이 비디오는 구애 컨디셔닝이라고 불리는 드로소필라에서학습과 기억을 테스트하는 고전적인 컨디셔닝 분석법을 설명합니다. 분석은 수용하지 않는 예제 여성에 의해 거부를 경험 한 후 남성 구애의 감소에 기초한다. 예제 프로토콜은 단기 및 장기 메모리를 평가하는 데 사용할 수 있는 절차에 대한 설정을 보여 주습니다.
Protocol
이 프로토콜은 Koemans 외. Drosophila 구애 컨디셔닝 학습 및 기억의 척도로 발췌, J. Vis. Exp. (2017). 참고: 아래에 설명된 프로토콜에서 수집, 교육 및 테스트의 복제본이 설명되어 있습니다. 결과의 재현성을 테스트하기 위해, 이러한 단계는 여러 일에 병렬로 반복되어야하며, 별도의 플라이그룹(표 1)을사용해야 한다. 이 프로?…
Representative Results
그림 1: 구애 지수 결정 및 실험 개요. (A)여성 비행을 향한 고정관념적인 남성 구애 동작을 보여주는 이미지. 구애 행동의 다른 단계가 표시됩니다 : 방향 (I), 다음 (II), 날개 진동 (확장) 및 도청 (III), 핥기 (IV), 시도 된 교합 (V). (B)인큐베이터 광 사이클에 비해 교육 및 테스트…
Materials
P{KK101437}VIE-260B
VDRC
101437
Dhat-at-RNAi in 60100 background
P{KK108109}VIE-260B
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Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman)
w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III)
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panneuronal driver line
Containers for plant tissue culture
VWR
960177
175 mL plastic vials
Folded filters
Whatman
10311643
Filter paper to enlarge area flies can pupate on
Flat-bottom blocks (96-wells)
Qiagen
19579
Used for housing blocks
MicroAmp Clear Adhesive Film
Applied Biosystems
4306311
PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks
Razor blade
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Any sharp will do
Needle
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0.8 mm diameter
Aspirator
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Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose.
Courtship chambers
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file S1 can be opened with indicated CAD software
Camcorder
Sony
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camera specification: >4M pixels, full HD.
For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired.