auf die Gesundheit von Mensch und Tier auswirken. Ein besseres Verständnis ihrer Biologie bei der Blutaufnahme und ihrer Wechselwirkungen mit Wirten und Krankheitserregern könnte genutzt werden, um neue Angriffspunkte für die Kontrolle von durch Stechmücken übertragenen Krankheiten zu entwickeln. Leider ist das Sondierungsverhalten (d.h. das Stechen) von Mücken nur unzureichend verstanden, da es im Wirtsgewebe stattfindet. Hier wird ein nicht-invasives Verfahren zur Verwendung der AC-DC-Elektropenetrographie (EPG) zur indirekten Visualisierung und Quantifizierung des Fressverhaltens von Mücken beschrieben, indem Änderungen der elektrischen Signale aufgezeichnet werden, die beim Sondieren und Verschlucken an menschlichen Händen erzeugt werden. Dünne Golddrähte werden mit leitfähigem Silberkleber an den Mücken befestigt und mit dem EPG-Instrument verbunden. Der menschliche Wirt hält eine Substratspannungssonde in der Hand. Die Sondierung des Wirts durch die verdrahtete Mücke vervollständigt den Stromkreis, und elektrische Signale werden auf einem Computer als "Wellenformen" aufgezeichnet, die dann gemessen und zur Analyse aufgezählt werden können. Diese Methodik wurde verwendet, um das Sondierungs- und Verschluckungsverhalten von Aedes aegypti- und Culex tarsalis-Mücken zu charakterisieren und kann auf andere Mückenarten angewendet werden. EPG kann verwendet werden, um die Auswirkungen von Krankheitserregern, Insektiziden und anderen Faktoren auf das Fressverhalten von Mücken zu untersuchen.

AC-DC-EPG-Aufnahmen der Blutmahlzeiten von Cx. tarsalis-Mücken an menschlichen Händen (Abbildung 4) ergaben interpretierbare Signalkurven, die für die Analyse und Veröffentlichung geeignet waren27. Interpretierbare Signalkurven enthielten deutliche, voneinander unterscheidbare, sich wiederholende Muster, die in Wellenformfamilien (Tabelle 1 und Abbildung 4), Typen und Untertypen klassifiziert werden konnten, nachdem die Kompression (wie in Tabelle 2 definiert) und die Softwareverstärkung in der Software zur Überprüfung der Signalkurven angepasst worden waren27,31. Alle zuvor bei Ae. aegypti-Mücken beschriebenen Wellenformfamilien (J, K, L, M, N) und Typen (L1, L2, M1, M2), die an menschlichen Händen gefüttert wurden26, wurden auch in den von Cx. tarsalis erzeugten Signalkurven identifiziert, wodurch die Gültigkeit der hier beschriebenen Methoden bestätigt wurde. Zusätzlich wurden drei neue Wellenformtypen (M3, N1, N2) sowie zahlreiche Untertypen von L1, L2, M1 und M2 identifiziert27. Außerdem wurde der Spannungsabfall auf den Ausgangswert, wenn die Mundwerkzeuge vom Wirt zurückgezogen werden, als Wellenformfamilie W bezeichnet27.
Die systematische Variation der Geräteeinstellungen (Stromart und Ri-Stufen) unter Einhaltung der hier beschriebenen Verfahren ermöglichte die Bestimmung der optimalen Einstellungen zur Aufzeichnung des Blutmahlens von Cx. tarsalis an menschlichen Händen, der elektrischen Ursprünge jeder Wellenform, der durchschnittlichen Dauer in Sekunden vollständiger und unvollständiger Probierphasen pro Mücke sowie des statistischen Vergleichs der Wellenformdauer in Sekunden pro Insekt (WDI), der Anzahl der Wellenformereignisse pro Insekt (NWEI) und der Wellenformdauer in Sekunden pro Ereignis und Insekt (WDEI) über die verschiedenen Einstellungen hinweg27. Zudem wurden Mücken während unterschiedlicher Wellenformen unterbrochen und seziert, um festzustellen, welche Wellenform mit der Aufnahme von Blut korreliert27. Eine ähnliche Untersuchung wurde für Ae. aegypti mit vergleichbarer Methodik durchgeführt26.
Aufgrund der empfindlichen und komplexen Natur der EPG-Aufzeichnungen waren nicht alle Aufnahmen so makellos wie die in Abbildung 4 gezeigten. Gelegentlich kam es zu Übersteuerungen (Abbildung 3A,C), Änderungen der Hardware-Verstärkung (Abbildung 3A,C), minderwertigen Verdrahtungen (Abbildung 3B), Falteffekten des Gleichrichters in der Wellenform J (Abbildung 3C,C') und elektrischem Rauschen (Abbildung 3C,C'), wodurch die Wellenformen verzerrt oder überlagert wurden. Dadurch eigneten sie sich weniger für Abbildungen in publizierbarer Qualität, und die Auswertung sowie Analyse wurde erschwert. Daher wird empfohlen, besondere Sorgfalt bereits in der Anfangsphase darauf zu verwenden, die Verdrahtungstechniken zu perfektionieren, die Verstärkungs- und Spannungseinstellungen zu optimieren, den Offset anzupassen und elektrisches Rauschen zu kontrollieren. Interessanterweise trat der Falteffekt des Gleichrichters nur bei der Wellenformfamilie J von Cx. tarsalis auf (Abbildung 3C,C') und trat nach der anfänglichen Offset-Anpassung nicht erneut auf, selbst bei Verwendung anderer Mückenarten (Ae. aegypti und Culex quinquefasciatus) (Daten nicht gezeigt). Darüber hinaus zeigte die Fehlersuche, dass das in Abbildung 3 (Panels C und C') sichtbare unkontrollierte elektrische Rauschen auf eine defekte Faraday-Käfig zurückzuführen war. Die Aufnahmen, die im defekten Faraday-Käfig gemacht wurden, waren dennoch verwendbar, doch die Rauschprobleme wurden behoben, nachdem ein verbesserter Faraday-Käfig gebaut worden war (Abbildung 1B).
Auch wenn alle Vorsichtsmaßnahmen und Optimierungen bereits vorab getroffen wurden, waren gelegentlich geringfügige Unterschiede in der Qualität der Elektrodenanbringung am Mückenkörper sowie andere unbekannte Faktoren dafür verantwortlich, dass das Signal verzerrt wurde und sich das Signal-Rausch-Verhältnis veränderte, sodass während der Aufnahme die Hardware-Verstärkung angepasst werden musste, um sicherzustellen, dass das Signal im sichtbaren Bereich lag und die Auflösung der Peaks in jeder Wellenform ausreichte, um sie identifizieren und charakterisieren zu können. Leider kann die Anpassung der Hardware-Verstärkung während der Aufnahme abrupte Spannungssprünge verursachen (Abbildung 3A, C), wodurch die Wellenformen für die Veröffentlichung ungeeignet werden, aber dennoch (ganz oder teilweise) für Messungen und Analysen verwendet werden können.
<img alt="Diagramme zum statischen Gleichgewicht mit Kraftanalyse; Graphen zeigen die Gleichungen ΣFx=0, ΣFy=0." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66877/66877fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Abbildung 4"> 
Abbildung 4: Repräsentative Wellenformen einer Culex tarsalis-Probe an einer menschlichen Hand, aufgezeichnet mit einem Ri von 107 Ω und einem angelegten Signal von 250 mV AC. Wellenformnamen auf Familienebene (NP, J, K, L, M, W) sind oben in jedem Panel angegeben. Die unteren Panels zeigen Vergrößerungen ausgewählter Bereiche des Panels A. Eingefügte Panels zeigen Vergrößerungen der angegebenen Bereiche. Zeitmaßstäbe und Verstärkungen der Software betragen (A) 7,0 s/div, 16x; (B) 1,0 s/div, 64x; (B') 0,2 s/div, 64x; (C) 1,0 s/div, 64x; (C') 0,2 s/div, 32x; (D) 1,0 s/div, 64x; (D') 0,2 s/div, 64x. Abkürzungen: AC = Wechselstrom, Ri = Eingangswiderstand, mV = Millivolt, Ω = Ohm, s/div = Sekunden pro Division. Diese Abbildung wurde mit Daten aus Cooper et al.27 erstellt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/66877fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzusehen.</a>

Es werden Verfahren zur Untersuchung des Sondierungs- und Verschluckungsverhaltens von Culex tarsalis-Mücken an menschlichen Händen mittels AC-DC-Elektropenetrographie beschrieben.

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