Encyclopedia of Experiments: Biology
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour afficher ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- ابدأ بسقوع محلول عازل على شريحة المجهر ونقل الديدان السليمة إلى القطرة.
بمجرد أن يتبخر الإيثانول بعد الشطف النهائي ، أضف محلولا يحتوي على صبغة الحمض النووي ، DAPI ، إلى العينة.
أضف بعد ذلك مادة حافظة مضادة للتلاشي لإطالة العمر الافتراضي للعينة. تطبيق زلة غطاء وختمه على الشريحة. ثم استخدام المجهر الفلوري مع مرشح أزرق لتصور أجسام DAPI، والتي، اعتمادا على الخلية وحالتها دورة، يمكن أن تمثل الكروموسومات واحدة، وأزواج الكروماتيد الشقيقة، أو نواة كاملة.
- تحتوي سلالات Tetraploid على 12 زوجا من الكروموسومات ، والتي يمكن التحقق من صحتها عن طريق عد أجسام DAPI الملطخة في البويضات غير المخصبة.
ثم إسقاط 10 ميكرولترات من الإيثانول بنسبة 90٪ على الديدان ومشاهدة الإيثانول يتبخر تماما. بمجرد انتهاء التبخر، كرر عملية إضافة الإيثانول ومشاهدته يتبخر.
للتخزين على المدى الطويل من الشرائح، وجبل الديدان في المتاحة تجاريا أو محلية الصنع المضادة للتتلاشى. ثم إضافة غطاء وختم حواف مع طلاء الأظافر. بعد طلاء الأظافر قد جفت، يمكن تسجيل الشرائح. استخدام المجهر الفلوري و100 × التكبير.
أولا، العثور على البويضات غير المخصبة الأكثر نضجا، الذي هو على الفور المتاخمة لالحيوانات المنوية، ولم تدخل بعد إما spermatheca أو الرحم.
تحتوي البويضات البرية على ست أجسام DAPI في المتوسط. يشير وجود 12 جسما من أجسام DAPI إلى أن الحيوانات في هذه السلالة إما رباعية جزئية أو كاملة.
