Formation des granules de stress lors de l’infection à Shigella des cellules épithéliales cancéreuses

Commencez par une plaque multi-puits contenant des cellules épithéliales cancéreuses adhérentes sur une bâche de revêtement.

Ajoutez Shigella flexneri, une bactérie pathogène.

Centrifugez la plaque pour favoriser le contact bactérien avec les cellules, puis incubez.

Grâce à un système de sécrétion spécialisé, Shigella injecte des protéines de virulence dans les cellules épithéliales.

Ces protéines de virulence modulent le système de signalisation épithéliale, facilitant l’absorption bactérienne.

À l’intérieur des cellules, les bactéries continuent de sécréter des protéines de virulence, qui perturbent la traduction cellulaire et accumulent des ARNm non traduits.

Les protéines de liaison et de signalisation à l’ARN s’agrégent avec les ARNm non traduits, formant des granules cytoplasmiques sans membrane appelées granules de stress.

Jetez le média et lavez pour éliminer les bactéries détachées.

Ensuite, ajoutez un substrat de culture préchauffé complété par de la gentamicine pour éliminer les bactéries fixées à la surface.

Ajoutez un fixateur pour préserver les structures cellulaires et les granules de stress.

Jetez le fixateur et lavez avec un léger secouement pour éliminer les résidus du fixa