Microscopía de fluorescencia intravital para estudiar la formación de trombos microvasculares
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 5:54 min. • July 8th, 2025
La microscopía de fluorescencia intravital es útil para estudiar la inducción fototóxica de la formación de un trombo (un coágulo de sangre) en el sitio de una lesión microvascular.
Comience tomando un ratón sin pelo anestesiado inyectado con un polisacárido fototóxico marcado con fluoróforo. Coloque el ratón en posición prona sobre una plataforma de calentamiento para mantener la temperatura fisiológica para una correcta circulación sanguínea.
Coloque la parte apical de la oreja bajo un microscopio de fluorescencia intravital. Tras la excitación con luz, el fluoróforo emite fluorescencia, lo que permite monitorear el flujo sanguíneo microvascular. Aumente la intensidad de la luz para inducir la formación de trombos.
El fluoróforo absorbe la luz de alta intensidad y reacciona con el oxígeno molecular para generar especies reactivas de oxígeno. Estas moléculas causan estrés oxidativo en las células endoteliales, lo que conduce al daño celular y la exposición de la matriz subendotelial.
Las células dañadas liberan mediadores trombóticos que unen el colágeno expuesto en la matriz subendotelial y las plaquetas circulantes, que se unen a los mediadores a través de receptores específicos
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