Inducción de enterocolitis necrotizante en modelo enteroide epitelial humano

Obtener criptas derivadas del tejido del intestino delgado humano: invaginaciones tubulares que contienen células madre y varios tipos de células epiteliales.

Agregue las criptas intestinales en una matriz basal fría.

Transfiera esta mezcla a una placa de pocillos múltiples, creando una cúpula tridimensional.

Agregue el medio de crecimiento e incube.

Las células madre se autoorganizan, proliferan y se diferencian en múltiples tipos de células intestinales, formando enterosferas.

Con el tiempo, las enterosferas maduran y se convierten en enteroides, estructuras tridimensionales que se renuevan a sí mismas, que se asemejan a las criptas intestinales.

Agregue lipopolisacáridos, o LPS, una endotoxina bacteriana, en el pocillo que contiene enteroides e incube.

Las moléculas de LPS se unen al receptor tipo toll en el enteroide, iniciando una respuesta proinflamatoria, lo que resulta en la acumulación de especies reactivas de oxígeno. Esto desencadena una cascada de eventos que conducen a la apoptosis.

En consecuencia, la integridad del enteroide se ve comprometida, lo que lleva a la penetración de LPS en la luz, intensificando aún más la respuesta inflamatoria.

Esto imita el desarrollo d