$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Prenez un dispositif microfluidique constitué d’un tube d’entrée relié à une chambre microfluidique composée de canaux poreux pour le mouvement bactérien.
La chambre est reliée à une chambre d’observation reliée à une pompe à seringue via un tube de sortie.
Saturez les chambres avec un tampon pour éliminer toute bulle d’air.
Placez l’appareil sur l’étage du microscope et placez la lentille objective au-dessus de la chambre d’observation.
Ajustez les réglages du microscope pour visualiser clairement les cellules bactériennes individuelles.
Placez le tube d’entrée dans une suspension de bactéries marquées par fluorescence.
Démarrez le flux pour attirer les bactéries dans la chambre microfluidique, où elles traversent les canaux poreux pour atteindre la chambre d’observation.
Imagez la chambre d’observation à intervalles réguliers.
Générez une courbe de percée, qui représente la fraction de bactéries qui traversent la matrice poreuse au fil du temps.
Retirez le microfluidique du vide et placez-le sur l’étage du microscope. Utilisez la pompe à seringue pour la saturer avec un tampon de motilité.
À l’aide de la microscopie à champ clair ou du contraste de phase, ajustez le grossissement pour visualiser les cellules bactériennes individuelles et concentrez-vous sur le centre du canal d’observation. Changez les réglages du chemin de la lumière pour la microscopie à fluorescence. Ajustez la mise au point avec un décalage et le temps d’exposition de la caméra pour résoudre les cellules bactériennes individuelles, dans ce cas, 100 millisecondes.
Ensuite, insérez le tube d’admission dans un tube de deux millilitres contenant la suspension bactérienne. Inversez la direction de la pompe et commencez à retirer la suspension à un débit d’un microlitre par minute.
Scannez la coupe transversale de l’ensemble du canal d’observation, en enregistrant une image chaque minute.