Name: Microscopía de expansión ultraestructural en tres etapas del ciclo de vida in vitro de Trypanosoma cruzi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-12T14:50:00.000+00:00
Duration: 9 min 45 s
Description: Aprende microscopía de expansión ultraestructural para estudiar Trypanosoma cruzi en sus tres etapas del ciclo de vida in vitro. Este método permite reconstrucciones tridimensionales de alta resolución de estructuras celulares.

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<meta charset="utf8"></head><body>Microscopía de expansión ultraestructural en el ciclo de vida in vitro de Trypanosoma cruzi

<ol><li>Chen, F., Tillberg, P. W., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy.</a> Science. 347 (6221), 543-548 (2015).</li>
<li>Chozinski, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+with+conventional+antibodies+and+fluorescent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy with conventional antibodies and fluorescent proteins.</a> Nature Methods. 13 (6), 485-488 (2016).</li>
<li>Ku, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+and+scalable+super-resolution+imaging+of+three-dimensional+protein+localization+in+size-adjustable+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Multiplexed and scalable super-resolution imaging of three-dimensional protein localization in size-adjustable tissues.</a> Nature Biotechnology. 34 (9), 973-981 (2016).</li>
<li>Gambarotto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cellular+ultrastructures+using+expansion+microscopy+%28U-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging cellular ultrastructures using expansion microscopy (U-ExM).</a> Nature Methods. 16 (1), 71-74 (2018).</li>
<li>Tillberg, P. W., Chen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy%3A+Scalable+and+convenient+super-resolution+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy: Scalable and convenient super-resolution microscopy.</a> Annual Review of Cell and Developmental Biology. 35, 683-701 (2019).</li>
<li>Jurriens, D., van Batenburg, V., Katrukha, E. A., Kapitein, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+neuronal+cytoskeleton+using+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Mapping the neuronal cytoskeleton using expansion microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 161, 105-124 (2021).</li>
<li>Alonso, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+in+Trypanosoma+cruzi%3A+localization+of+tubulin+isoforms+and+isotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology+Research%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) in Trypanosoma cruzi: localization of tubulin isoforms and isotypes.</a> Parasitology Research. 121 (10), 3019-3024 (2022).</li>
<li>Kalichava, A., Ochsenreiter, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biology%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy in Trypanosoma brucei.</a> Open Biology. 11 (10), 210132(2021).</li>
<li>Amodeo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+novel+mitochondrial+genome+segregation+factor+TAP110+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of the novel mitochondrial genome segregation factor TAP110 in Trypanosoma brucei.</a> Journal of Cell Science. 134 (5), (2021).</li>
<li>Liffner, B., Absalon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+reveals+plasmodium+falciparum+blood-stage+parasites+undergo+anaphase+with+a+chromatin+bridge+in+the+absence+of+mini-chromosome+maintenance+complex+binding+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy reveals plasmodium falciparum blood-stage parasites undergo anaphase with a chromatin bridge in the absence of mini-chromosome maintenance complex binding protein.</a> Microorganisms. 9 (11), 2306(2021).</li>
<li>Dos Santos Pacheco, N., Soldati-Favre, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+auxin-inducible+degron+system+with+ultrastructure+expansion+microscopy+to+accelerate+the+discovery+of+gene+function+in+Toxoplasma+gondii%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Coupling auxin-inducible degron system with ultrastructure expansion microscopy to accelerate the discovery of gene function in Toxoplasma gondii.</a> Methods in Molecular Biology. 2369, 121-137 (2021).</li>
<li>Lidani, K. C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chagas+disease%3A+From+discovery+to+a+worldwide+health+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Chagas disease: From discovery to a worldwide health problem.</a> Frontiers in Public Health. 7, 166(2019).</li>
<li>Carrea, A., Diambra, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systems+biology+approach+to+model+the+life+cycle+of+Trypanosoma+cruzi%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Systems biology approach to model the life cycle of Trypanosoma cruzi.</a> PloS One. 11 (1), e0146947(2016).</li>
<li>Vidal, J. C., De Souza, W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVidal%2C+JC+%22Morphological+and+Functional+Aspects+of+Cytoskeleton+of+Trypanosomatids.+Cytoskeleton+-+Structure%2C+Dynamics%2C+Function+and+Disease%22">Morphological and Functional Aspects of Cytoskeleton of Trypanosomatids. Cytoskeleton - Structure, Dynamics, Function and Disease</a>. , InTech. (2017).</li>
<li>Kunz, T. C., Götz, R., Gao, S., Sauer, M., Kozjak-Pavlovic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+expansion+microscopy+to+visualize+and+characterize+the+morphology+of+mitochondrial+cristae%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Using expansion microscopy to visualize and characterize the morphology of mitochondrial cristae.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 617(2020).</li>
<li>Laporte, M. H., Klena, N., Hamel, V., Guichard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+native+cellular+organization+by+coupling+cryofixation+with+expansion+microscopy+%28Cryo-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Visualizing the native cellular organization by coupling cryofixation with expansion microscopy (Cryo-ExM).</a> Nature Methods. 19 (2), 216-222 (2022).</li>
<li>Sahabandu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+for+the+analysis+of+centrioles+and+cilia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microscopy%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy for the analysis of centrioles and cilia.</a> Journal of Microscopy. 276 (3), 145-159 (2019).</li>
<li>Wen, G., Leen, V., Rohand, T., Sauer, M., Hofkens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+progress+in+expansion+microscopy%3A+chemical+strategies+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Current progress in expansion microscopy: chemical strategies and applications.</a> Chemical Reviews. 123 (6), 3299-3323 (2023).</li>
<li>Trinks, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subdiffraction-resolution+fluorescence+imaging+of+immunological+synapse+formation+between+NK+cells+and+A.+fumigatus+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Communications+Biology%22%5BJournal%5D)">Subdiffraction-resolution fluorescence imaging of immunological synapse formation between NK cells and A. fumigatus by expansion microscopy.</a> Communications Biology. 4 (1), 1151(2021).</li>
<li>White, B. M., Kumar, P., Conwell, A. N., Wu, K., Baskin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Lipid expansion microscopy.</a> Journal of the American Chemical Society. 144 (40), 18212-18217 (2022).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TissUExM+enables+quantitative+ultrastructural+analysis+in+whole+vertebrate+embryos+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports+Methods%22%5BJournal%5D)">TissUExM enables quantitative ultrastructural analysis in whole vertebrate embryos by expansion microscopy.</a> Cell Reports Methods. 2 (10), 100311(2022).</li>
<li>Shaib, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+proteins+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Visualizing proteins by expansion microscopy.</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>M'Saad, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-optical+visualization+of+specific+molecules+in+the+ultrastructural+context+of+brain+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">All-optical visualization of specific molecules in the ultrastructural context of brain tissue.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Filtros de jeringa estériles de 0,22 micrómetros PES</td><td>Soluciones de membrana</td><td>SFPES030022S</td><td></td></tr><tr><td>vaso de precipitados de 1 L</td><td>Schott Duran</td><td>10005227</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL Tubo de microcentrífuga SPINWIN</td><td>Tarson</td><td>T38-500010</td><td></td></tr><tr><td>10 mL serynge estéril desechable</td><td>NP</td><td>66-32</td><td></td></tr><tr><td>10 mL pipeta serológica estéril</td><td>Jet Biofil</td><td>GSP211010</td><td></td></tr><tr><td>Cubreobjetos de 12 mm</td><td>Merienfeld GmbH</td><td>01 115 20</td><td>Cubrecubreobjetos redondos</td></tr><tr><td>Placas de 12 pocillos</td><td>Jet Biofil</td><td>TCP011012</td><td></td></tr><tr><td>cubreobjetos de 22 mm</td><td>Corning</td><td>2845-22</td><td>Cubreobjetos cuadrados</td></tr><tr><td>Placas de 24 pocillos</td><td>Jet Biofil</td><td>TCP-011-024</td><td></td></tr><tr><td>Vaso de precipitados de 250 mL</td><td>Schott Duran</td><td>C108.1</td><td></td></tr><tr><td>3 mL Pasteur pipeta</td><td>Deltalab</td><td>200037</td><td></td></tr><tr><td>platos con fondo de vidrio de 35 mm</td><td>Matsunami glass ind</td><td>D11130H</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-Diamidine-2&prime;-fenilindol diclorhidrato</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9542</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>5 ml pipeta serológica estéril</td><td>Jet Biofil</td><td>GSP010005</td><td></td></tr><tr><td>placas de 6 pocillos</td><td>Sarstedt</td><td>83.3920</td><td></td></tr><tr><td>Acrilamida</td><td>BioRad</td><td>1610101</td><td></td></tr><tr><td>Persulfato de amonio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3678-25G</td><td>APS</td></tr><tr><td>ATTO 647 NHS ester</td><td>BOC Sciences</td><td>F10-0107</td><td>Para el etiquetado panproteoma</td></tr><tr><td>Biosafty Cabinet</td><td>Telstar</td><td>Bio II A/P</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina sódica bovina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7906</td><td>BSA</td></tr><tr><td>Incubadora de CO2</td><td>Sanyo</td><td>MCO-15A</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio Confocal</td><td>Zeiss</td><td>LSM 880</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petris Desechable</td><td>Tarsons</td><td>460095</td><td>90 mm de diámetro</td></tr><tr><td>DMEM, Alta Glucosa</td><td>Polvo de 12100046 Fisher Cientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Calibrador digital electrónico</td><td>Radar</td><td>RADAR-SLIDE-CALIPER</td><td></td></tr><tr><td>Etanol Absoluto</td><td>Supelco</td><td>1,00,98,31,000</td><td></td></tr><tr><td>Suero de pantorrilla fetal</td><td>Internegocios SA</td><td>FCS FRA 500</td><td>Estéril e inactivado por calor</td></tr><tr><td>Paquete de procesamiento de imágenes Fiji</td><td>ImageJ</td><td></td><td>doi:10.1038/nmeth.2019</td></tr><tr><td>Formaldehído 37%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8775</td><td>FA</td></tr><tr><td>Vidrio Petridish</td><td>Marienfeld Superior</td><td>PM-3400300</td><td>60 mm de diámetro</td></tr><tr><td>Glucosa D(+)</td><td>Cicarelli</td><td></td><td></td>716214</tr><tr><td>Glutaraldehído 70%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G7776</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario IgG anti-ratón de cabra Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-21422</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario IgG anti-conejo de cabra FICT</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>115-095-003</td><td></td></tr><tr><td>Cilindro graduado</td><td>Nalgene</td><td>3663-1000</td><td></td></tr><tr><td>Matraz</td> <td>de vidrio graduadoGlassco</td><td>GL-274.202.01</td><td>100 mL</td></tr><tr><td>Bloque calefactor</td><td>IBR</td><td></td><td>Hecho en casa</td></tr><tr><td>Hemin</td><td>Frontier Scientific</td><td>H651-9</td><td></td></tr><tr><td>Ácido clorhídrico 36.8-38.0%</td><td>Ciccarelli</td><td>918110</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Cubitera Corning</td><td>1167U68</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>Tecno Dalvo</td><td>TOC130</td><td></td></tr><tr><td>Infusión de hígado</td><td>Difco</td><td>226920</td><td></td></tr><tr><td>Agitador y calentador magnético</td><td>Compañero de laboratorio</td><td>HP-3000</td><td></td></tr><tr><td>Espátula metálica</td><td>SALTTECH</td><td>200MM</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas metálicas</td><td>Marienfeld Superior</td><td>PM-6633002</td><td></td></tr><tr><td>Metanol absolut</td><td>Cicarelli</td><td>897110</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de microcentrífuga 1,5 mL</td><td>Tarson</td><td>500010-N</td><td></td></tr><tr><td>Papel de grado microscópico KimWipes</td><td>Kimtech Science</td><td>B0013HT2QW</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de agua Milli-Q</td><td>Merk Millipore</td><td>IQ-7003</td><td></td></tr><tr><td>clon anti-alfa tubulina de ratón DM1A</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9026</td><td></td></tr><tr><td>anti-PFR de ratón Anticuerpos</td><td></td><td></td> purificados <td>Donados por el Dr. Ariel Silber (USP)</td></tr><tr><td>N,N&acute;-metilenabiracrilamida</td><td>ICN</td><td>193997</td><td>bis</td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Cicarelli</td><td>834214</td><td></td></tr><tr><td>Cámara Neubauer</td><td>Boeco</td><td>BOE 01</td><td></td></tr><tr><td>p1000 pipeta</td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P1000</td><td></td></tr><tr><td>p1000 puntas de pipeta</td><td>Tarson</td><td>TAR-521020B</td><td></td></tr><tr><td>pipeta p20</td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P20</td><td></td></tr><tr><td>p20 puntas de pipeta</td><td>Tarson</td><td>TAR-527108</td><td></td></tr><tr><td>p200 pipeta</td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P200</td><td></td></tr><tr><td>p200 puntas de pipeta</td><td>Tarson</td><td>TAR-521010Y</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P6148</td><td>PFA</td></tr><tr><td>pH / ORP / &deg; Medidor de C</td><td>HANNA Instruments</td><td>HI 2211</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D-Lisina 0.1%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8920</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de potasio</td><td>Cicarelli</td><td>867212</td><td>KCl</td></tr><tr><td>Hoja de afeitar</td><td>Printex</td><td>BS 2982:1992</td><td></td></tr><tr><td>Película de sellado "Parafilm M"</td><td>Bemis</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>Acrilato de sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>408220-25G</td><td>SA</td></tr><tr><td>Bicarbonato de sodio</td><td>Cicarelli</td><td>929211</td><td>NaHCO3</td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Cicarelli</td><td>750214</td><td>NaCl</td></tr><tr><td>Dodecil sulfato de sodio</td><td>BioRad 1610302</td><td></td><td>SDS</td></tr><tr><td>Hidróxido de sodio</td><td>Merk</td><td>1-06498</td><td>NaOH</td></tr><tr><td>Sorvall ST 16 Centrífuga</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>75004380</td><td></td></tr><tr><td>Matraces T-25</td><td>Corning</td><td>430639</td><td></td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Invitrogen</td><td>15524-010</td><td></td></tr><tr><td>Papel tisú</td><td>Elite</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triptosa Merck</td><td></td><td>1106760500</td><td></td></tr><tr><td>Tris</td><td>BioRad</td><td>1610719</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Biopack</td><td>2003-07</td><td>Polisorbato 20</td></tr><tr><td>Bomba</td> <td>de vacíoSilfab</td><td>N33-A Celdas</td><td></td></tr><tr><td>Vero</td><td>ATCC</td><td>CRL-1587</td><td></td></tr><tr><td>Vortex MIxer</td><td>Dragon Lab</td><td>MX-S</td><td></td></tr></tbody></table>

microscopía de expansión ultraestructural en tres etapas del ciclo de vida in vitro de trypanosoma cruzi

Ultrastructural Expansion Microscopy in Three In Vitro Life Cycle Stages of Trypanosoma cruzi

Si el protocolo se ha ejecutado correctamente (Figura 1), las muestras serán visibles como un gel plano y translúcido que puede expandirse hasta un factor de 4-4,5x en agua (Figura 3A). Esta expansión proporcionó una resolución efectiva de unos 70 nm, que puede variar dependiendo del factor de expansión final y del sistema de imagen empleado. Después del segundo proceso de expansión y adquisición de imágenes en un microscopio confocal, pudimos observar factores ...

Microscopía de expansión ultraestructural en tres etapas del ciclo de vida in vitro de Trypanosoma cruzi

We describe here the application of ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) in Trypanosoma cruzi, a technique that allows increasing the spatial ...

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Investigación

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Biología

En este protocolo, fluorescencia etiquetada T. cruzi fueron inyectadas en larvas de pez cebra transparente y motilidad del parásito fue observada en vivo usando microscopía de fluorescencia de la ficha técnica de iluminación.

Establecimiento de pez cebra Larval como modelo Animal para investigar Trypanosoma cruzi motilidad En Vivo

El agente Trypanosoma cruzi enfermedad de Chagas produce infecciones asintomáticas de larga duración que convertirse abruptamente en patología clínicamente reconocida. El siguiente protocolo de investigación describe un estudio epidemiológico de corto plazo basado en la familia para desentrañar la infección de T. cruzi transmitida sexual de los padres a la progenie.

Transmisión sexual de tripanosomas americanos de machos y hembras a compañeros de ingenua

Aquí, describimos un protocolo para introducir un knockout genético en el amastigote extracelular de Trypanosoma cruzi, utilizando el sistema CRISPR/Cas9. El fenotipo de crecimiento puede ser seguido ya sea por el recuento celular de la cultura axenic amastigote o por la proliferación de amastigotes intracelulares después de la invasión de la célula huésped.

Introducción de un Knockout Gene Directamente en la etapa de Amastigote de Trypanosoma cruzi usando el sistema CRISPR/Cas9

Describimos un ensayo colorimétrico de alto rendimiento que mide la actividad de la β-galactosidasa en tres etapas del ciclo de vida de Trypanosoma cruzi, el agente causal de la enfermedad de Chagas. Este ensayo se puede utilizar para identificar compuestos tripanocidas de una manera fácil, rápida y reproducible.

In vitro Detección de drogas contra todas las etapas del ciclo de vida de Trypanosoma cruzi utilizando parásitos que expresan β-galactosidasa

El presente protocolo describe la microscopía fluorescente de lámina de luz y los métodos automatizados asistidos por software para visualizar y cuantificar con precisión los parásitos Trypanosoma cruzi proliferantes y latentes y las células T en órganos y tejidos intactos y despejados. Estas técnicas proporcionan una forma confiable de evaluar los resultados del tratamiento y ofrecen nuevos conocimientos sobre las interacciones parásito-huésped.

Imágenes cuantitativas en 3D de células infectadas por Trypanosoma cruzi, amastigotes latentes y células T en órganos aclarados intactos

El protocolo proporcionado aquí describe los pasos detallados para realizar estudios de eficacia de fármacos en un modelo bioluminiscente de infección por Trypanosoma cruzi , con un enfoque en la adquisición, análisis e interpretación de datos. También se proporcionan procedimientos de solución de problemas y control de calidad para minimizar los problemas técnicos.

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La naturaleza de las interacciones entre las células madre hematopoyéticas y progenitoras (hspCs) y nichos de la médula ósea es poco conocido. Modificaciones de hardware personalizados y un protocolo de adquisición de múltiples pasos permiten el uso de dos fotones y microscopía confocal a la imagen ex vivo HSPCs etiquetados alojados dentro de las áreas de la médula ósea, las interacciones de seguimiento y el movimiento.

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