Waiting
Traitement de la connexion…

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Minimal Invasive Tverr aortic Innsnevring i Mus

Published: March 14, 2017 doi: 10.3791/55293

Summary

Minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring (MTAC) bevarer det vesentlige av vanlig tverrgående aorta innsnevring (TAC), mens eliminere bruken av en ventilator med trakeal intubering. Det viser seg å være en meget ønskelig metode for high-throughput-studier på venstre ventrikkel overbelastning, særlig i translasjonelle studier.

Abstract

Minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring (MTAC) er en mer ønskelig metode for innsnevring av tverrgående aorta hos mus enn standard åpen kiste tverrgående aorta innsnevring (TAC). Selv om tverrgående aorta innsnevring er en funksjonell metode for induksjon av høyt trykk i venstre ventrikkel, er det en mer vanskelig og langvarig fremgangsmåte på grunn av bruken av kunstig ventilasjon med trakeal intubering. TAC er ofte også mindre å overleve, som den nyere metode, MTAC, verken krever kutting av ribbeina og interkostalrom muskler eller intubasjonsforhold med et ventilasjons oppsett. I MTAC, i motsetning til en torakotomi for å få tilgang til brysthulen, blir aortabuen nås gjennom et midtlinjesnitt i fremre nakken. Den skjoldbrusk er trukket tilbake for å avdekke sternal hakk. Sternum blir deretter kuttet ned til den andre ribbe nivå, og aortabuen er oppnådd ganske enkelt ved å skille bindevev og thymus. FraDerfra kan en sutur kveiles rundt buen og bundet med en spacer, og deretter sternal kutt og huden kan bli stengt. MTAC er en mye raskere og mindre invasiv måte å indusere venstre ventrikulær hypertensjon og muliggjør muligheten for high-throughput-studier. Suksessen til innsnevring kan verifiseres ved hjelp av høyfrekvente trans-thorax ekkokardiografi, spesielt fargedoppler og pulset-bølge Doppler, for å bestemme strømningshastigheter av aortabuen og venstre og høyre carotis, dimensjonen av blodårene, og venstre ventrikkel-funksjon og morfologi. En vellykket innsnevring vil også utløse betydelige histopatologiske endringer, for eksempel hjertemuskelcelle hypertrofi med interstitiell og perivaskulær fibrose. Her er fremgangsmåten i MTAC beskrevet, viser hvordan de resulterende strømningsendringer carotis kan undersøkes med ekkokardiografi, totale morfologiske og histopatologiske forandringer i hjertet.

Introduction

Det overordnede formålet med denne artikkelen er å vise hvordan tverrgående aorta innsnevring (TAC) i mus kan bli endret for å gi en enklere og mer hensiktsmessig kirurgi. TAC ble først introdusert i 1991 1 og aktivert molekylærbiologer å studere de cellulære og molekylære reaksjonsveier som fører til hypertrofi i venstre hjertekammer og til hjertesvikt, særlig i små dyr med manipulerte genomer 2, 3, 4, 5, 6. Til tross for sin effekt på å produsere det ønskede trykk overbelastning, er teknikken i siste instans begrenses av vanskeligheten med å utføre fremgangsmåten og ved den lave overlevelsesrate. En kirurg ledende TAC må være i stand til å utføre endotracheal intubasjon, torakotomi, og bruker kunstig ventilasjon for å forhindre lungekollaps 1.

innhold "> Ofte er en enkel og mindre invasiv metode er ønskelig. Som en konsekvens er minimal invasiv tversgående aorta innsnevring (MTAC) ble utviklet tre. Selv om utfallet (spesielt, venstre ventrikkel hypertrofi) er den samme, innebærer fremgangsmåten betydelig færre apparater og mindre skade på dyret. MTAC viser seg å være en ønskelig fremgangsmåte som har en større overlevelse, over 90%, og har en driftstid på bare 15 til 25 min. de sjeldne tilfeller av død etter vellykket operasjon kan tilskrives altfor sittende innsnevring av aortabuen, noe som resulterer i enorm venstre ventrikkel overbelastning og fatal reduksjon av blodtilførselen til kritiske organer som nyrer.

Etter at prosedyren er fullført, kan ekkokardiografi anvendes for å vurdere effekten av striper og hjerte morfologi og funksjon. En høyfrekvent ultralydsystem kan anvendes for å måle diameteren og strømningsendringer i venstre og høyrecarotis, for å visualisere aortabuen innsnevringen for toppstrømningshastighetsmålingene, og å bestemme den venstre ventrikkel veggtykkelse og funksjonelle parametre 7, 8. Etter eutanasi, kan organene også bli samlet for histopatologiske studier med hematoxylin og eosin-farging og Picrosirius kollagen flekker, hvor sistnevnte er spesielt nyttige for observasjon av fibrose.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Protokollen følger retningslinjene fra komiteen om bruk av levende dyr i undervisning og forskning (CULATR) ved Universitetet i Hong Kong.

1. Drift klargjøring

  1. Desinfisere operasjonsområdet med 75% isopropylalkohol. Juster varmeputen temperaturen til 37 ° C for å unngå endringer i hjerte og luftveis priser av faget dyr.
  2. Bruke kirurgiske instrumenter sterilisert i en tyngdekraft forskyvning sterilisator ved 121 ° C i 30 min eller ved andre passende metoder.
  3. Ta 2 - 4 30 gauge nåler og kurve dem med en nål holder, som vist i figur 1, for å gjøre et verktøy for ligering og vev separasjon og for bruk som et festepunkt. Monter nå bøyde nål på en bomulls applikator for bruk i kirurgi.
  4. Sløv en 27-gauge nål og kurve det 90º med nåleholderen. Glatt spissen ved å gni en hard overflate for å lage en 0,4 mm spacer i ligation trinn.

  1. Anesthetize en to måneder gammel, mann, 22-25 g C57BL / 6N mus med en passende ketamin og xylazin blanding i forhold til kroppsvekt: 100 mg / kg + 10 mg / kg ip Bekreft anesthetization med negative halen klype refleks .
  2. Fjern hår på fremre nakken og brystet med en 2- til 3-min bruk av Hårfjerningskrem. Fjern kremen med varmt vann og en bomulls applikator.
  3. Påfør oftalmisk salve eller gel til øynene til dyret for å forhindre uttørking av hornhinnen.
  4. Plasser dyret på en varmepute i liggende stilling og gjennomføre intraoperativ overvåking, være sikker på å holde riktig dokumentasjon på alle 15-min intervall.
  5. Bruk kirurgisk papir tape for å feste benene til varmeputen for å holde dyret på riktig posisjon under operasjonen.
  6. Desinfiser huden vekselvis med alkohol og povidonjodid løsning tre ganger.
  7. Bruk en steril drape med en utsatt operasjon feltet for å hindre forurensning. Bruk nye sterile hansker for hver mus og behov.

3. hemorroider Prosedyre

  1. Åpne huden på mus ved midtlinjen stilling av halsen og brystet med en skalpell.
  2. Trekk skjoldbruskkjertelen mot hodet ved forsiktig å skille bindevev med sløv saks.
  3. Separer muskelen laget på luftrøret ved midtlinjen mot begge sider med de buede nåler.
  4. Bruke sløv saks, klippe sternum til andre rib (ca. 5 mm). Åpne kuttet med en retractor eller buet tang.
  5. Separer thymus flikene fra hverandre og den nedre brystvegg ved å skille bindevevet med den krumme nålen; den tverrgående aortabuen og to halspulsårene vil være klart synlig på dette punktet.
  6. Plasser den krumme nålen under buen og perforere mellom karveggen og bindevev på den andre siden av pussHing den buede hodet ut.
  7. Ved hjelp av den buede nålen, trekk 6-0 monofilament sutur under aortabuen.
  8. Plasser avstandsstykket i loop og fikse sutur på plass med en dobbel knute. Fjern avstandsstykket forsiktig.
  9. Bekrefte en vellykket innsnevring med knuten posisjon og skjæres endene av suturen.
  10. Lukk brystveggen ved hjelp av 6/0 silke sutur med en enkel avbrutt sutur mønster. Lukk huden med en 6/0 monofilament sutur i en kontinuerlig sutur mønster.

4. Postoperativ Care

  1. Påfør povidonjodid løsning på sutur nettstedet og plassere dyret i en forvarmet bur for utvinning og postoperativ overvåking.
  2. Injisere buprenorfin (0,05 til 0,1 mg / kg sc hver 12 timer) etter at dyret har gjenvunnet bevisstheten for å lindre smerte og gi musen med riktig myk mat.
  3. Gå tilbake dyret til en 12-timers lys / mørke syklus rom etter full gjenoppretting.

5.Ekkokardiografi: Bekreftelse av vellykket hemorroider og Målinger

  1. Etter en uke, bedøve tidligere bundet mus med 3 - 5% isofluran, for induksjon, og 1 - 1,5%, for vedlikehold, med et 1 l / min oksygen strømningshastighet.
  2. Fjern hår på brystet ved hjelp Hårfjerningskrem. fjerne kremen med varmt vann og en bomulls applikator grundig.
  3. Fest mus i liggende stilling til dyret håndteringsplattform, holdt ved 37 ° C. Påfør elektrodegel på potene og tape dem til puten med elektroder.
  4. Påfør ultralyd gel til muse brystet. Med et 40-MHz MS550D probe og en høyfrekvent ultralydsystem, utføre fargedoppler og pulset Doppler-bølge skanning på venstre og høyre halspulsårene, så vel som på aortabuen.
  5. Ved hjelp av B-modus, finn venstre ventrikkel. Ved hjelp av M-modus, kan det systoliske og diastoliske veggtykkelsen måles. Bruk Cine Store og Frame Store for å lagre data og bilder ved behov.
  6. Usynge B-modus, finn venstre arteria carotis communis før forgreningspunktet. Bruk pulset-bølge og fargedoppler for å evaluere strømmen. Gjenta med den høyre halspulsåre på et tilsvarende punkt. Lagre bildene i Cine Store og rammelager moduser å analysere senere.
  7. Vipp dyrehåndtering plattform helt til venstre, slik at musen er i venstre decubitus posisjon. Plassere proben på mus, 30 ° forskjøvet fra en stilling parallelt med hodet på parasternal stilling, og manipulere X og Y for å finne aortabuen.
  8. Finn innsnevring. Bruk fargedoppler-modus for å gjøre området til innsnevring mer synlig, som blod vil strømme gjennom en trang kanal mellom det punktet hvor de to carotis armen ut fra aortabuen.
  9. Bruk pulset-bølge og fargedoppler for å måle toppstrømningshastighet. Bruk Cine Store og Frame Store for å lagre data og bilder ved behov.
  10. La dyret å komme på en varmepute i liggende stilling.Returner dyret til den opprinnelige bur i en 12-timers lys / mørke syklus rommet etter at det er fullstendig restituert fra anestesi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

MTAC muliggjør induksjon av betydelig hypertensjon i venstre hjertekammer på en riktig måte.

Som det fremgår av figur 1, er fremstillingen av de primære verktøy for prosedyren enkel og minimale, krever bare 2 - 4 30 gauge nåler som skal bøyes, og holdes på plass med en polyuretan-rør. Den kirurgiske prosedyren i seg selv er også mindre komplisert, sammenlignet med TAC, og kan utføres enkelt. Når skjoldbruskkjertelen har blitt trukket tilbake, er sternum kuttet og thymus flyttes for å fjerne visningen. Aortabuen er lett locatable for ligeringsprosessen (figur 2).

MTAC produserer pålitelig venstre ventrikkel press overbelastning i avsnørede mus. Figur 3 illustrerer dette tydelig, som en innsnevret tverrgående aorta klart kan observeres i figur 3C, som well som en økt peak strømningshastighet gjennom innsnevring området i 3D. Dette kan bli sammenlignet med sham-opererte mus, vist på figur 3A og 3B, som viser noen innsnevring med normal toppstrømningshastighet. Som en konsekvens av ligerings vist i figur 4C, blir strømningshastigheten betydelig økt i den høyre halspulsåren, og trykk kan bygge opp den oppstigende aorta og i hjertet for å produsere hypertrofi i venstre hjertekammer. Imidlertid, som en konsekvens av oppstrøms innsnevring, strømningshastigheten er betydelig redusert i den venstre arteria carotis communis, som vist på figur 4D. På den annen side er tilnærmet identisk halsarterie blodstrømning ble observert i den sham-opererte mus, som i figur 4A (høyre halspulsåre) og 4B (venstre halspulsåre).

Den resulterende hypertrofi-relaterte parameters og overlevelse kurve blir lett observert i figur 5, i hvilken hjertet av MTAC-ligert mus kan observeres til å være betydelig forstørret og deformert. Dette er bare ytterligere sett på cellenivå, som vist i figur 6A og 6B, som viser den forstørrede hjertet av MTAC-opererte mus sammenlignet med sham-opererte mus. Hva kan bli ytterligere observeres er økt hjertemuskelcellen størrelse og fibrose i MTAC mus (Figur 6D, 6F, og 6 H) sammenlignet med ikke-ligert mus (figur 6C, 6E, og 6G).

Siden MTAC kan bekreftes ved en høyfrekvent ultralydsystem, vil manglende hell innsnevre aortabuen bli avslørt ved en mangel på en synlig smaleste del av den tverrgående aorta i det todimensjonale ekkokardiografi, som i figur 3B 3D. Dette kan ytterligere bekreftet med pulset bølge og fargedopplermodi, skal en vellykket innsnevring viser en høyere strømningshastighet i den høyre halspulsåre og redusert strømningshastighet i den venstre halsarterie (figur 4C og 4D).

Figur 1
Figur 1: prosessen med å danne den ønskede Needle Hooks ved å bøye en ett-in, 30-gauge nålespissen. A) Den opprinnelige ett-in, 30-gauge nålespissen. B) Ta tak nålespissen med nåleholderen og bøy omtrent halvveis langs dens lengde. Bøye nålen inn i en sløyfe ved hjelp av nåleholderen og viserne, som er nødvendig, for å danne sløyfen avbildet øverst til høyre på figuren. C) dekker nålen med en polyuretan-rør for å holde den bøyde delen på plass. D) Ved å brukenåleholderen, bøye spissen av løkken til den ønskede form. I dette tilfellet, en spiss nål med to 45 - 60 ° bend har blitt vist for illustrasjonsformål. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 2
Figur 2: Prosessen med å ligere Transverse aortabuen. A) aortabuen er klart synlig. B) Ved å bruke den ovennevnte kroken nålen, separere aortabuen fra den nærliggende bindevev. C) Ved hjelp av hektet nålen, lede suturen under aortabuen, og med bruk av et avstandsstykke, knytte en innsnevring av den ønskede diameter. D) Fullført ligering. pl lette Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 3
Figur 3: Farge og Pulsed-bølge Doppler ultralyd avbildning fra aortabuen av Bundet og ikke-ligert Mus. A) Color Doppler avbildning av aortabuen av en ikke-ligert mus. De to carotis er klart synlig, samt mangelen på en innsnevring mellom dem. B) Aorta toppstrømningshastigheten av en ikke-ligert mus. C) Color Doppler avbildning av aortabuen av en ligert mus. Den innsnevring mellom de to carotis på aortabuen er synlige (gul pilspisser). D) Peak strømningshastighet ved innsnevringen området. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

innhold "fo: keep-together.within-page =" 1 "> Figur 4
Figur 4: Pulsed-bølge Doppler Imaging fra venstre og høyre halspulsårene av Bundet og ikke-ligert Mus. A) Puls-bølge Doppler-avbildning av den venstre halspulsåre på en ikke-ligert mus. B) Puls-bølge Doppler av den høyre halspulsåren av en ikke-ligert mus. Det er bemerkelsesverdig at hastigheten av blodstrømmen er nesten identisk med den i den venstre halspulsåre. C) Pulsed-bølge Doppler av retten halspulsåren til en mus med en innsnevring på sin aortabuen. Blodet hastigheten er betydelig økt på grunn av innsnevring nedstrøms for innreise til venstre halspulsåren. D) Pulsed-bølge Doppler av den venstre halspulsåren til en mus med en innsnevring på sin aortabuen. Blodstrømningshastigheten blir vesentlig redusert på grunn av innsnevringen oppstrøms til oppføring avden venstre halspulsåre. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 5
Figur 5: Cardiac Hypertrofi og relaterte parametere med en Survival Curve fra tre-ukers ligert og ikke-ligert Mus. A) Hjertet fra en tre måneder gamle mus uten tverrgående aorta innsnevring. Hjertet er sunt og av en normal form, uten noen umiddelbart åpenbare sykdommer. B) Hjertet av en tre måneder gamle mus som gjennomgikk MTAC i 3 uker. Legg merke til den klart bulkete natur hjerte på grunn av venstre ventrikkel veggen utvidelse. Ligerings på aortabuen er også synlig. C) Et tverrsnitt av hjertet av en tre måneder gammel ikke-ligert mus. D) Et tverrsnitt av hjertet av en 3måneders gamle mus som gjennomgikk tverr aorta innsnevring i 3 uker. Utvidelsen av den venstre ventrikkelen er klart synlig. Hjertet generelt er også utvidet på grunn av venstre ventrikkel press overbelastning forårsaket av MTAC. E) Forholdet hjerte-til-kroppsvekten er betydelig økt i mus båndede i 3 uker. F) Hjertet mot venstre tibia bein lengde-forholdet er betydelig økt i mus bundet i 3 uker (*, p <0,05, ** p <0,01; ***, p <0,001). G) Survival kurve for en tre uker lange forsøket (MTAC = 12 og SHAM = 12). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 6
Figur 6: Histologisk Slides av musen Heart. A) Et tverrsnitt av en sham-opererte mus hjerte. B) Et tverrsnitt av et hjerte MTAC-ligert i 3 uker, med en fortykket venstre ventrikkel veggen og delvis fibrose. Den samlede hjerte størrelse økes i tillegg. C) Lengdesnitt av hjertemuskelfibre fra en humbug-opererte mus. D) Lengdesnitt av hjertemuskelfibre fra en MTAC-ligert mus. Cellene blir utvidet betraktelig, som vist ved deres økte diameter, mens kjernen har forblitt den samme størrelse. E) tverrsnitt av muskelfibre fra en humbug-opererte mus. F) tverrsnitt av hjertemuskelfibre fra en MTAC-ligert mus. Cellene er forstørret på grunn av trykket overbelastning som følge av MTAC. G) koronararteriene fra en humbug-opererte mus farget med Picrosirius Red for kollagen. H) koronararteriene fra en MTAC-ligert mus. En betydelig mengde av kollagen vev iakttas around den dilaterte blodkar, en indikasjon på perivaskulær fibrose på grunn av trykket overbelastning i koronararteriene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Rockman og kolleger utviklet den første metoden for aorta banding som en metode for å studere trykk overbelastning på hjertet. Dette gjorde undersøkelser for å begynne å avdekke de cellulære og molekylære konsekvensene av hypertensjon og hjertesvikt 1. En forbedret fremgangsmåte, minimal invasiv tversgående aorta innsnevring (MTAC), gir en mottagelig, tidsavhengig metode for induksjon av venstre ventrikulære trykk overbelastning og hjertesvikt, uten ulempene ved den konvensjonelle tverrgående aorta innsnevring 9. Selve inngrepet kan utføres betydelig lettere og med økt overlevelse priser i forhold til TAC. Den største fordelen med denne metoden er at den muliggjør utførelsen av aorta innsnevring eksperiment, men med betydelig mindre utstyr, kirurgisk dyktighet, og driftstiden for det samme eller et bedre resultat.

Den åpne brystet metoden i TAC prosedyren gjør aktiver greater tilgang og en bedre oversikt over helheten av hjertet og fartøy. Den potensielle fordel er at det lett kan gjennomføres i kombinasjon med andre fremgangsmåter, som for eksempel utførelsen av lungearterien konstriksjon til høyre ventrikkel trykk overbelastning eller koronarligering for iskemiske tilstander samtidig som aortabuen banding er gjort. Motsatt er det minimal invasiv metode ikke egnet for noe annet enn stigende eller tverr aortabuen innsnevring.

Det er bemerkelsesverdig at denne metoden har blitt tilpasset og modifiseres på en rekke måter. I noen tilfeller, har bruken av titan klipp i stedet for en sutur for å innsnevre aorta blitt ansett som mer hensiktsmessig, gitt at det er en eksperimentell tilstand som er lett reproduserbar: bandene kan ikke skli av som de kan i standard TAC og MTac prosedyrer som involverer sting 6. I det tilfelle at, når de ble testet med den høyfrekvente ultralydsystemetet stort antall mus har ikke blitt ligert under eksperimentet, er videre praksis nødvendig. Kanskje anvendelsen av de nevnte titan klipp kan forbedre suksessen rate av kirurgi 6.

Ved gjennomføring av forsøket, er det viktig at suturen rundt aorta ikke strammer. Det kan skade aorta eller forårsake en dødelig reduksjon av blodstrøm til resten av kroppen, inkludert de kritiske organer, slik som nyrer. Forsiktighet også må tas for å være forsiktig når man bruker den buede kroken for å skille aorta fra det omgivende bindevev og fartøy, som det kan skade lungevenene og andre fartøy, og kan føre til livstruende blodtap. Brysthulen har negative og utenfor miljøet har positivt trykk. I denne fremgangsmåten, selv om brystveggen ble skåret opp fra brystbenet og aortabuen ble bundet sammen, brysthulen og undertrykk miljø var intakt. Hvis det var accidental skader og innsiden undertrykk ble endret, lungene ville ha kollapset, og dyret ville ha dødd momentant, siden det ville ha vært noen overtrykksventilasjon. Vanligvis kan fremgangsmåten være trygt utføres innen 30 minutter, selv med dårlig ytelse, hvis det ikke er dødelig skade. Postoperativ behandling er også kritisk, da trykket kan reduseres hvis dyret er dehydrert, eller dyret kan sulte på grunn av smerter og så lett i å nå maten. Lett tilgjengelig myk mat, smertestillende midler, og rehydratisering er avgjørende for utvinning, så vel som for et vellykket resultat.

Den etterfølgende bruk av ultralyd anlegg, særlig for fargedoppler modus muliggjør visualisering av den tverrgående aortabuen, den vellykkede innsnevring, og effekten av MTAC. Ultralydsystemet muliggjør måling av strømningshastigheten i halspulsårene, av tykkelsen av arterieveggene, og av morfologien av venstre ventrikkel.Spesielt, bør forholdet mellom strømningshastighetene i normale eller skinn-opererte mus være tilnærmet en 10. Maksimal strømningshastighet i innsnevringen området kan benyttes for å beregne trykkgradienten ved å bruke modifisert Bernoullis likning (4 x V max 2) for en pålitelig parameter som carotis forholdet. Det er verdt å merke seg at under ekkokardiografi, må det kroppstemperatur og hjertefrekvensen holdes så nært som mulig til det normale fysiologiske området, og bør være lik for dyr å fremstille sammenlignbare datapunkter 10.

Varierende grad av innsnevring kan være avledet fra forskjellige kunnskapsnivåer av operatører og kan betydelig påvirke innhentet morfologi. For å få konsistente resultater, sjekker vellykket innsnevring med trykk gradient nivåer og bare bruker mus innenfor visse grenser, for eksempel en trykkgradient mellom 40-80 mmHg, er viktig. Når det er mulig, høyfrekvente echocardiography bør brukes for bekreftelse og dyr utvelgelseskriterier for å oppnå konsistens i studien utfall. Imidlertid er ekkokardiografi ikke nødvendig at MTAC metoden selv.

Hvis høyfrekvente ekkokardiografi ikke er tilgjengelig, kan den vellykkede innsnevring verifiseres med hjertevekt og relative forhold og med den histopatologiske undersøkelse ved slutten av forsøket. Den vellykkede innsnevring vil øke lean hjertevekt og den relative forholdet til kroppsvekt og venstre tibia bein lengde. På samme måte kan hjertemuskelcellehypertrofi og både interstitiell fibrose og perivaskulær også observeres på vellykket ligert mus. Dette 3-ukes eksperiment er bare ment for å indusere hjertehypertrofi, men ikke å forårsake en feil. Den hjerte utvidelse og hjertesvikt vanligvis satt i etter 6 - 8 uker eller senere.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Vi ønsker å takke Universitetet Research Facility i biovitenskap (ULS) av The Hong Kong Polytechnic University for levering av Vevo 2100 ultralydsystemet. Spesiell takk til Dr. Chunyi Wen fra Tverrfaglig Division of Biomedical Engineering, Hong Kong Polytechnic University, for opplæring og tilrettelegging. Dette arbeidet ble støttet av HK regjeringen RGC Grant GRF 17127215, 764 812 og HKU6 / CRF / 11G til Billy KC Chow.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1 inch 30 Gauge Needles BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  305128 Curved as in the procedure and Figure 1
27 Gauge Needle BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  301629 Make blunt and smooth for spacer
6/0 Dafilon B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0933066
6/0 Silkam B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0762067
Sterile gloves A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong.
Cotton Applicator Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. Local Shopping Center
Depilatory Cream Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong Local Shopping Center
Lexer-Baby Scissor FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 14078-10
Curved Iris Forcep FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle Holder WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  501989
Stereo Micrioscope WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  PZMIII-BS
GenTeal Eye Gel Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA.  Local Pharmacy
Heating Pad Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA.  DCT-20
Surgical tape Laboratory Animal Unit
Ketamine and Xylazine Laboratory Animal Unit
Betadine Laboratory Animal Unit
Buprenorphine Laboratory Animal Unit

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
  3. Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
  4. Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
  5. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
  6. Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
  7. Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
  8. Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
  9. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
  10. Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).

Tags

Medisin musemodell minimal tverrgående aorta banding hjertehypertrofi fibrose ekkokardiografi Doppler
Minimal Invasive Tverr aortic Innsnevring i Mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. More

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (121), e55293, doi:10.3791/55293 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter