Dosage immunobille multianalyte : une technique d’immunodosage basée sur le flux pour la détection simultanée de plusieurs sous-types d’anticorps dans un échantillon de sérum humain

Le dosage immunobille multianalyte utilise plusieurs microsphères enrobées d’antigène pour reconnaître simultanément leurs anticorps cibles correspondants.

Pour commencer ce test, prélevez un mélange de microbilles dans un tube contenant le tampon approprié. Chaque bille est recouverte d’un antigène spécifique sur sa surface, ce qui permet de différencier facilement les billes les unes des autres.

Pipetez le mélange d’immunobilles enrobées dans les puits d’une plaque de dosage de microtitration. Complétez les puits avec l’échantillon de sérum contenant différents isotypes d’anticorps cibles. Ces variants présentent des différences subtiles dans leurs structures, ce qui permet à chaque puits d’avoir plusieurs anticorps primaires.

Incuber, pour permettre aux isotypes d’anticorps de l’échantillon de se fixer à des antigènes spécifiques capturés sur des billes immunitaires respectives. Laver avec un tampon de dosage pour éliminer les anticorps primaires non liés. Ajoutez dans le puits des anticorps secondaires marqués d’un colorant fluorescent, correspondant à chaque variante de l’anticorps primaire.

Chaque anticorps secondaire marqué se lie au site Fc de l’anticorps primaire respectif