Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
एक इंट्राड्यूक्टल इंजेक्शन एक इंजेक्शन मिश्रण देने की एक तकनीक है जिसमें कैंसर की कोशिकाएं, अभिव्यक्ति वैक्टर, या एक चिकित्सीय एजेंट हो सकता है जो स्तन ग्रंथि की नलिकाओं में ट्रेसर डाई के साथ पूरक होता है।
इस प्रक्रिया के लिए, इंजेक्शन मिश्रण के साथ एक सिरिंज लोड करें। इसके बाद, एक एनेस्थेटाइज्ड माउस वेंट्रल साइड को सर्जिकल बेड पर रखें। स्तन ग्रंथियों की इंजिनीनल या पांचवीं जोड़ी के बीच त्वचा पर चीरा लगाएं। डक्टल ट्री की कल्पना करने के लिए त्वचा के फ्लैप को पैरीटल पेरिटोनम से सावधानी से अलग करें।
संदंश का उपयोग करना, निप्पल उठाएं और डक्ट खोलने को देखने के लिए सावधानी से अपने बाहरी हिस्से को काट लें। त्वचा फ्लैप के किनारे को उठाने के लिए चिमटी का उपयोग करें, और इंजेक्शन मिश्रण देने के लिए धीरे-धीरे सिरिंज सुई को निप्पल में डालें। मैमेरी डक्टल पेड़ में ट्रेसर डाई के आंदोलन की निगरानी करें। डाई स्ट्रोमा में लीक किए बिना डक्टल पेड़ में फैलता है, जो एक सफल इंजेक्शन का संकेत देता है।
बिखराव से बचने के लिए कुछ सेकंड तक रुकें, फिर धीरे-धीरे इंजेक्शन साइट से सुई निकाल लें। घाव क्लिप के साथ चीरा बंद करो। निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हम माउस स्तन ग्रंथि में एडेनोवायरस व्यक्त करने के लिए इंट्राडक्टल इंजेक्शन का प्रदर्शन करेंगे।
सर्जिकल प्रक्रिया के दौरान aseptic तकनीकों का उपयोग करें। दो चौथे इंजिनियल स्तन ग्रंथियों के बीच लगभग एक सेंटीमीटर की लंबाई में त्वचा पर एक चीरा साइट बनाएं। ध्यान से त्वचा फ्लैप को पार्श्व पेरिटोनम से अलग करें, ताकि स्तन डक्टल पेड़ की कल्पना की जा सके।
ध्यान से एक सूक्ष्म विच्छेदन कैंची का उपयोग कर किसी भी पास की त्वचा को काटने के बिना बाहरी निप्पल को हटाने के लिए watchmakers संदंश के साथ निप्पल पकड़ो । एक ३३ गेज धातु हब सुई चिपका के साथ एक 25 माइक्रोलीटर हैमिल्टन सिरिंज में क्रे एडेनोवायरस इंजेक्शन मिश्रण के लगभग तीन से पांच माइक्रोलीटर लोड ।
मिश्रण में शामिल नीले रंग के आधार पर सिरिंज में इंजेक्शन मिश्रण की मात्रा का अनुमान लगाएं। धीरे-धीरे एक ठीक घुमावदार चिमटी के साथ त्वचा फ्लैप के किनारे पकड़ें और स्तन डक्टल पेड़ में नीले रंग के प्रसार की निगरानी करते हुए क्रे एडेनोवायरस इंजेक्शन मिश्रण को धीरे-धीरे निप्पल में इंजेक्ट करें। डक्टल ल्यूमेन को नुकसान से बचने के लिए इंजेक्शन की दर को यथासंभव धीमा बनाए रखें।
एक सफल इंट्राडक्टल इंजेक्शन स्ट्रोमल डिब्बे में लीक किए बिना पूरे डक्टल पेड़ भर में फैलने वाले इंजेक्शन तरल पदार्थ द्वारा इंगित किया जाता है। इंजेक्शन तरल पदार्थ के किसी भी रिसाव से बचने के लिए धीरे-धीरे निप्पल से सुई वापस लें। मैमेरी ग्रंथि या इंजेक्शन निप्पल के आसपास के क्षेत्र के डिस्टल साइड की जांच करें।
पास के स्ट्रोमा में डाई डिफ्यूजिंग, जैसा कि यहां दिखाया गया है, एक सफल इंट्राडक्टल इंजेक्शन के बजाय एक स्तन वसा पैड इंजेक्शन इंगित करता है। सर्जिकल घावों और त्वचा को घाव क्लिप के साथ बंद करें।
संज्ञाहरण से माउस निकालें और वसूली के लिए एक साफ पिंजरे के अंदर एक हीटिंग पैड पर जगह है। पाठ प्रोटोकॉल में वर्णित स्तन ट्यूमर के विकास की निगरानी करें।