Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 4:02 min. • April 30th, 2023
Las neuroesferas son agregados esféricos no adherentes de células precursoras neuronales o NPC.
Cuando se siembran en condiciones específicas de cultivo adherente, las NPC pueden migrar espontáneamente fuera de la neurosfera.
Para evaluar la respuesta migratoria de las NPC, primero, prepare una suspensión de NPC de la densidad deseada en un medio adecuado.
A continuación, siembre la suspensión celular en una placa de cultivo que contenga medios e incube.
Los factores de crecimiento específicos en el medio apoyan la proliferación de células. Además, la ausencia de un sustrato de recubrimiento mantiene las células suspendidas en los medios, lo que les facilita formar agregados celulares 3D llamados neuroesferas.
Al alcanzar el tamaño deseado, recolecte las neuroesferas.
Centrifugar y volver a suspender el gránulo de neuroesfera en el medio diluido.
Luego, coloque la suspensión de la neuroesfera en una placa recubierta de matriz extracelular que contenga medios diluidos e incube.
Durante el cultivo, las neuroesferas se adhieren a la matriz extracelular.
Con el tiempo, debido a los componentes de la matriz extracelular, algunas NPC comienzan a migrar lejos del núcleo de la neuroesfera.
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