Summary
जबकि सांस की नली इंटुबैषेण के साथ एक वेंटीलेटर के प्रयोग को नष्ट न्यूनतम इनवेसिव अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (MTAC) नियमित रूप से अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (टीएसी) की अनिवार्य संरक्षण। यह बाएं निलय अधिभार, विशेष रूप से translational अध्ययन में उच्च throughput अध्ययन के लिए एक उच्च वांछनीय विधि साबित होता है।
Abstract
न्यूनतम इनवेसिव अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (MTAC) मानक खुली छाती अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (टीएसी) की तुलना में चूहों में अनुप्रस्थ महाधमनी के कसना के लिए एक अधिक वांछनीय विधि है। हालांकि अनुप्रस्थ महाधमनी कसना बाएं वेंट्रिकल में उच्च दबाव के शामिल होने के लिए एक अत्यधिक कार्यात्मक विधि है, यह सांस की नली इंटुबैषेण के साथ कृत्रिम वेंटीलेशन के अपने प्रयोग के कारण एक और अधिक कठिन और लंबी प्रक्रिया है। टीएसी बार बार भी कम survivable, नए विधि, MTAC के रूप में है, न तो एक वेंटिलेशन स्थापना के साथ पसलियों और पसलियों के बीच मांसपेशियों और न ही सांस की नली इंटुबैषेण के काटने की आवश्यकता है। MTAC में, जैसा कि छाती गुहा के लिए उपयोग करने के लिए एक thoracotomy करने का विरोध किया, महाधमनी चाप पूर्वकाल गर्दन में एक midline चीरा के माध्यम से पहुँच जाता है। थायराइड sternal पायदान प्रकट करने के लिए वापस खींच लिया है। उरोस्थि बाद में दूसरी पसली के स्तर तक नीचे कट जाता है, और महाधमनी चाप संयोजी ऊतक और थाइमस अलग से बस तक पहुँच जाता है। सेवहाँ एक सिवनी मेहराब के चारों ओर लिपटा जा सकता है और एक स्पेसर के साथ बंधा हुआ है, और फिर स्टर्नल कटौती और त्वचा को बंद किया जा सकता है। MTAC एक बहुत तेजी से और कम आक्रामक तरीका बाएं निलय उच्च रक्तचाप के लिए प्रेरित करने के लिए है और उच्च throughput अध्ययन के लिए संभावना सक्षम बनाता है। कसना की सफलता के उच्च आवृत्ति ट्रांस-वक्ष इकोकार्डियोग्राफी, विशेष रूप से रंग डॉपलर और स्पंदित-लहर डॉपलर, का उपयोग कर महाधमनी चाप का प्रवाह वेग निर्धारित करने के लिए सत्यापित किया जा सकता है और छोड़ दिया और सही मन्या धमनियों, रक्त वाहिकाओं के आयाम, और बाएं निलय समारोह और आकृति विज्ञान। एक सफल कसना भी इस तरह के मध्य और परिवाहकीय फाइब्रोसिस के साथ हृदय की मांसपेशी सेल अतिवृद्धि के रूप में महत्वपूर्ण histopathological परिवर्तन, ट्रिगर किया जाएगा। इधर, MTAC की प्रक्रिया में वर्णित है, प्रदर्शन कैसे मन्या धमनियों में जिसके परिणामस्वरूप प्रवाह में परिवर्तन इकोकार्डियोग्राफी, सकल आकृति विज्ञान, और दिल में histopathological परिवर्तन के साथ जांच की जा सकती है।
Introduction
इस लेख के समग्र उद्देश्य कैसे प्रदर्शित करने के अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (टीएसी) चूहों में एक सरल और अधिक समीचीन सर्जरी का उत्पादन करने के लिए संशोधित किया जा सकता है। टीएसी पहले 1991 में शुरू की 1 और आणविक जीव सक्षम सेलुलर और आणविक मार्ग है कि चालाकी से जीनोम 2, 3, 4, 5, 6 के साथ बाएं वेंट्रिकल में और दिल की विफलता के लिए अतिवृद्धि के लिए नेतृत्व, विशेष रूप से छोटे जानवरों में अध्ययन करने के लिए किया गया था। वांछित दबाव अधिभार के उत्पादन में इसकी क्षमता के बावजूद, तकनीक अंततः प्रक्रिया के प्रदर्शन में और अपनी कम जीवित रहने की दर से कठिनाई द्वारा सीमित है। एक सर्जन टीएसी का आयोजन अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण, thoracotomy प्रदर्शन, और आदेश में फेफड़ों के पतन को रोकने के लिए 1 में कृत्रिम वेंटीलेशन का उपयोग करने में सक्षम होना चाहिए।
सामग्री "> बार बार, एक सरल और कम आक्रामक विधि वांछित है। एक परिणाम के रूप में, कम आक्रामक अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (MTAC) 3 तैयार किया गया था। हालांकि परिणाम (विशेष रूप से, बाएं निलय अतिवृद्धि) एक ही है, प्रक्रिया काफी कम apparatuses शामिल और पशुओं को कम नुकसान। MTAC एक वांछनीय विधि अधिक से अधिक जीवित रहने की दर है, 90% से ऊपर होना साबित करता है, और केवल 15 से 25 मिनट के लिए। सफल सर्जरी के बाद मौत का निराला मामलों के एक ऑपरेशन के समय भी के कारण हो सकता है महाधमनी चाप की -tight कसना, जबरदस्त बाएं निलय अधिभार और इस तरह के गुर्दे जैसे महत्वपूर्ण अंगों को रक्त की आपूर्ति की घातक कमी हो जाती है।प्रक्रिया पूर्ण होने के बाद, इकोकार्डियोग्राफी बैंडिंग और हृदय की आकृति विज्ञान और समारोह की सफलता का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। एक उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड प्रणाली व्यास मापने के लिए और छोड़ दिया और सही में परिवर्तन प्रवाह करने के लिए उपयोग किया जा सकताधमनियों मन्या, शिखर प्रवाह वेग मापन के लिए महाधमनी चाप कसना कल्पना करने के लिए, और बाएं वेंट्रिकल दीवार मोटाई और कार्यात्मक मापदंडों 7, 8 निर्धारित करने के लिए। इच्छामृत्यु के बाद, अंगों भी hematoxylin और eosin धुंधला और Picrosirius कोलेजन धुंधला के साथ histopathological अध्ययन के लिए एकत्र किया जा सकता उत्तरार्द्ध फाइब्रोसिस के अवलोकन के लिए विशेष रूप से उपयोगी किया जा रहा है।
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Protocol
प्रोटोकॉल हांगकांग विश्वविद्यालय में अध्यापन और अनुसंधान (CULATR) में जीवित पशुओं के उपयोग पर समिति के दिशा निर्देशों का पालन करती है।
1. ऑपरेशन साइट तैयार
- 75% isopropyl शराब के साथ आपरेशन साइट कीटाणुरहित। दिल में परिवर्तन और इस विषय जानवर की सांस की दरों से बचने के लिए 37 डिग्री सेल्सियस तक तापमान हीटिंग पैड को समायोजित करें।
- 30 मिनट के लिए या अन्य उपयुक्त तरीकों से 121 डिग्री सेल्सियस पर शल्य एक गुरुत्व विस्थापन अजीवाणु में निष्फल उपकरणों का प्रयोग करें।
- के रूप में चित्रा 1 में देखा 4 30 गेज सुई और उन्हें एक सुई धारक के साथ वक्र, बंधाव और ऊतकों को अलग करने के लिए और एक प्रतिकर्षक के रूप में उपयोग के लिए एक उपकरण बनाने के लिए - 2 लो। सर्जरी में इस्तेमाल के लिए एक कपास applicator पर अब घुमावदार सुई माउंट।
- एक 27 गेज सुई और वक्र यह सुई धारक के साथ 90 º मुँहफट। एक कठिन सतह मलाई बंधाव कदम में एक 0.4 एमएम स्पेसर बनाने के लिए टिप चिकना।
- एक 2 महीने की उम्र में, पुरुष, एक उचित ketamine और xylazine मिश्रण संबंध में शरीर के वजन के साथ 22-25 ग्राम C57BL / 6N माउस anesthetize: 100 मिलीग्राम / किग्रा + 10 मिलीग्राम / किग्रा आईपी नकारात्मक पूंछ चुटकी पलटा साथ anesthetization की पुष्टि ।
- लोमनाशक क्रीम की एक 2- करने के लिए 3 मिनट के आवेदन के साथ पूर्वकाल गर्दन और सीने पर बाल निकालें। गर्म पानी और एक कपास applicator के साथ क्रीम निकालें।
- जानवर की आंखों को नेत्र मरहम या जेल लागू कॉर्निया से बाहर सुखाने को रोकने के लिए।
- एक हीटिंग पैड पर पशु लापरवाह स्थिति में रखें और इंट्रा-ऑपरेटिव निगरानी का संचालन, हर 15 मिनट के अंतराल पर उचित दस्तावेज रखने के लिए सुनिश्चित किया जा रहा।
- आदेश में सर्जरी के दौरान सही स्थिति में पशु रखने के लिए हीटिंग पैड करने के अंगों को सुरक्षित करने के लिए शल्य चिकित्सा कागज टेप का प्रयोग करें।
- शराब और povidone आयोडीन समाधान तीन बार के साथ बारी-बारी से त्वचा कीटाणुरहित।
- एक बाँझ डॉ प्रयोग करेंएक उजागर ऑपरेशन क्षेत्र के साथ बंदर प्रदूषण को रोकने के। प्रत्येक माउस और आवश्यक के रूप में के लिए नए बाँझ दस्ताने का प्रयोग करें।
3. Ligation प्रक्रिया
- गर्दन और एक छुरी के साथ सीने के midline स्थिति में माउस की त्वचा खोलें।
- धीरे कुंद कैंची से संयोजी ऊतक को अलग करके सिर की ओर थायरॉयड ग्रंथि खींचो।
- अलग श्वासनली पर पेशी परत घुमावदार सुइयों के साथ दोनों पक्षों की ओर midline पर।
- कुंद कैंची का प्रयोग, दूसरी पसली (लगभग 5 मिमी) को उरोस्थि काटा। एक प्रतिकर्षक या घुमावदार संदंश के साथ कटौती खोलें।
- एक दूसरे के और घुमावदार सुई के साथ संयोजी ऊतक को अलग करके निचले छाती दीवार से थाइमस पालियों अलग करें; अनुप्रस्थ महाधमनी चाप और दो मन्या धमनियों इस बिंदु पर स्पष्ट रूप से दिखाई जाएगी।
- मेहराब के तहत घुमावदार सुई की जगह और मवाद द्वारा दूसरे पक्ष पर पोत दीवार और संयोजी ऊतक के बीच छेदनाघुमावदार सिर बाहर hing।
- घुमावदार सुई का प्रयोग, महाधमनी चाप के तहत 6-0 monofilament सीवन खींच।
- पाश में स्पेसर प्लेस और एक डबल-गाँठ के साथ जगह में सिवनी तय कर लो। स्पेसर धीरे निकालें।
- गाँठ की स्थिति के साथ एक सफल कसना की पुष्टि करें और सिवनी के सिरों में कटौती।
- एक साधारण बाधित सीवन पैटर्न के साथ 6/0 रेशम सीवन का उपयोग कर छाती की दीवार को बंद करें। एक सतत सिवनी पैटर्न में एक 6/0 monofilament सीवन के साथ त्वचा को बंद करें।
4. पोस्ट ऑपरेटिव देखभाल
- सिवनी साइट के लिए povidone आयोडीन समाधान को लागू करें और वसूली और पोस्ट ऑपरेटिव निगरानी के लिए एक पूर्व गर्म पिंजरे में जानवरों की जगह।
- (- 0.1 मिलीग्राम / किलो सुप्रीम कोर्ट हर 12 घंटे 0.05) जानवर के बाद दर्द से छुटकारा पाने और उचित नरम भोजन के साथ माउस प्रदान करने के लिए होश आ गया है buprenorphine इंजेक्षन।
- पूरी वसूली के बाद एक 12-एच / प्रकाश अंधेरे चक्र के कमरे में पशु लौटें।
5।इकोकार्डियोग्राफी: सफल ligation और माप की पुष्टि
- 1.5%, रखरखाव के लिए एक 1 एल / मिनट ऑक्सीजन का प्रवाह दर के साथ -, 5% isoflurane शामिल करने के लिए, और 1 - एक सप्ताह के बाद, 3 के साथ पहले से बंधी माउस anesthetize।
- लोमनाशक क्रीम का उपयोग छाती के बाल निकालें। अच्छी तरह से गर्म पानी और एक कपास applicator के साथ क्रीम निकाल दें।
- 37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा जानवर से निपटने मंच करने के लिए लापरवाह स्थिति में माउस सुरक्षित। पंजे के लिए इलेक्ट्रोड जेल लागू करें और उन्हें इलेक्ट्रोड के साथ पैड करने के लिए टेप।
- माउस छाती को अल्ट्रासाउंड जेल लागू करें। एक 40 मेगाहर्ट्ज MS550D जांच और एक उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड प्रणाली के साथ, महाधमनी चाप पर के रूप में, बाएँ और दाएँ मन्या धमनियों पर रंग डॉपलर और स्पंदित-लहर डॉपलर स्कैनिंग प्रदर्शन के रूप में अच्छी तरह से।
- बी मोड का उपयोग करना, बाएं वेंट्रिकल का पता लगाने। एम मोड का उपयोग करना, सिस्टोलिक और डायस्टोलिक दीवार मोटाई मापा जा सकता है। उपयोग सिने स्टोर और फ्रेम की दुकान डेटा और छवियों को बचाने के लिए आवश्यक के रूप में।
- यूगाना बी मोड, शाखाओं में बंटी बिंदु से पहले छोड़ दिया आम मन्या धमनी का पता लगाने। प्रवाह का मूल्यांकन करने के लिए स्पंदित-लहर और रंग डॉपलर का प्रयोग करें। इसी तरह के एक बिंदु पर सही मन्या धमनी के साथ दोहराएँ। सिने स्टोर और फ्रेम की दुकान मोड में छवियों को बचाने बाद में विश्लेषण करने के लिए।
- करने के लिए अब तक छोड़ दिया जानवर से निपटने मंच झुकाव इतना है कि माउस बाईं डेक्यूबीटस स्थिति में है। माउस, 30 डिग्री parasternal स्थिति में सिर करने की स्थिति समानांतर से ऑफसेट पर जांच प्लेस, और हेरफेर एक्स और वाई महाधमनी चाप खोजने के लिए।
- कसना लगाएँ। , कसना अधिक दिखाई की साइट बनाने के लिए रक्त के रूप में बिंदु के बीच एक संकीर्ण चैनल के माध्यम से बह रही हो जाएगा रंग डॉपलर मोड का उपयोग करें, जहां दो मन्या धमनियों महाधमनी चाप से बाहर शाखा।
- स्पंदित-लहर और रंग का प्रयोग करें डॉपलर पीक फ्लो वेग को मापने के लिए। उपयोग सिने स्टोर और फ्रेम की दुकान डेटा और छवियों को बचाने के लिए आवश्यक के रूप में।
- पशु प्रवण स्थिति में एक हीटिंग पैड पर ठीक करने के लिए अनुमति दें।एक 12-एच / प्रकाश अंधेरे चक्र कमरे में मूल पिंजरे में पशु लौटने के बाद यह पूरी तरह से संज्ञाहरण से बरामद किया है।
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Representative Results
MTAC एक समय पर ढंग से बाएं वेंट्रिकल में महत्वपूर्ण उच्च रक्तचाप की प्रेरण सक्षम बनाता है।
एक polyurethane ट्यूब के साथ तुला और आयोजित होने वाले जगह में 4 30 गेज सुई - जैसा कि चित्र 1 में देखा, प्रक्रिया के लिए प्राथमिक उपकरणों की तैयारी केवल 2 की आवश्यकता होती है, सरल और कम है। शल्य प्रक्रिया खुद भी कम जटिल टीएसी की तुलना में, और आसानी से किया जा सकता है के रूप में है। एक बार जब थायराइड से मुकर गया है, उरोस्थि कट जाता है और थाइमस दृश्य स्पष्ट करने के लिए ले जाया गया है। महाधमनी चाप बंधाव प्रक्रिया (चित्रा 2) के लिए आसानी से locatable है।
MTAC मज़बूती से ligated चूहों में बाएं निलय दबाव अधिभार पैदा करता है। चित्रा 3 यह स्पष्ट रूप से दिखाता है, के रूप में एक constricted अनुप्रस्थ महाधमनी स्पष्ट रूप से चित्रा -3 सी में मनाया जा सकता है, w के रूप मेंपक्ष 3 डी में कसना साइट के माध्यम से एक वृद्धि की पीक फ्लो वेग के रूप में। यह दिखावा संचालित माउस, चित्रा 3 ए और 3 बी, जो सामान्य पीक फ्लो वेग के साथ कोई कसना दर्शाती में देखा की तुलना में हो सकता है। बंधाव चित्रा 4C में देखा का एक परिणाम के रूप में, प्रवाह वेग काफी सही मन्या धमनी में वृद्धि हुई है, और दबाव आरोही महाधमनी का निर्माण और दिल में कर सकते हैं बाएं निलय अतिवृद्धि का उत्पादन। हालांकि, नदी के ऊपर कसना का एक परिणाम के रूप में, प्रवाह वेग काफी बाईं आम मन्या धमनी में कम है, चित्रा 4D के रूप में। दूसरी ओर, के पास समान कैरोटिड धमनी रक्त के प्रवाह को दिखावा संचालित माउस में मनाया जाता है, चित्रा -4 ए (सही मन्या धमनी) और 4 बी (बाएं कैरोटिड धमनी) के रूप में।
जिसके परिणामस्वरूप अतिवृद्धि संबंधी पैरामीटरऔर अस्तित्व वक्र आसानी से चित्रा 5, जिसमें MTAC-ligated माउस के दिल में काफी बढ़े और विकृत होने के लिए मनाया जा सकता है में मनाया जाता है। यह केवल आगे के रूप में चित्रा 6A और 6B, जो MTAC संचालित माउस के बढ़े हुए दिल दर्शाती दिखावा संचालित माउस की तुलना में में प्रदर्शन सेलुलर स्तर पर देखा जाता है। क्या आगे मनाया जा सकता है वृद्धि हुई हृदय की मांसपेशी कोशिका के आकार और फाइब्रोसिस MTAC चूहों में (चित्रा 6D, 6F, और 6) गैर ligated चूहों की तुलना में (चित्रा 6C, 6E, और 6G)।
चूंकि MTAC एक उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड प्रणाली द्वारा सत्यापित किया जा सकता है, सफलतापूर्वक महाधमनी चाप कसना विफलता चित्रा 3 बी के रूप में, दो आयामी इकोकार्डियोग्राफी में अनुप्रस्थ महाधमनी के एक दृश्य कसना की कमी से पता चल जाएगा 3 डी। यह आगे स्पंदित-लहर और रंग डॉपलर मोड के साथ सत्यापित किया जा सकता है, एक सफल कसना छोड़ दिया मन्या धमनी (चित्रा 4C और 4D) में सही मन्या धमनी में एक उच्च प्रवाह वेग और कम प्रवाह वेग का प्रदर्शन करना चाहिए।
चित्रा 1: एक 1 में, 30 गेज सुई की नोक झुकने से वांछित सुई कांटों बनाने की प्रक्रिया। ए) मूल 1 में, 30 गेज सुई की नोक। बी) सुई धारक के साथ सुई की नोक समझ और लगभग आधे रास्ते में मोड़ इसकी लंबाई के साथ। एक पाश में सुई झुको, सुई धारक और हाथ, के रूप में आवश्यक का उपयोग कर, लूप चित्रा के ऊपरी-दाएँ में कल्पना के रूप में। सी) आदेश जगह में तुला हुआ खंड पकड़ करने के लिए एक polyurethane ट्यूब के साथ सुई को कवर किया। डी) का उपयोग करनासुई धारक, वांछित आकार में पाश की नोक मोड़। इस मामले में, दो 45 के साथ एक सुई की नोक - 60 डिग्री झुकता निदर्शी प्रयोजनों के लिए दिखाया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 2: ट्रांसवर्स महाधमनी चाप ligating की प्रक्रिया। ए) महाधमनी चाप स्पष्ट रूप से दिखाई दे रहा है। बी) के ऊपर उल्लिखित हुक सुई का प्रयोग, पास संयोजी ऊतक से महाधमनी चाप अलग। सी) झुका सुई का प्रयोग, महाधमनी चाप के तहत सिवनी मार्गदर्शन, और एक स्पेसर के उपयोग के साथ, वांछित व्यास का एक कसना टाई। डी) पूरे बंधाव। Pl यह आंकड़ा कम करने का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3: रंग और ligated और गैर-ligated चूहे की महाधमनी चाप से स्पंदित-लहर डॉपलर अल्ट्रासाउंड इमेजिंग। ए) एक गैर ligated माउस का महाधमनी चाप का रंग डॉपलर इमेजिंग। दो मन्या धमनियों स्पष्ट रूप से दिखाई है, साथ ही उन दोनों के बीच एक कसना की कमी कर रहे हैं। बी) एक गैर ligated माउस की महाधमनी पीक फ्लो वेग। सी) एक ligated माउस का महाधमनी चाप का रंग डॉपलर इमेजिंग। महाधमनी चाप पर दो मन्या धमनियों के बीच कसना दिखाई (पीले तीर) है। डी) कसना स्थल पर पीक फ्लो वेग। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 4: ligated और गैर-ligated चूहे के बाएँ और दाएँ मन्या धमनियों से स्पंदित-लहर डॉपलर इमेजिंग। ए) एक गैर ligated माउस के बाएं कैरोटिड धमनी की स्पंदित-लहर डॉपलर इमेजिंग। बी) एक गैर ligated माउस का सही मन्या धमनी की स्पंदित-लहर डॉपलर। यह उल्लेखनीय है कि रक्त के प्रवाह के वेग को छोड़ दिया मन्या धमनी की है कि लगभग समान है। सी) अपनी महाधमनी चाप पर एक कसना साथ एक माउस के सही मन्या धमनी की स्पंदित-लहर डॉपलर। रक्त वेग काफी कसना बाईं मन्या धमनी के लिए प्रवेश के बहाव की वजह से बढ़ रहा है। डी) अपनी महाधमनी चाप पर एक कसना साथ एक माउस के बाएं कैरोटिड धमनी की स्पंदित-लहर डॉपलर। रक्त प्रवाह वेग काफी नदी के ऊपर के प्रवेश को कसना की वजह से कम हैछोड़ दिया मन्या धमनी। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 5: हृदय अतिवृद्धि और संबंधित मानकों एक जीवन रक्षा की अवस्था के साथ 3 सप्ताह ligated और गैर-ligated चूहे से। ए) अनुप्रस्थ महाधमनी कसना बिना एक 3 महीने की उम्र में माउस से दिल। दिल को स्वस्थ और एक सामान्य आकार का है, किसी भी तुरंत स्पष्ट विकृतियों के बिना। बी) के एक 3 महीने की उम्र में माउस है कि 3 सप्ताह के लिए MTAC कराना पड़ा दिल का। बाएं निलय दीवार वृद्धि के कारण नोटिस दिल की स्पष्ट रूप से कुरूप प्रकृति। महाधमनी चाप पर बंधाव भी दिख रहा है। सी) एक 3 महीने की उम्र गैर ligated माउस के दिल की एक पार अनुभाग। डी) एक 3 के दिल की एक पार अनुभागमहीने की पुरानी माउस है कि 3 सप्ताह के लिए अनुप्रस्थ महाधमनी कसना कराना पड़ा। बाएं वेंट्रिकल की वृद्धि स्पष्ट रूप से दिखाई दे रहा है। सामान्य तौर पर दिल भी बाएं निलय दबाव MTAC की वजह से अधिभार के कारण बढ़ा है। ई) दिल को वजन अनुपात में काफी 3 सप्ताह के लिए बंधी चूहों में बढ़ जाती है। एफ) दिल-से-बाएँ टिबिया हड्डी की लंबाई के अनुपात में काफी चूहों में वृद्धि हुई है, 3 सप्ताह (के लिए बंधी *, पी <0.05; **, पी <0.01; ***, पी <0.001)। एक 3 सप्ताह तक प्रयोग (MTAC = 12 और नकली = 12) के लिए G) अस्तित्व वक्र। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 6: माउस दिल के histological स्लाइड। ए) एक श के एक पार अनुभागAM-संचालित माउस दिल। बी) को दिल का 3 सप्ताह के लिए MTAC-ligated, एक गाढ़ा बाएं निलय की दीवार और आंशिक फाइब्रोसिस के साथ की एक पार अनुभाग। समग्र दिल के आकार के रूप में अच्छी तरह से बढ़ जाती है। सी) एक दिखावा संचालित माउस से हृदय की मांसपेशी फाइबर के अनुदैर्ध्य अनुभाग। डी) एक MTAC-ligated माउस से हृदय की मांसपेशी फाइबर के अनुदैर्ध्य अनुभाग। कोशिकाओं, के रूप में उनके बढ़ा व्यास इसका सबूत है, काफी बढ़े हैं, जबकि नाभिक में एक ही आकार में बनी हुई है। ई) एक दिखावा संचालित माउस से मांसपेशी फाइबर की अनुप्रस्थ अनुभाग। एफ) एक MTAC-ligated माउस से हृदय की मांसपेशी फाइबर की अनुप्रस्थ अनुभाग। कोशिकाओं MTAC का एक परिणाम के रूप में दबाव अधिभार के कारण बढ़े हैं। जी) एक दिखावा संचालित माउस कोलेजन के लिए Picrosirius लाल के साथ दाग से कोरोनरी धमनियों। एच) एक MTAC-ligated माउस से कोरोनरी धमनियों। कोलेजन ऊतक का एक महत्वपूर्ण राशि एआरओ मनाया जाता हैकोरोनरी धमनियों में दबाव अधिभार के कारण फैली हुई रक्त वाहिका, परिवाहकीय फाइब्रोसिस का संकेत und। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
Rockman और उनके सहयोगियों के दिल में दबाव अधिभार अध्ययन करने के लिए एक विधि के रूप में महाधमनी बैंडिंग के लिए पहली विधि तैयार की। यह सक्षम अनुसंधान उच्च रक्तचाप और दिल की विफलता 1 के सेलुलर और आणविक परिणामों को उजागर करने के लिए शुरू करने के लिए। एक बेहतर तरीका है, कम आक्रामक अनुप्रस्थ महाधमनी कसना (MTAC), पारंपरिक अनुप्रस्थ महाधमनी कसना 9 की कमियों के बिना, बाएं निलय दबाव अधिभार और दिल की विफलता के शामिल होने के लिए एक उत्तरदायी, समय पर निर्भर तरीका प्रदान करता है। प्रक्रिया ही काफी अधिक आसानी से और वृद्धि की जीवित रहने की दर के साथ किया जा सकता है टीएसी की तुलना में। इस विधि का मुख्य लाभ यह है कि यह महाधमनी कसना प्रयोग के प्रदर्शन के लिए सक्षम बनाता है, लेकिन काफी कम उपकरण, शल्य चिकित्सा कौशल, और एक ही या एक बेहतर परिणाम के लिए आपरेशन समय के साथ है।
टीएसी प्रक्रिया में खुले सीने विधि जी सक्षम करता हैreater उपयोग और दिल और जहाजों की संपूर्णता का एक बेहतर विचार। संभावित लाभ यह है कि यह आसानी से इस तरह सही निलय दबाव अधिभार या एक ही समय के रूप में महाधमनी चाप बैंडिंग किया जाता है पर इस्कीमिक स्थितियों के लिए कोरोनरी धमनी बंधाव के लिए पल्मोनरी धमनी कसना के प्रदर्शन के रूप में अन्य प्रक्रियाओं, के साथ संयोजन में आयोजित किया जा सकता है। इसके विपरीत, न्यूनतम इनवेसिव विधि आरोही या अनुप्रस्थ महाधमनी चाप कसना के अलावा और कुछ के लिए उपयुक्त नहीं है।
यह उल्लेखनीय है कि इस विधि अनुकूलित किया गया है और तरीकों की एक किस्म में संशोधित किया। कुछ मामलों में, एक सीवन के बजाय टाइटेनियम क्लिप का उपयोग महाधमनी कसना अधिक उपयुक्त समझा गया है, यह देखते हुए कि यह एक प्रायोगिक शर्त यह है कि आसानी से प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है: बैंड के रूप में वे शामिल मानक टीएसी और MTAC प्रक्रियाओं में कर सकते हैं बंद पर्ची नहीं कर सकते टांके 6। घटना है कि, जब उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड प्रणाली के साथ परीक्षण में,चूहों की एक बड़ी संख्या को सफलतापूर्वक प्रयोग के दौरान ligated नहीं किया गया है, आगे अभ्यास की आवश्यकता है। शायद ऊपर उल्लिखित टाइटेनियम क्लिप के आवेदन सर्जरी 6 की सफलता की दर में सुधार हो सकता।
जब प्रयोग का आयोजन, यह महत्वपूर्ण है कि महाधमनी के आसपास सीवन भी तंग नहीं है। यह महाधमनी घायल या शरीर के बाकी है, इस तरह के गुर्दे जैसे महत्वपूर्ण अंगों, सहित के लिए रक्त के प्रवाह की एक घातक कमी हो सकती है। देखभाल भी जब घुमावदार हुक का उपयोग कर आसपास संयोजी ऊतक और जहाजों से महाधमनी अलग करने के लिए कोमल, के रूप में यह फेफड़े के नसों और अन्य जहाजों घायल कर सकते हैं और घातक खून की कमी करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं लिया जाना चाहिए। छाती गुहा नकारात्मक है और बाहर के वातावरण में सकारात्मक दबाव है। इस प्रक्रिया में, हालांकि छाती दीवार उरोस्थि से खुले में कटौती की गई थी और महाधमनी चाप बंधी किया गया था, छाती गुहा और नकारात्मक दबाव के माहौल बरकरार रहे थे। अगर वहाँ accidenta थाएल नुकसान और अंदर नकारात्मक दबाव बदल गया था, फेफड़े ढह गया होता, और पशु तत्क्षण मर गया होता, क्योंकि वहाँ कोई सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन हो गया होता। आमतौर पर, प्रक्रिया सुरक्षित रूप से 30 मिनट के भीतर, यहां तक कि धीमी गति से प्रदर्शन के साथ किया जा सकता है अगर कोई घातक चोट है। पोस्ट ऑपरेटिव देखभाल अगर पशु निर्जलित है, या जानवर दर्द के कारण और तकलीफ भोजन तक पहुँचने में भूखा कर सकते हैं के बाद से दबाव कम किया जा सकता है, यह भी महत्वपूर्ण है। आसानी से उपलब्ध नरम भोजन, दर्दनाशक दवाओं, और पुनर्जलीकरण वसूली के लिए आवश्यक है, साथ ही एक सफल परिणाम के लिए कर रहे हैं।
अल्ट्रासाउंड सिस्टम, विशेष रूप से रंग डॉपलर मोड, के बाद के उपयोग अनुप्रस्थ महाधमनी चाप के दृश्य, सफल कसना, और MTAC के प्रभाव को सक्षम बनाता है। अल्ट्रासाउंड प्रणाली धमनियों की दीवारों की मोटाई की, मन्या धमनियों में प्रवाह वेग की माप सक्षम बनाता है, और बाएं वेंट्रिकल की आकृति विज्ञान की।विशेष रूप से, सामान्य या दिखावा संचालित चूहों में प्रवाह की दर के अनुपात लगभग 1 10 होना चाहिए। कसना साइट में पीक फ्लो वेग मन्या अनुपात के रूप में एक विश्वसनीय पैरामीटर के लिए संशोधित Bernoulli के समीकरण (4 एक्स वी अधिकतम 2) का उपयोग कर दबाव ढाल की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। यह ध्यान देने योग्य है कि इकोकार्डियोग्राफी के दौरान, कि शरीर का तापमान और दिल की दर सामान्य शारीरिक श्रृंखला के लिए संभव के रूप में बंद रखा जाना चाहिए और पशुओं के बीच समान हो तुलनीय डेटा अंक 10 का उत्पादन करने के लिए करना चाहिए लायक है।
कसना का स्तर अलग ऑपरेटरों के अलग-अलग अनुभव के स्तर से प्राप्त किया जा सकता है और काफी प्राप्त आकृति विज्ञान को प्रभावित कर सकते हैं। अनुरूप परिणाम प्राप्त करने के लिए, दबाव ढाल के स्तर के साथ सफल कसना जाँच और केवल इस तरह के 40-80 एमएमएचजी के बीच एक दबाव ढाल के रूप में कुछ सीमाओं के भीतर चूहों का उपयोग महत्वपूर्ण है। जब भी संभव हो, उच्च आवृत्ति echocardiography पुष्टि और पशु चयन के मापदंड के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए अध्ययन के परिणामों में स्थिरता प्राप्त करने के लिए। हालांकि, इकोकार्डियोग्राफी MTAC विधि खुद के लिए आवश्यक नहीं है।
यदि उच्च आवृत्ति इकोकार्डियोग्राफी उपलब्ध नहीं है, सफल कसना दिल वजन और रिश्तेदार अनुपात के साथ और प्रयोग के अंत में histopathological अध्ययन के साथ सत्यापित किया जा सकता। सफल कसना दुबला दिल वजन और शरीर के वजन और बाएं टिबिया हड्डी की लंबाई के सापेक्ष अनुपात में वृद्धि होगी। इसी तरह, हृदय की मांसपेशी सेल अतिवृद्धि और दोनों मध्य और परिवाहकीय फाइब्रोसिस भी सफलतापूर्वक ligated चूहों में मनाया जा सकता है। यह 3 सप्ताह तक प्रयोग केवल इरादा है हृदय अतिवृद्धि प्रेरित करने के लिए है, लेकिन एक विफलता का कारण नहीं। 8 सप्ताह या बाद में - हृदय फैलाव और दिल की विफलता के बाद आमतौर पर 6 में निर्धारित किया है।
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Acknowledgments
हम Vevo 2100 अल्ट्रासाउंड प्रणाली के प्रावधान के लिए हांगकांग पॉलिटेक्निक यूनिवर्सिटी के लाइफ साइंसेज (ULS) में विश्वविद्यालय के अनुसंधान सुविधा को स्वीकार करना होगा। बायोमेडिकल इंजीनियरिंग, हांगकांग पॉलिटेक्निक यूनिवर्सिटी, के अंतःविषय डिवीजन से डॉ Chunyi वेन के लिए विशेष धन्यवाद प्रशिक्षण और सुविधा के लिए। इस काम के एच सरकार RGC अनुदान GRF 17127215, 764812 और HKU6 / सीआरएफ / 11G बिली के.सी. चाउ करने के द्वारा समर्थित किया गया।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Depilatory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Eye Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
References
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