Cultivo y manipulación genética de nematodos entomopatógenos

Un protocolo eficiente para mantener y amplificar el nematodo entomopatógeno es esencial para comprender las bases moleculares de la patogenicidad de los nematodos y la inmunidad anti-nematodos del huésped. Este protocolo nos permite producir un alto número de Heterorhabditis bacteriophora simbiótica y axénica y Steinernema carpocapsae IJs utilizando el huésped insecto, Galleria mellonella. Comience cubriendo la placa de Petri con un trozo de papel de filtro y agregue aproximadamente de 10 a 15 larvas de Galleria mellonella.

Usando una pipeta, dispense dos mililitros de agua que contengan alrededor de 25 a 50 juveniles infecciosos por cada 10 microlitros de suspensión sobre los gusanos de cera. Y guarde la placa de Petri en un gabinete a temperatura ambiente. Dependiendo de la humedad del papel de filtro, agregue de uno a dos mililitros de agua cada dos días.