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Enfoques de visualización y análisis tridimensionales y de cuatro dimensiones para estudiar la el...
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JoVE Journal Developmental Biology
Three and Four-Dimensional Visualization and Analysis Approaches to Study Vertebrate Axial Elongation and Segmentation

Enfoques de visualización y análisis tridimensionales y de cuatro dimensiones para estudiar la elongación y segmentación axial de vertebrados

Full Text
4,162 Views
12:59 min
February 28, 2021

DOI: 10.3791/62086-v

André Dias1, Gabriel G. Martins1,2, Alexandre Lopes1,3, Moisés Mallo1

1Instituto Gulbenkian de Ciência, 2Faculdade de Ciências da Universidade de Lisboa, 3NOVA School of Science and Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí, describimos herramientas y métodos computacionales que permiten la visualización y el análisis de datos de imágenes tridimensionales y cuatridimensionales de embriones de ratón en el contexto de la elongación y segmentación axial, obtenidos por tomografía de proyección óptica in toto, y por imágenes en vivo y tinción de inmunofluorescencia de montaje completo mediante microscopía multifotónica.

Las etapas de organogénesis en los embriones de ratón permanecen poco estudiadas en parte debido a la difícil visualización de las estructuras complejas del embrión. Este protocolo describe técnicas que permiten la visualización y análisis 3D y 4D de embriones de ratón durante la extensión y segmentación axial. La principal ventaja de esta técnica es que permite a los investigadores estudiar y mostrar las complejas estructuras del embrión de ratón como objetos dinámicos en 3D.

Este protocolo contiene técnicas que pueden ser utilizadas en el estudio de malformaciones congénitas que afectan a la vértebra y la médula espinal de los mamíferos, como la escoliosis. Estas técnicas también se pueden utilizar con sistemas modelo in vitro, lo que permite el estudio del desarrollo embrionario humano. Para preparar embriones de ratón entre el día embrionario 8.25 y el día embrionario 10.5 para imágenes en vivo, diseccionar los embriones en medio M2 precalentado a 37 grados centígrados.

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Biología del desarrollo Número 168 Reconstrucción 3D imágenes en vivo vertebrados desarrollo embrionario de ratón somitogénesis mesodermo extensión axial NMP inmunofluorescencia técnicas de limpieza análisis de imágenes enseñanza.

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