Falta de verificación en la industria farmacéutica debido a la suciedad de la superficie de acero inoxidable de limpieza

El objetivo general de este trabajo es obtener recuperaciones altas y reproducibles de residuos farmacéuticos de la superficie de cupones de acero inoxidable mediante la aplicación de las mejores prácticas para el desarrollo de métodos de limpieza analítica para moléculas pequeñas, proteínas terapéuticas y anticuerpos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la verificación de la limpieza en la industria farmacéutica, como por qué falla la verificación de la limpieza de los equipos de fabricación. La principal ventaja de este estudio es que muestra el procedimiento para limpiar adecuadamente la superficie de los cupones de acero inoxidable utilizados para la validación del método analítico.

Para comenzar este experimento, prepare soluciones de muestra del medicamento disueltas en el diluyente de elección después de calcular el límite de limpieza para un medicamento. Limpie los cupones de acero inoxidable enjuagando con agua y limpiando la superficie dos veces durante 10 a 15 segundos. Luego, repita este paso de enjuague y limpieza con metanol para eliminar cualquier depósito residual.

Para realizar el enfoque de limpieza avanzada utilizando soluciones de limpieza in situ, sumerja los cupones en cromatografía líquida de alta resolución o agua de grado HPLC y sonicate durante dos minutos. Sumerja los cupones en una solución de detergente alcalino al 0,1 % en agua de grado HPLC y sonique durante dos minutos. Vuelve a sumergir los cupones en agua de HPLC y repite dos minutos de sonicación.

A continuación, sumérjalos en una solución de detergente ácido al 0,1% en agua HPLC y sonique durante dos minutos. Termine con dos minutos de sonicación en agua HPLC. A continuación, con una cinta adhesiva de doble cara, monta los cupones de acero inoxidable en la parte inferior de un vaso de plástico de 250 mililitros.

Sostenga el vaso de precipitados durante el procedimiento para facilitar la colocación de clavos y frotados y para evitar accidentes. Utilice una pipeta de desplazamiento positivo para infundir un volumen de fármaco definido, a una concentración y formulación deseadas, en un patrón giratorio en la superficie del cupón. Una vez que la superficie del cupón esté seca, sumerja un hisopo seco en un vial con dos mililitros de diluyente.

Presione el hisopo contra el interior del vial para eliminar el exceso de solvente. Use trazos uniformes y superpuestos de lado a lado para limpiar firmemente la superficie del cupón con un lado del hisopo húmedo, hasta que se limpie el área total de prueba de 50 centímetros cuadrados. Use el mismo lado del hisopo para repetir el proceso de limpieza.

Frote cada uno de los cuatro bordes del cupón dos veces. Gire el cupón 90 grados y use el otro lado del hisopo, ahora girando la dirección de limpieza en 90 grados. Repita la limpieza usando este lado del hisopo de la misma manera, asegurándose de limpiar los cuatro bordes del cupón dos veces.

Después de limpiar la superficie, use unas tijeras para cortar la cabeza del hisopo en el vial de solvente. Después de eso, repita todo el procedimiento de hisopado con un segundo hisopo, mientras gira el cupón 90 grados hacia la misma dirección elegida anteriormente. A continuación, sonique el vial que contiene dos cabezales de hisopo durante cinco minutos.

A continuación, agite el vial durante 10 segundos. Finalmente, transfiera la solución a un vial de HPLC y etiquételo como la solución de trabajo. Para recuperar la muestra, prepare las soluciones de control mezclando 200 microlitros de cada cupón o solución de muestra con 1.800 microlitros de diluyente.

Utilice estas soluciones para ejecutar la cromatografía de acuerdo con el protocolo de texto. Calcule la recuperación de la solución de trabajo del hisopo en función del área relativa bajo los picos de las soluciones de trabajo y control. Repita este proceso para tres cupones para calcular la recuperación promedio y la desviación estándar relativa.

Antes de que se limpiaran los cupones, los resultados de recuperación para los diferentes niveles de pico eran inconsistentes, independientemente del ingrediente farmacéutico activo o la proporción de excipientes API, diferentes analistas o incluso días diferentes para el mismo analista. La mayoría de los resultados de recuperación tuvieron una desviación estándar relativa alta. La variabilidad observada en la recuperación no se eliminó cuando se ajustaron varios parámetros diferentes, incluyendo la técnica de hisopado, el diluyente, el solvente de spiking, el pH de la espiga y el diluyente, la técnica de spiking y la técnica de extracción.

La diferencia entre la recuperación individual en cada superficie de cupón y la recuperación promedio muestra que la recuperación promedio es diferente de una superficie de cupón a otra, por lo tanto, es muy probable que la variabilidad observada provenga de las diferencias entre las superficies de cupón. Después de seguir la limpieza de cupones descrita en este protocolo, los resultados de recuperación fueron reproducibles de un ensayo a otro, con una diferencia mínima en la recuperación entre los cupones. La limpieza de cupones realizada aquí resultó en recuperaciones superiores al 90%Además, los valores de desviación estándar relativa para cada nivel de pico fueron aceptables y menores que los resultados obtenidos antes de la limpieza.

Una vez dominados, la limpieza de los cupones se puede realizar en menos de 30 minutos, si se realiza correctamente. Al intentar este procedimiento, es importante recordar cómo aumentar y recuperarse correctamente sin perder el análisis de interés. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo limpiar correctamente las superficies de acero inoxidable para obtener recuperaciones altas y reproducibles de los residuos.

Tras su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores de la industria farmacéutica proporcionaran datos de limpieza fiables para los procesos de fabricación.