סרטון זה מתאר כיצד להטמיע ראשי דרוזופילה בפרפין בשיטת הצווארון, טכניקה שמכינה ראשים מעופפים לקטעים סדרתיים. קטעי פרפין משמשים לבדיקות היסטולוגיות של האנטומיה של המוח ולהערכת ניוון עצבי. הפרוטוקול המוצג מדגים כיצד ניתן לעבד זבובים מרובים בהכנה אחת, ובכך להגדיל את יעילות הזמן ולצמצם חפצים ניסיוניים.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך סנדרהאוס וקרצ’מר, היסטולוגיה המונית לכמת ניוון עצבי בדרוסופילה, J. Vis. Exp. (2016). 1. תיקון הראש על צווארונים והטבעה בפרפין שים לב: כל השלבים בתהליך הקיבעון צריכים להיעשות בברדס אדים. מתילבנזואט,…
Representative Results
איור 1: מקטעים טוריים של פרפין. א) באמצעות שיטת הצווארון, זבובים ניסיוניים ובקרה יכולים להיות מעובדים כדוגמה אחת על ידי השחלתם על צווארון אחד. זבובים סינוס oculis ללא עיניים מוכנסים עבור כיוון (חצים). ב) סכמטי המציג א…
Materials
Collar
Genesee Scientific
TS 48-100
We are using custom made collars that are made from one piece of metal instead of layers as the ones by Genesee.
Rubber ice cube tray for embedding
Household store
The size can be made-to-fit by glueing in additional walls
Crystallizing dish
Fisher Scientific Company
08-762-3
Ether
Fisher Scientific Company
E138-1
Ethanol
Decon Laboratories Inc.
2701
Choloroform
Fisher Scientific Company
C298-500
Glacial Acetic Acid
Fisher Scientific Company
A38-212
Methylbenzoate
Fisher Scientific Company
M205-500
Distinct Odor – Use in fume hood!
Low Melting Point Paraffin Wax
Fisher Scientific Company
T565
Make sure to keep extra melted in a 65 °C waterbath